卵巢癌組織中miR—26a的表達(dá)及其臨床意義

摘要：目的 探討分析卵巢癌組織中miR-26a的表達(dá)及其臨床意義。方法 采用qRT-PCR檢測(cè)卵巢癌組織中miR-26a的表達(dá)情況，分析卵巢癌組織中miR-26a表達(dá)與其臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的關(guān)系。結(jié)果 qRT-PCR檢測(cè)顯示，miR-26a在25例卵巢癌組織中的表達(dá)值為0.47±0.07，miR-26a在癌旁對(duì)照組中表達(dá)值為1.12±0.14相比，存在差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；卵巢癌臨床Ⅲ/Ⅳ期、Ⅰ/Ⅱ期組織中miR-26a表達(dá)值分別為0.66±0.09，0.21±0.02，存在差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；miR-26a在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)值分別為0.54±0.08、0.34±0.05，存在差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。miR-26a的表達(dá)隨著卵巢癌臨床分期演進(jìn)而增高。結(jié)論 miR-26a與卵巢癌的發(fā)生、臨床進(jìn)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，其可能成為卵巢癌治療、預(yù)后判斷的潛在生物學(xué)指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：miR-26a；卵巢癌；生長(zhǎng)與侵襲

miR-26a在多種惡性腫瘤的異常表達(dá)，同時(shí)與腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移等相關(guān)。Shen等[1]研究證明miR-26a 的異位表達(dá)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖和克隆形成，且促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用是通過(guò)ER-α的轉(zhuǎn)錄后的的miR-26a的抑制作用介導(dǎo)的。Chung[2]通過(guò)miRNA芯片分析了2例漿液性卵巢癌患者與健康組對(duì)照的miRNA 血清表達(dá)譜，血清中miR-26a被視為是漿液性卵巢癌潛在候選的新生標(biāo)志物。本研究利用RT-qPCR 技術(shù)檢測(cè)卵巢癌患者組織miR-26a的表達(dá)改變與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，探討卵巢癌發(fā)病機(jī)制及為臨床有效的治療方法提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 標(biāo)本來(lái)自本院2011年7月～2013年2月卵巢癌和癌旁正常組織標(biāo)本25例。

1.2逆轉(zhuǎn)錄 常規(guī)Trizol試劑（Invitrogen公司）抽提組織總RNA。紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA純度、濃度。逆轉(zhuǎn)錄按轉(zhuǎn)錄miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（吉瑪生物公司）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 qPCR檢測(cè) 采用Biorad公司的定量PCR儀 IQ5進(jìn)行定量PCR反應(yīng)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用 x±s表示，組間比較實(shí)施t檢驗(yàn)。P<0.05存在差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果

2.1 miR-26a在卵巢癌組織中的表達(dá)情況 qRT-PCR檢測(cè)顯示，miR-26a在25例卵巢癌組織中的表達(dá)值為0.47±0.07，miR-26a在癌旁對(duì)照組中表達(dá)值為1.12±0.14相比，存在差異（P<0.01），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 miR-26a表達(dá)水平與卵巢癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 卵巢癌臨床Ⅲ/Ⅳ期、Ⅰ/Ⅱ期組織中miR-26a表達(dá)值分別為0.66±0.09，0.21±0.02，存在差異，（P<0.01），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；miR-26a在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)值分別為0.54±0.08、0.34±0.05，存在差異，（P<0.01），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。miR-26a的表達(dá)隨著卵巢癌臨床分期演進(jìn)而增高。

3討論

卵巢癌的發(fā)病率占所有女性生殖腫瘤第六位，其中每年約有230，000例新發(fā)卵巢癌患者。卵巢癌由于缺少有效的篩查手段，確診時(shí)70%以上已是晚期，而且目前大部分病人對(duì)目前的化療案已產(chǎn)生耐藥，對(duì)卵巢癌患者的治療成功率很低。大約每年有140，000位卵巢癌患者死亡，且對(duì)人民的生命健康造成嚴(yán)重威脅[3]。

研究證明，miRNAs成為分子生物學(xué)研究的焦點(diǎn)，且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著極為密切的關(guān)系，研究者通過(guò)利用芯片等高等檢測(cè)技術(shù)發(fā)現(xiàn)miRNAs在腫瘤組織與正常組織之間存在明顯差異，且組織特異性明顯，重要的是現(xiàn)發(fā)現(xiàn)miRNAs能在人體的血清、血漿等體液中被檢測(cè)出來(lái)，進(jìn)一步為無(wú)創(chuàng)技術(shù)診斷帶來(lái)了可能[4]。目前有關(guān)miR-26a在腫瘤中的作用的研究報(bào)道很少。Chai等[5]發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞癌中miR-26a能使PI3K/AKT通路能下調(diào)巨噬細(xì)胞集落刺激因子的表達(dá)抑制巨噬細(xì)胞的招募。同時(shí)研究者發(fā)現(xiàn)miR-26a在乳腺癌細(xì)胞中顯著下調(diào)，miR-26a模擬物能顯著抑制乳腺癌組織及細(xì)胞增殖生長(zhǎng)。通過(guò)凋亡試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，miR-26a過(guò)表達(dá)將引起乳腺癌細(xì)胞凋亡。本文運(yùn)用qRT-PCR進(jìn)行檢測(cè)miR-26a在卵巢癌組織中的表達(dá)情況，同時(shí)分析其臨床表達(dá)意義。結(jié)果顯示與對(duì)照正常組上皮組織相比，miR-26a在卵巢癌組織表達(dá)顯著上調(diào)，存在差異（P<0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；此外，miR-26a隨著卵巢癌的臨床分期進(jìn)展而表達(dá)增高，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢癌表達(dá)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢癌，存在差異（P<0.01），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

我們的結(jié)果表明miR-26a在卵巢癌細(xì)胞與對(duì)照正常組織之間存在表達(dá)差異，同時(shí)也證明血清中miR-26a可以作為卵巢癌診斷的分子指標(biāo)；卵巢癌患者血清miR-26a表達(dá)與卵巢癌的臨床分期、病理等級(jí)呈正相關(guān)，同時(shí)也表明miR-26a可能作為癌基因參與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，不過(guò)日后仍需進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

[1]Shen W，Song M，Liu J，et al.MiR-26a promotes ovarian cancer proliferation and tumorigenesis[J].PLoS One.2014；9（1）：e86871.

[2]Chung YW，Bae HS，Song JY，et al.Detection of microRNA as novel biomarkers of epithelial ovarian cancer from the serum of ovarian cancer patients[J].Int J Gynecol Cancer.2013，23（4）：673-9.

[3]Wright JD，Shah M，Mathew L，et al.Fertility preservation in young women with epithelial ovarian cancer[J].Cancer，2009，115（18）：4118-26.

[4]WitwerKW.Circulating microRNA biomarker studies： pitfalls and potential solutions[J].Clin Chem. 2015 Jan；61（1）：56-63.

[5]Chai ZT，Zhu XD，Ao JY，et al.microRNA-26a suppresses recruitment of macrophages by down-regulating macrophage colony-stimulating factor expression through the PI3K/Akt pathway in hepatocellular carcinoma. J Hematol Oncol.2015 May 29；8：56.

編輯/孫杰