山楂總黃酮提取純化工藝研究進展

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摘要：山楂總黃酮是傳統中藥金銀花的主要有效成分之一，具有降壓、增加冠脈流量、強心、降血脂和抗動脈粥樣硬化等作用。綜述國內近幾年來山楂總黃酮的提取分離純化技術研究進展，為進一步開展山楂研究提供參考。

關鍵詞：山楂；總黃酮；提取；純化

中圖分類號：R932 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2016）07-0051-02

山楂為薔薇科山楂屬植物山里紅（Crataegus pinnatifida Bge.var.maju N.E.Br）或山楂（Crataegus pinnatifida Bge）的干燥成熟果實，為藥食同源植物。據報道，山楂的果、核、葉均含有豐富的黃酮類物質，具有降壓、增加冠脈流量、強心、降血脂和抗動脈粥樣硬化等作用，臨床試驗證明其療效顯著且安全無毒副作用。國內對山楂總黃酮的提取、分離純化工藝等進行了大量研究，在查閱收集大量文獻的基礎上，綜述山楂總黃酮的提取、分離純化工藝研究進展，旨在為未來研究提供參考。

1 山楂總黃酮化合物提取方法

1.1 溶劑提取法

溶劑提取山楂總黃酮是較為傳統的提取工藝，按提取介質分為水提法和醇提法，按提取方式分為煎煮法、回流法和滲漉法。

黃欣欣等采用響應面法優化回流提取大果山楂總黃酮的工藝條件，結果表明：乙醇體積分數、提取溫度和提取時間對大果山楂總黃酮提取量有極顯著影響；提取溫度與乙醇體積分數、提取時間與提取溫度的交互作用對提取量也有極顯著影響；提取溫度與料液比的交互作用有顯著影響。回流提取大果山楂總黃酮的最佳工藝條件為：以50%乙醇為提取溶劑，在提取溫度70 ℃、料液比1︰18的條件下提取3.5 h，大果山楂總黃酮提取量達22.68 mg/g。

蔡向杰等以乙醇為提取試劑，在單因素試驗的基礎上確定最佳工藝條件：乙醇濃度為80%，提取溫度為55 ℃，提取時間為2.5 h，提取次數為3次，山楂總黃酮含量高達16.085 3 mg/g。

張明采用單因素和正交試驗研究不同工藝條件對山楂黃酮提取效率的影響，結果表明：山楂黃酮提取的最適宜方法為滲漉法，其最佳工藝參數是溶劑為50%的乙醇，料液比1︰8 （g/mL），浸泡時間72 h，流速為中速（3 mL/min）。

1.2 超聲波輔助提取

超聲波輔助提取是在水浸提的同時加超聲波輔助，不僅縮短提取時間、提高提取率，同時避免高溫對有效成分的影響。郭文娟等通過單因素試驗和正交試驗確定的超聲輔助提取總黃酮的最優提取工藝條件為：料液比1︰25（每克山楂核加入25 mL提取劑，下同），加入體積分數50%的乙醇，在60 ℃下用250 W超聲輔助提取40 min，山楂核中總黃酮的提取率可達到7.89%。覃學謙采用正交試驗法，以廣山楂總黃酮的含量為指標優化超聲提取廣山楂總黃酮工藝條件，確定影響因素依次為提取溶劑體積分數>溶劑用量﹥提取次數﹥超聲提取時間；經優化的廣山楂總黃酮提取工藝為：加入16倍量70%乙醇超聲提取3次，每次提取時間40 min，廣山楂總黃酮含量可達3.49%。李利華等以山楂為原料，通過單因素試驗和正交試驗設計優化山楂總黃酮的超聲波輔助提取工藝條件，其結果表明，乙醇體積分數和超聲浸提溫度對山楂總黃酮提取率具有顯著影響；山楂總黃酮超聲波輔助提取的最佳工藝條件是：乙醇體積分數60%，超聲浸提溫度50 ℃，浸提時間60 min，料液比1︰60（g︰mL），提取率為7.61%。

1.3 微波輔助提取

微波輔助提取是在水浸提的同時加入微波。與傳統的水浸提法相比，微波輔助提取具有選擇性高、操作時間短、溶劑消耗小、有效成分收率高的特點。郭梅等利用微波輔助提取山楂中黃酮類化合物，采用正交試驗優化工藝條件，結果表明，影響山楂黃酮類化合物得率的主次因素順序為微波萃取時間>微波功率>料液比>乙醇濃度；最佳的提取工藝參數為微波功率400 W，萃取時間120 s，乙醇濃度60%，料液比1︰40（g/mL），黃酮類化合物的得率為3.19%。李敏等用微波提取法提取山楂總黃酮，最佳提取工藝條件為乙醇濃度50%、提取時間20 min、微波功率300 W、料液比1︰30（g/mL），總黃酮提取率可達13.4%。

1.4 酶輔助提取

酶解法提取大棗多糖主要是利用酶解使山楂結構變得松散，降低與原料的結合力，利于黃酮浸出。劉曉光等采用纖維酶法提取山楂黃酮，考察纖維素酶濃度、pH值、溫度、時間、料液比5個單因素，結果表明：最佳條件為酶質量濃度0.15 mg/mL，酶解pH值5.0，酶解溫度55 ℃，酶解時間90 min，料液比為1︰12（g︰g），黃酮提取率可達90%，且黃酮類化合物活性依然存在。高文秀等采用復合酶解法協同超聲波提取、纖維素酶酶解法協同超聲波法提取和果膠酶酶解法輔助超聲波法提取山楂中總黃酮，均取得了較高的提取率。

1.5 其它提取方法

除以上常用提取方法外，也有很多研究采用其它提取技術，如超聲波-微波輔助堿液提取、逆流提取、表面活性劑提取、表面活性劑CTMAB-微波協同提取、加壓溶劑萃取法提取等，均取得了較好的提取效果。

2 山楂總黃酮的分離純化

2.1 大孔樹脂柱層析

大孔樹脂具有吸附量大、選擇性好、易解吸、易再生、成本低、效率高、特別適于水溶性化合物提取分離等優點。利用大孔吸附樹脂分離純化綠原酸，工藝較簡單、成本低、產率高。

張吉祥等比較了10種大孔吸附樹脂對山楂黃酮的靜態吸附效果，確定D101樹脂最佳工藝參數為：進樣黃酮濃度18.75 mg/mL、pH 3～4、上樣流速1 BV/h、洗脫液乙醇體積分數75%、洗脫液流速1 BV/h；上樣量達到6 BV時，樹脂達到吸附平衡，當洗脫液用量為3 BV時，達到洗脫終點；所獲得純化產物中的蘆丁、金絲桃苷和槲皮素總含量達到65.47%，回收率為86.22%。

李紅丹比較13種大孔樹脂對4種山楂果實總黃酮的吸附分離效果，選擇HPD722型大孔樹脂最佳純化工藝條件為：上樣流速0.84 mL/min，總黃酮經樹脂充分吸附后，加40%乙醇動態洗脫。經HPD722型大孔吸附樹脂純化后，4種山楂的總黃酮、蘆丁、金絲桃苷質量分數和抗氧化活性分別顯著提高。

董恒穎等對ADS系列大孔吸附樹脂分離純化山楂葉總黃酮的工藝條件進行篩選，確定ADS-8型大孔吸附樹脂的最佳工藝條件為：上柱液pH值4.5，上柱液總黃酮含量1 000 mg/L，以流速3 BV/h上柱，上樣量100 mL（約5 BV）；所用洗脫劑乙醇體積分數為40%，以2 BV/h的流速洗脫，洗脫劑用量150 mL（約7.5 BV），所得產品的總黃酮含量達80%。

2.2 其它分離純化方法

除以上常用的樹脂分離純化方法外，還有很多研究采用了其他技術，如聚酰胺樹脂法、膜技術偶合樹脂法、不同金屬離子溶液（銅，鋅，鐵，鋁）純化法、微濾-超濾法與醇沉法等，均取得了較好的提取效果。

3 結語

山楂作為傳統中藥，對機體具有廣泛作用，是國家第一批藥食兼用植物，具有極高的營養價值和保健作用，其有效成分山楂黃酮類化合物是發揮作用的主要成分。然而，關于山楂黃酮類化合物的研究還需進一步深入，通過大量的試驗研究使山楂用于制藥生產和新型保健用品開發。

參考文獻

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