細胞毒素相關蛋白A和白細胞介素-9與消化性潰瘍的關系研究

劉寶珍, 屈冬冬, 金世祿, 劉京運

(1. 山東省濱州市人民醫院 消化科; 山東 濱州, 256610;2. 濱州醫學院臨床學院, 山東 濱州, 256603)

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細胞毒素相關蛋白A和白細胞介素-9與消化性潰瘍的關系研究

劉寶珍1, 屈冬冬2, 金世祿1, 劉京運2

(1. 山東省濱州市人民醫院 消化科; 山東 濱州, 256610;2. 濱州醫學院臨床學院, 山東 濱州, 256603)

目的探討細胞毒素相關蛋白A(CagA)、白細胞介素-9(IL-9)與消化性潰瘍發病的關系。方法選取消化性潰瘍患者40例為研究組，慢性胃炎患者40例為對照組，檢測2組血清CagA、IL-9水平及幽門螺桿菌(Hp)感染情況等，并對消化性潰瘍進行單因素、多因素Logistic回歸分析。結果研究組血清CagA水平明顯高于對照組, IL-9水平明顯低于對照組(P<0.001); 研究組Hp感染率及CagA+Hp感染率均明顯高于對照組(P<0.01); CagA+患者血清IL-9水平明顯低于CagA-患者(P<0.01)。Logistic回歸分析顯示, CagA+Hp感染、吸煙、生活不規律、Ⅰ級親屬共患病、精神因素、飲酒與消化性潰瘍的發生密切相關(P<0.01), CagA+Hp感染與所選分層因素之間在消化性潰瘍的發生中具有協同作用。結論CagA+幽門螺桿菌感染可能與消化性潰瘍的發生有關, IL-9可能對Hp感染所致的消化性潰瘍具有抑制作用。消化性潰瘍的發生是眾多因素共同作用的結果。

消化性潰瘍; 細胞毒素相關蛋白A; 白細胞介素-9; 幽門螺桿菌

自1983年首次從人胃黏膜活檢標本中分離培養出幽門螺桿菌(Hp)后，諸多研究[1-2]表明Hp感染是消化性潰瘍的重要病因之一，與消化性潰瘍的發生密切相關，但感染Hp后是否致病取決于不同的毒力株。現已證實，一半以上的Hp菌株均表達細胞毒素相關蛋白A(CagA), CagA是Hp的重要毒力因子之一，會引起更為嚴重的炎癥反應、消化道黏膜損傷等[3-4]。白細胞介素-9(IL-9)能通過抑制細胞免疫活性，發揮抗炎效應，具有多效性免疫功能[5]。本研究探討CagA、IL-9與消化性潰瘍發病的關系。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年9月—2014年9月就診的消化性潰瘍患者40例為研究組，慢性胃炎患者40例為對照組，均經胃鏡結合組織病理學檢查確診，排除患有其他消化道疾病、其他急慢性疾病、惡性腫瘤的患者。其中研究組男30例，女10例；年齡38～66歲，平均(46.5±5.6)歲。對照組男28例，女12例；年齡37～68歲，平均(47.2±5.3)歲。2組一般資料比較差異無統計學意義，具有可比性(P>0.05)。研究方案經本院倫理委員會研究并批準進行，入組患者及家屬均知情同意并書面簽署同意書。

1.2方法

采集所有患者空腹末梢血3 mL, 離心后分離血清，采用ELISA法檢測各組血清CagA、IL-9水平。根據14C-UBT、RUT和病理性特殊染色確定Hp陽性(至少有2項測定結果陽性則判定為Hp陽性)；對Hp感染者采用斑點金免疫滲濾法檢測血清抗Hp-CagA IgG。根據設計假設，選擇可能與消化性潰瘍發生有關的危險因素并制定統一調查表[4], 內容主要包括個人資料、生活習慣、健康狀況、家族史、社會經濟、衛生狀況、精神因素等，對消化性潰瘍進行單因素、多因素Logistic回歸分析。

1.3統計學分析

2　結　果

2.12組血清CagA、IL-9水平及Hp感染情況

研究組血清CagA水平明顯高于對照組, IL-9水平明顯低于對照組(P<0.01)。研究組Hp感染率為92.5%(37/40), 明顯高于對照組的47.5%(19/40)(P<0.01)。見表1。

與對照組比較, **P<0.01。

2.2血清CagA+HP感染率及IL-9水平比較比較

研究組CagA+HP感染率為90.0%(36/40), 明顯高于對照組的22.5%(9/40)；研究組、對照組CagA+Hp血清IL-9水平均明顯低于CagA-Hp患者(P<0.01)。見表2。

表2　2組CagA+比例及其血清IL-9水平比較[n(%)]

與CagA-比較, **P<0.01。

2.3消化性潰瘍單因素條件Logistic回歸分析

Logistic回歸分析顯示, CagA+Hp感染、吸煙、生活不規律、Ⅰ級親屬共患病、精神因素、飲酒與消化性潰瘍的發生密切相關(P<0.01), 其中CagA+Hp感染與消化性潰瘍的關系最為密切, OR值最大，生活不規律次之。見表3。

表3　消化性潰瘍單因素條件Logistic回歸分析

2.4消化性潰瘍多因素條件Logistic回歸分析

對單因素分析有意義的因素進行多元Logistic回歸分析，結果顯示CagA+Hp感染與所選分層因素之間在消化性潰瘍的發生中具有協同作用。見表4。

表4　消化性潰瘍多因素條件Logistic回歸分析

3　討　論

Hp廣泛存在于人體，與消化性潰瘍、胃炎、胃癌等多種消化系統疾病密切相關[6]。研究[7]認為Hp產生的毒素CagA雖然含量甚微，但能通過白細胞趨化及激活，引起強烈的免疫反應和組織損傷。本研究通過ELISA法檢測患者血清CagA, 結果顯示研究組血清CagA水平明顯高于對照組，提示CagA與消化性潰瘍的關系較慢性胃炎更為密切。CagA基因表達分子量為120～145 KDa的CagA蛋白，能夠通過PAI構成的分泌系統進入消化道上皮細胞，破壞細胞頂端連接復合體的結構及功能，干擾上皮細胞分化，降解基膜。研究[8]認為, CagA陽性與胃十二指腸疾病有關。Caliskan等[9]將492例患者分為無癥狀對照組、慢性萎縮性胃炎組、胃腺癌組、十二指腸球部潰瘍組及胃潰瘍組5組，計算各組Hp及CagA+Hp的感染率，結果顯示, Hp相關性疾病如慢性萎縮性胃炎、胃腺癌及消化性潰瘍時，以CagA+Hp感染為主, CagA+Hp感染率較無癥狀對照組更高。近年來，Hp感染與消化性潰瘍的關系受到學者們的普遍關注，諸多研究結果均證實Hp感染是消化性潰瘍發病諸因素中的危險因素之一。國外學者Saber等[10]采用ELSIA法檢測患者對CagA抗體的免疫反應，發現超過70%的胃潰瘍患者和100%的十二指腸潰瘍患者呈陽性。Cheng等[11]也報道，十二指腸潰瘍患者血清中的CagA抗體檢出率為84%, 顯著高于非潰瘍性消化道疾病患者。本研究結果顯示研究組與對照組Hp感染率分別為92.5%、47.5%, CagA陽性HP感染率分別為90.0%、22.5%, 研究組Hp感染率及CagA+HP感染率均明顯高于對照組。提示CagA陽性Hp感染與消化道潰瘍的發生密切相關，抗CagA抗體陽性的檢測結果能夠作為消化性潰瘍的臨床診斷參考指標。

IL-9是分子量為14 KDa的糖蛋白，具有雙重調節功能，既可負向調節炎癥反應、增加T細胞免疫抑制活性，又可以通過激活肥大細胞、巨噬細胞等促過敏反應及炎癥反應[12]。Defendenti等[13]在實驗研究中構建了Hp感染的小鼠模型，結果顯示Hp感染組血清IL-9水平明顯低于Hp未感染組；進一步在臨床上檢測消化系統疾病患者血清標本，結果發現Hp陰性的受試者血清IL-9水平明顯高于Hp陽性的患者。上述結果提示, IL-9表達減少與Hp感染相關，兩者具有互相抑制的作用。本研究通過檢測對2組血清IL-9水平，結果提示IL-9可能對消化性潰瘍及慢性胃炎均具有抑制作用。根據是否存在CagA+Hp感染，進一步比較2組間血清IL-9水平，結果顯示CagA+患者血清IL-9水平均明顯低于CagA-患者，提示CagA可能在Hp抑制IL-9的表達中發揮重要作用。

研究[14]認為，消化性潰瘍可能是多種因素共同作用的結果，本研究通過Logistic回歸分析顯示, CagA+Hp感染、吸煙、生活不規律、Ⅰ級親屬共患病、精神因素、吸煙與消化性潰瘍的發生密切相關，且CagA+Hp感染與所選分層因素之間在消化性潰瘍的發生中具有協同作用。

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Study on relationship of cytotoxin associated gene A and interleukin-9 with peptic ulcer

LIU Baozhen1, QU Dongdong2, JIN Shilu1, LIU Jingyun2

(1.DepartmentofGastroenterology,BinzhouPeople′sHospital,Binzhou,Shandong, 256610;2.ClinicalSchool,BinzhouMedicalUniversity,Binzhou,Shandong, 256603)

ObjectiveTo explore the relationship of cytotoxin associated gene A (CagA) and interleukin-9 (IL-9) with peptic ulcer. MethodsA total of 40 patients with peptic ulcer were selected as research group while another 40 patients with chronic gastritis as control group. Serum CagA and IL-9 levels as well as helicobacter pylori (Hp) infection condition were detected in both groups, and univariate and multivariate Logistic regression analysis were conducted to patients with peptic ulcer. ResultsResearch group was markedly higher in serum CagA level but evidently lower in IL-9 level than control group (P<0.001). Research group was notably higher in Hp infection rate and CagA-positive Hp infection rate than control group (P<0.01). Patients with positive CagA+were prominently lower in serum IL-9 level than those with negative CagA-(P<0.01). Logistic regression analysis indicated that CagA+Hp infection, smoking, irregular lifestyle, co-illness with relatives in degree Ⅰ, mental factors and alcoholic consumption were closely associated with the occurrence of peptic ulcer (P<0.01), and CagA+Hp infection had synergistic effect with selected stratification factors in the development of peptic ulcer. ConclusionCagA+Hp infection may be associated with the development of peptic ulcer, and IL-9 has potential inhibitory effect in peptic ulcer induced by Hp infection. And the occurrence of peptic ulcer is in close association with multiple factors.

peptic ulcer; cytotoxin associated gene A; interleukin-9; helicobacter pylori

2016-04-13

中國高校醫學期刊臨床專項資金(11527692)

屈冬冬, E-mail: Qddcool@163.com

R 573.1

A

1672-2353(2016)17-057-03

10.7619/jcmp.201617018