黃芪糖蛋白對膠原誘導性關節炎小鼠Th17/Treg細胞免疫平衡的影響

劉慧 趙俊云 楊向竹 薛慧清 李彩彩 馬鑫 張娜 周然

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黃芪糖蛋白對膠原誘導性關節炎小鼠Th17/Treg細胞免疫平衡的影響

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目的 研究16kD黃芪糖蛋白對膠原誘導性關節炎(collagen-induced arthritis，CIA)模型小鼠Th17/Treg細胞免疫平衡的影響，探討黃芪糖蛋白治療膠原誘導性關節炎小鼠的免疫作用機理。方法 采用雄性Balb/c小鼠建立牛Ⅱ型膠原誘導性關節炎小鼠模型，將造模成功的小鼠隨機分為CIA模型組、氫化可的松陽性對照組、黃芪糖蛋白高、中、低劑量組，另設空白對照組；各治療組腹腔注射藥物14天，對照組與模型組注射等體積生理鹽水。采用流式細胞術檢測各組小鼠外周血CD3+CD4+IL-17A+Th17細胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞比例；Western blot法檢測各組小鼠脾組織中維甲酸相關孤獨受體γt(retinoid-related orphan receptor γt, RORγt)和叉頭狀轉錄因子3 (forkhead box protein 3,Foxp3)的蛋白表達水平。結果 流式檢測結果顯示,黃芪糖蛋白可顯著降低模型組小鼠外周血中CD3+CD4+IL-17A+Th17細胞比例(P<0.01)，提高CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞的比例(P<0.01)。Western blot結果顯示黃芪糖蛋白可顯著降低模型組小鼠脾組織中RORγt的表達(P<0.01),提高Foxp3的表達(P<0.01)。結論 黃芪糖蛋白提高Foxp3的表達水平，降低RORγt的表達水平，恢復Th17/Treg細胞之間的平衡，可能是黃芪糖蛋白治療膠原誘導性關節炎小鼠的機制之一。

黃芪糖蛋白； RORγt； Foxp3； 膠原誘導性關節炎小鼠

類風濕關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是以多關節滑膜炎、骨及軟骨破壞為主要特征的慢性自身免疫性疾病，致殘率極高[1]。到目前為止，雖然RA的病因及發病機制尚不明確，但T細胞功能紊亂，尤其是CD4+T細胞異常活化，在RA的發生發展中處于中心環節[2]。黃芪為傳統補中益氣中藥，具有補氣升陽、固表止汗等多種功效。本課題組通過水浸提法自膜莢黃芪的干燥根中分離出一種糖蛋白均一組分，即黃芪糖蛋白，進而從黃芪糖蛋白中分離純化出一種16kD組分，命名為AmRP10-16[3]。筆者團隊前期研究發現，黃芪糖蛋白具有一定免疫抑制作用，且可改善佐劑性關節炎大鼠的關節炎癥[4-5]。……