Fibulin-2在診斷乳腺基底膜連續性的準確性研究

譚好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江蘇省蘇北人民醫院 甲乳外科,江蘇 揚州,225001)

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Fibulin-2在診斷乳腺基底膜連續性的準確性研究

譚好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江蘇省蘇北人民醫院 甲乳外科,江蘇 揚州,225001)

目的 探討Fibulin-2在診斷乳腺基底膜連續性方面的準確性。方法 150例乳腺癌患者的標本經Fibulin-2染色來判斷基底膜的連續性，并經過病理科醫師進行免疫組化診斷，比較兩種方法的診斷結果。結果 Fibulin-2在診斷乳腺癌及正常乳腺組織基底膜連續性方面的準確度分別為89.3%、92.7%,敏感度為90.4%、98.5%,特異度分別為87.5%、81.3%。結論 Fibulin-2對乳腺基底膜連續性的判斷具有很高的準確性。

乳腺; 基底膜; 連續性; Fibulin-2

乳腺肌上皮細胞層的缺失是乳腺癌發生浸潤的重要標志，許多肌上皮細胞的標志物被用來鑒別乳腺癌是否發生浸潤[1-3]。既往多采用免疫組織化學法檢測p63、Caponin 等肌上皮細胞標記蛋白和基底膜組分蛋白Ⅳ型膠原蛋白來判斷基底膜是否完整，從而輔助診斷導管內原位癌(DCIS)是否伴有微浸潤。由于標記物的敏感性、特異性和肌上皮細胞的不連續性存在差異，導致該方法診斷DCIS是否伴間質微浸潤仍存在大量的不足[4]。本實驗通過檢測乳腺組織中Fibulin-2蛋白來判斷基底膜的完整性，評價其在診斷基底膜完整性中的價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年9月—2015年12月在江蘇省蘇北人民醫院手術治療、資料完整的乳腺癌150例，并收集相應病例的癌旁毗鄰正常乳腺組織(癌旁組織指距癌灶大于2 cm的組織)。所有病例均經病理證實基底膜是否完整。患者年齡23～85歲，平均46.5歲。患者的臨床病理資料見表1。

1.2 常規基底膜完整性檢測

所有病例均經2名有經驗的病理科醫師進行基底膜完整性的檢測，包括常規石蠟切片、基底膜成分檢測(Ⅳ型膠原蛋白、層粘連蛋白)及肌上皮細胞層檢測(p63)。三者反復確認基底膜的完整性。

1.3 Fibulin-2檢測

應用免疫組織化學方法檢測Fibulin-2在乳腺組織中的表達，其完整性的判斷標準為導管周圍有連續的線狀染色條帶存在，否則為不完整。結果同樣經2名有經驗的病理科醫師進行判斷。

表1 乳腺癌患者臨床病理資料

1.4 準確性的計算

以常規檢測方法的結果作為比較標準，得出Fibulin-2在判斷基底膜完整性時的真陽性、假陽性、真陰性、假陰性數，然后計算出Fibulin-2在判斷乳腺癌及正常乳腺組織2組標本基底膜完整性的準確度、敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值。

2 結 果

作者對Fibulin-2及常規檢測方法的結果進行詳細記錄并比較,Fibulin-2在判斷150例乳腺癌基底膜完整性的結果為：真陽性85例，假陽性7例，真陰性49例，假陰性9例，陽性預測值92.4%,陰性預測值84.5%,敏感度90.4%,特異度87.5%,準確度89.3%。在150例正常乳腺組織的相應結果為136例、6例、3例、5例、97.8%、86.7%、98.5%、81.3%、92.7%。見表2、圖1。

表2 Fibulin-2與常規檢測方法對比

圖1 Fibulin-2及常規檢測方法對基底膜連續性的判斷

3 討 論

原位癌的主要特點是腫瘤細胞局限在乳腺中小導管內或小葉內而沒有突破基底膜。一旦在原位癌周圍的間質中見到單個或簇狀的癌細胞間質浸潤就被稱為微浸潤，這種情況常常較難診斷，特別容易漏診和誤診[5]。國外文獻[6]報道在乳腺癌空芯針活檢中由于無法判斷基底膜的完整性，乳腺癌微浸潤的漏診、誤診率可達38%。這必然又對患者的后續治療方案產生非常大的影響。這種情況下病理科醫生往往進行腺上皮和肌上皮的雙重染色，其中腺上皮染色可顯示癌細胞雜亂分布，而肌上皮染色可判斷癌細胞是否浸潤到了間質[7]。因此肌上皮細胞層的完整性就成了判斷基底膜是否完整(亦即判斷有無浸潤)的一個重要方法。常用的肌上皮細胞層標志物有p63、SMA等。在部分導管內原位癌中p63、SMA表現出肌上皮細胞層的不連續性甚至部分缺失[8-9],這讓病理科醫師判斷基底膜是否完整遭遇了巨大挑戰。除了肌上皮細胞層外，基底膜成分，如Ⅳ型膠原蛋白、層黏連蛋白等，亦可用于判斷基底膜的完整性，但是大量文獻報道這些基底膜成分的表達有很大的不穩定性，在判斷基底膜完整性時很不可靠[10]。

Fibulin-2是Kluge等[11]首先從小鼠成纖維細胞cDNA庫克隆出來的，主要表達于血管壁、基底膜等。研究[12-14]發現，Fibulin-2可以與多種細胞外基質蛋白，特別是基底膜成分蛋白相互作用，參與抑癌作用、損傷修復、細胞運動、信號轉導等過程，在維持細胞外基質的穩定和抑制腫瘤細胞的浸潤與轉移中發揮作用。本研究發現Fibulin-2表達于基底膜周圍，呈連續性表達，證明Fibulin-2與基底膜成分相互作用，因此其表達可用于判斷基底膜的存在。相比于p63等肌上皮細胞的不連續性表達，由于Fibulin-2直接表達于基底膜周圍，因此其可以作為直接標志物來判斷基底膜的完整性，具有很高的可靠性。同時由于Ⅳ型膠原蛋白等基底膜成分往往表達不穩定，在很多時候雖然其表達缺失但是仍然無法判斷基底膜是否完整，而Fibulin-2卻能夠在絕大多數基底膜周圍連續表達，具有很高的穩定性，在判斷基底膜完整性方面具有天然優勢。通過與p63、Ⅳ型膠原蛋白等傳統標志物的比較，作者發現Fibulin-2在判斷基底膜完整性方面具有很高的敏感性和特異性，能夠準確地鑒別出癌細胞是否有浸潤，特別是原位癌周圍的微小浸潤。因此,Fibulin-2可以作為肌上皮細胞層標志物的有益補充，完全可以用來判斷基底膜是否完整，并可進一步鑒別癌細胞是否有浸潤以協助臨床醫生制定患者的后續治療方案，具有極高的臨床應用前景。

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Accuracy of Fibulin-2 in diagnosis of continuity of breast basement membrane

TAN Haosheng,ZHANG Jiaxin,FU Deyuan,ZHU Yuxiang

(DepartmentofThyroidandBreastSurgery,SubeiPeople′sHospital,Yangzhou,Jiangsu,225001)

Objective To explore the accuracy of Fibulin-2 in the diagnosis of the continuity of the breast basement membrane. Methods The continuity of the basement membrane of 150 patients with breast cancer was determined by Fibulin-2 and the pathological immunohistochemical diagnosis respectively. Diagnosis results were compared between the two groups. Results The diagnostic accuracy of Fibulin-2 in breast cancer and adjacent normal breast tissue was 89.3% and 92.7% respectively. The sensitivity was 90.4% and 98.5%,and the specificity was 87.5% and 81.3% respectively. Conclusion Fibulin-2 has high accuracy in judging the continuity of the breast basement membrane.

breast; basement membrane; continuity; Fibulin-2

2016-03-16

國家自然科學基金資助項目(81172508)

符德元,E-mail: fdyjsyz@163.com

R 655.8

A

1672-2353(2016)21-052-03

10.7619/jcmp.201621016