山羊同時接種口蹄疫O—A—亞Ⅰ型三價滅活疫苗和小反芻獸疫活疫苗后30d內(nèi)抗體動態(tài)研究

鄧林玉+楊登林+楊莉+黃麗+李盛瓊+王文禮

摘要：隨機選擇從未接種過小反芻獸疫（PPR）、口蹄疫（FMD）O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗且經(jīng)檢測體內(nèi)未含相關(guān)抗體的健康山羊40只，隨機分成4組：第1組接種小反芻獸疫活疫苗，第2組接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗，第3組同時接種小反芻獸疫活苗、口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗，第4組不接種任何疫苗作為對照組，觀察各組免疫副反應(yīng)。在接種后7、14、21、28 d采血，用ELISA抗體檢測試劑盒檢測抗體動態(tài)。結(jié)果顯示，接種后7 d時PPR單獨免疫組和聯(lián)合免疫組中PPR抗體陽性率均能達(dá)到80%；14～28 d時PPR抗體陽性率均能達(dá)到100%，PPR組和聯(lián)合免疫組中同期PPR抗體OD450nm值之間比較差異均不顯著；接種后第7天時FMD O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗單獨免疫組和聯(lián)合免疫組中FMD O型抗體陽性率均能達(dá)到60%，14 d時FMD O型抗體陽性率均能達(dá)到100%；接種后14 d時FMD O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗單獨免疫組和聯(lián)合免疫組中亞FMD亞Ⅰ型和A型抗體陽性率均能達(dá)到國家規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：小反芻獸疫（PPR）；口蹄疫O-A-亞Ⅰ型；聯(lián)合免疫；抗體效價

中圖分類號：S858.27 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）07-0026-02

小反芻獸疫（PPR）俗稱羊瘟，是由小反芻獸疫病毒引起的一種急性病毒性傳染病，主要感染小反芻動物，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征。口蹄疫（FMD）（屬一類傳染病）俗名“口瘡”、“辟癀”，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。主要侵害偶蹄獸，偶見于人和其他動物。其臨診特征為口腔黏膜、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水皰。小反芻獸疫和口蹄疫是危害山羊的兩種主要的傳染病，生產(chǎn)實踐中一般采用疫苗預(yù)防為主。本試驗比較了單獨接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗和小反芻獸疫（PPR）活疫苗及同時接種兩種疫苗后山羊體內(nèi)抗體情況，旨在為實際生產(chǎn)中預(yù)防小反芻獸疫和口蹄疫提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

小反芻獸疫活疫苗：每頭份疫苗含有的小反芻獸疫弱毒病毒至少為103TCID50，性狀為乳白色或淡黃色海綿狀疏松團塊，易與瓶壁脫落，加稀釋液后迅速溶解，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號為2015023-2。

牛羊口蹄疫O型-A型-亞洲Ⅰ型三價滅活疫苗（O/HB/HK/99株+AF/72+Asia-1/XJ/KLMY/04株）：含滅活的口蹄疫O型病毒O/HB/HK/99株、A型（AF/72）株和亞型Ⅰ（Asia-1/XJ/KLMY/04株）病毒株，滅活前病毒含量分別至少為107.0TCID50/mL或107.0LD50/mL，性狀為乳白色或淡紅色粘滯性均勻乳狀液，中牧實業(yè)股份有限公司蘭州生物制藥廠生產(chǎn)，批號為1506001。

試驗用抗體檢測試劑盒：小反芻獸疫抗體檢測試劑盒（貨號EPPPR-1002）Kernel.Inc制造。8150 Derry Street，Suite B，Harrisburg，PA 17111，USA 。口蹄疫O（貨號7610420）、A（貨號7610850）、亞Ⅰ型（貨號7610870）抗體檢測試劑盒均由荷蘭萊利斯塔德農(nóng)業(yè)公司生產(chǎn)。

1.2 試驗山羊分組和檢測方法

在某養(yǎng)羊場隨機選擇已斷奶的且未經(jīng)過任何疫苗免疫過的健康山羊40只，由專人飼養(yǎng)和管理，飼喂相同的草料和相同適量精料，自由飲水。試驗前對所選的山羊進(jìn)行全面健康檢查，體重15 kg/只左右，呼吸為12～20次/min，脈搏為70～80次/min，體溫在38.5～39.7 ℃，食欲正常，精神狀態(tài)良好；經(jīng)頸靜脈采血檢測，PPR抗體、FMD O型、A型、亞洲Ⅰ型抗體均呈陰性。40只山羊隨機分成4組，第1組接種小反芻獸疫活疫苗，第2組接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗，第3組同時接種小反芻獸疫活苗、口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價滅活疫苗，第4組不接種任何疫苗作為對照組，觀察各組免疫副反應(yīng)。在接種后7、14、21、28 d采血，用相應(yīng)的抗體檢測試劑盒檢測抗體動態(tài)。

1.3 結(jié)果判定

使用小反芻獸疫抗體檢測試劑盒和口蹄疫O-A-亞Ⅰ型抗體檢測試劑盒分別檢測各組山羊的抗體動態(tài)，具體方法及結(jié)果判定參照試劑盒說明書。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析

將所得樣品OD450nm值用SPSS10.0軟件的One-Way ANVOA方法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床接種副反應(yīng)

接種疫苗后72 h內(nèi)觀察山羊，沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，其體溫、呼吸、脈搏、飲食情況均在正常范圍內(nèi)。

2.2 各組山羊血清抗體動態(tài)

經(jīng)檢測，試驗開始前所有被選擇試驗用山羊和試驗開始后對照組山羊血清中均未檢出PPR和FMD O、A和亞Ⅰ型抗體，說明整個試驗期間，試驗組山羊所產(chǎn)生的PPR和FMD O、A、亞Ⅰ型抗體均源自接種相應(yīng)疫苗后而產(chǎn)生，山羊均不存在自然感染PPR和FMD O、A、亞Ⅰ型病毒后產(chǎn)生相應(yīng)抗體的可能性。

從PPR抗體陽性率變化方面來看，PPR活疫苗無論是單獨免疫還是與FMD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗同時免疫，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗在接種后28 d內(nèi)對PPR抗體的產(chǎn)生沒有任何負(fù)面影響，PPR單獨免疫組和聯(lián)合免疫組中PPR抗體陽性率均能達(dá)到80%；14～28 d時PPR抗體陽性率均能達(dá)到100%，兩個試驗組之間各期PPR抗體OD450nm值差異均不顯著（P>0.05）。

從FMD O型抗體陽性率變化看，無論FMD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗單獨接種還是和PPR活疫苗同時接種山羊，在接種后14～28 d內(nèi)FMD O型抗體陽性率均能達(dá)到100%，兩試驗組之間FMD O型抗體OD450nm均值差異不顯著（P>0.05），兩試驗組與對照組相比較，其OD450nm均值均差異顯著（P<0.05），說明PPR活疫苗和FMD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗同時接種，PPR疫苗在接種后7～28 d內(nèi)對FMD O型抗體的產(chǎn)生沒有任何負(fù)面影響。

從FMD A型及亞洲Ⅰ型抗體陽性率變化看，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗和PPR活疫苗同時接種山羊，PPR疫苗對FMD A型及亞洲Ⅰ型抗體的產(chǎn)生沒有影響，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價滅活疫苗無論單獨還是和PPR活疫苗同時接種，兩試驗組之間A型及亞洲Ⅰ型抗體OD450nm均值差異均不顯著（P>0.05），而兩試驗組與對照組之間A型及亞洲Ⅰ型抗體OD450nm值比較均差異顯著（P<0.05）。在接種后14 d時A型和亞Ⅰ型抗體陽性率均能達(dá)到70%；在接種后21d可達(dá)到100%的抗體陽性率。