共軛亞油酸對C2C12肌細胞生脂和生肌分化的影響

齊仁立　王　琪　王　敬　楊飛云　劉作華　黃金秀

(重慶市畜牧科學院，農業部養豬科學重點實驗室，養豬科學重慶市市級重點試驗室，榮昌402460)

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共軛亞油酸對C2C12肌細胞生脂和生肌分化的影響

齊仁立王琪*王敬楊飛云劉作華黃金秀**

(重慶市畜牧科學院，農業部養豬科學重點實驗室，養豬科學重慶市市級重點試驗室，榮昌402460)

本研究分析了共軛亞油酸(CLA)對C2C12肌細胞生脂轉分化和生肌分化的影響。分別培養并誘導C2C12鼠源肌細胞生脂轉分化和正常的生肌分化，同時分別使用終濃度為50 μmol/L的c9,t11-CLA和t10,c12-CLA處理細胞，并設對照組，取生脂轉分化第10天和生肌分化第8天的細胞用于實時定量PCR檢測，觀察c9,t11-CLA和t10,c12-CLA對C2C12肌細胞不同分化的影響。結果表明：1)與對照組相比，c9,t11-CLA促進了C2C12肌細胞的生脂轉分化，顯著增加了細胞內甘油三酯(TG)含量(P<0.05)，顯著上調了細胞內脂肪酸合成酶(FAS)、CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)、過氧化物酶體增殖劑激活受體γ(PPARγ)和脂肪酸結合蛋白4(FABP4)基因的表達水平(P<0.05)；與對照組相比，t10,c12-CLA則抑制了C2C12肌細胞的生脂轉分化，顯著減少了細胞內TG含量(P<0.05)，顯著下調了細胞內C/EBPα、PPARγ和FABP4基因的表達水平(P<0.05)。免疫印跡雜交結果顯示FAS和FABP4的蛋白質表達水平也發生了與基因表達相一致的變化。2)與對照組相比，t10,c12-CLA抑制了C2C12肌細胞的生肌分化，顯著減少了細胞內肌管數/細胞數(P<0.05)，顯著下調了細胞內肌細胞生成素(MYOG)和成肌分化抗原(MYOD)基因的表達水平(P<0.05)；與對照組相比，c9,t11-CLA則顯著上調了細胞內MYOG基因的表達水平(P<0.05)，對C2C12肌細胞的生肌分化有一定程度的促進作用。免疫印跡雜交結果顯示MYOG和MYOD的蛋白質表達水平也發生了與基因表達相一致的變化。以上結果表明，CLA對動物骨骼肌細胞的正常生肌分化和生脂轉分化都具有重要的調節作用。

共軛亞油酸；C2C12肌細胞；生脂；生肌；分化

由于哺乳動物的肌肉細胞和脂肪細胞源于共同的多能間充質干細胞，生肌細胞在特定條件下可以轉分化為脂肪細胞或脂肪細胞樣細胞，而脂肪細胞也可以轉分化為肌肉細胞[1-3]。生脂轉分化的肌細胞會失去生肌能力并獲得脂肪細胞的特性，細胞內大量產生和沉積脂肪，表達脂肪細胞特異性基因及其編碼蛋白。

共軛亞油酸(conjugated linoleic acid，CLA)是一類含有共軛雙鍵的亞油酸異構體，具有復雜的生理作用，包括促生長、抗腫瘤、抗氧化和抗肥胖等[4-6]。CLA的抗肥胖作用包括抑制脂肪細胞分化、減少細胞內脂肪生成和沉積、誘導脂肪細胞凋亡等[7]。c9,t11-CLA和t10,c12-CLA是2種主要的CLA異構體，通常情況下二者的生理作用有很大差異。……