洪澤地區(qū)女性MTHFR和MTRR基因多態(tài)性分布研究

摘要：目的 調查洪澤縣女性亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶還原酶（MTHFR）A66G基因多態(tài)性的分布特征。方法 以洪澤地區(qū)120例漢族女性為研究對象，采集口腔黏膜上皮細胞，提取基因組DNA，采用Taqman-MGB技術，進行MTHFR和MTRR基因多態(tài)性檢測。統(tǒng)計分析本地區(qū)基因多態(tài)性的分布特征，并與已報道地區(qū)進行比較。結果 洪澤地區(qū)漢族女性的（MTHFR）C677T純合突變基因型頻率為17.5%，高于德陽、昆明、惠州，低于烏魯木齊、煙臺，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（MTHFR）A1298C純合突變基因型頻率為6.7%。（MTRR）A66GG純合突變基因型頻率為3.3%。結論 洪澤地區(qū)漢族女性MTHFR和MTRR基因多態(tài)性分布具有地域特異性，通過檢測MTHFR基因多態(tài)性來指導葉酸個體化增補是進一步降低當?shù)爻錾毕莸闹匾椒ā?/p>

關鍵詞：亞甲基四氫葉酸還原酶；甲硫氨酸合成酶還原酶；基因多態(tài)性

孕齡婦女作為一個特殊的群體，體內葉酸營養(yǎng)素的水平對于新生兒的健康生長發(fā)育和孕婦的身體健康都有極其重要的影響。葉酸攝入不足或者不能被人體有效利用是導致出生缺陷的主要原因[1]。5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）和甲硫氨酸合成酶還原酶（MTRR）是葉酸轉運和代謝的關鍵酶[2]。MTHFR基因C677T位點、A1298C位點與MTRR基因A66G位點的多態(tài)性會影響MTHFR與MTRR的酶活性降低，造成葉酸代謝異常，使DNA低甲基化導致唐氏綜合癥[3]；葉酸代謝障礙與神經(jīng)管缺陷、唇腭裂、先天性心臟病等出生缺陷相關，以及復發(fā)性流產(chǎn)[4]、妊娠期高血壓等孕期疾病密切相關[5]。研究通過檢測洪澤孕齡女性體內葉酸代謝關建酶MTHFR和MTRR編碼基因的3個多態(tài)性位點，預測受檢者的葉酸代謝能力，從而指導孕婦在孕前及孕期適量補充葉酸，預防出生缺陷的發(fā)生。同時，通過對本地區(qū)樣本基因檢測的結果統(tǒng)計分析，了解洪澤區(qū)婦女葉酸代謝相關基因的分布特點與群體遺傳學特征，為該地區(qū)預防出生缺陷制定針對性的干預措施提供科學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取洪澤縣自2013年9月～2015年12月到本院進行孕前與孕期檢查的女性，根據(jù)知情同意原則，經(jīng)受檢者本人同意后，采集其口腔粘膜細胞進行后續(xù)研究。對所有口腔粘膜細胞進行基因組DNA抽提，排除抽提不符合要求者，共獲得有效樣本120例。樣本提供者平均年齡（26.3±4.4）歲。

1.2方法 由洪澤保健院采集受檢者的口腔黏膜上皮細胞，利用硅膠吸附方法抽提樣本的基因組DNA。由合作方上海靶向分子醫(yī)學研究所，采用熒光定量PCR技術，分別檢測分析葉酸代謝相關的3個DNA單核苷酸多態(tài)性位點（MTHFR）C677T、A1298C和（MTRR）A66G。

1.3統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學分析，基因頻率采用基因計數(shù)法計算，對基因型及等位基因頻率進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1（MTHFR）C677T、A1298C、和（MTRR）A66G位點基因的多態(tài)性將樣本（MTHFR）C677T、A1298C和（MTRR）A66G位點的檢測數(shù)據(jù)分別進行Hardy-Weinberg遺傳平衡，均符合Hardy-Weinberg平衡，證明樣本具有本區(qū)域群體代表性。（MTHFR）C677T位點CC、CT、TT基因型的頻率分別為38.3%、44.2%、12.5%，（MTHFR）1298位點AA、AC、CC基因型的頻率分別為55%、38.3%和6.7%。（MTRR）A66G位點AA、AG、GG基因型的頻率分別為59.2%、37.5%、3.3%。

2.2（MTHFR）C677T位點洪澤地區(qū)女性MTHFR基因C677T位點的基因型分布頻率與其他五個省市的分布存在統(tǒng)計學差異（P<0.05），高于德陽、昆明、惠州，低于烏魯木齊、煙臺，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。分布特征存在明顯的地域差異，TT純合突變基因型的分布頻率北方高于南方。

2.3 MTHFR基因A1298C位點MTHFR基因A1298C位點的基因型分布與、昆明、惠州、烏魯木齊、煙臺的分布存在統(tǒng)計學差異（P<0.05）。

2.4 MTRR基因A66G位點洪澤婦女MTRR基因A66G位點的基因型分布與德陽、昆明、惠州、烏魯木齊、煙臺的存在統(tǒng)計學差異（P<0.05）。

3 討論

對洪澤地區(qū)孕齡女性進行了樣本分子流行病學調查，分析該地區(qū)孕齡女性與出生缺陷密切相關的MTHFR基因C677T位點、A1298C位點，及MTRR基因A66G位點的區(qū)域分布信息，并與已報道其他地區(qū)（烏魯木齊、煙臺、德陽、昆明、惠州）的基因頻率分布數(shù)據(jù)進行比較。洪澤MTHFR基因與MTRR基因的多態(tài)性位點分布頻率與其他地區(qū)有差異，TT基因具有北高南低的趨勢，差異與我國神經(jīng)管畸形發(fā)病率北高南低的情況相一致，其病因學研究表明相關因素中遺傳因素所占的比例不容忽視。MTHFR、MTRR是葉酸代謝過程中的關鍵酶，從而影響人體內葉酸營養(yǎng)水平和血漿同型半胱氨酸水平的狀況，導致出生缺陷（神經(jīng)管畸形、唇腭裂、先天性心臟病等）的發(fā)生率增加。已有的相關報道表明，MTHFR、MTRR基因多態(tài)性分布特征會由于研究對象、研究方法、種族和地區(qū)的不同而有所差異。了解各地人群不同的基因多態(tài)性等人群遺傳特征與分布特征，有利于各地因地制宜地指定具有針對性的衛(wèi)生政策，更合理地指導孕齡女性增補葉酸，從一級預防的水平減少出生缺陷，降低孕期疾病的發(fā)生。為我國下一步完善相關的公衛(wèi)政策提供有力的依據(jù)。

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編輯/安樺