腫瘤相關巨噬細胞與卵巢癌組織之間的關系及預后的影響

黃福海　潘麗英　徐楚燕

[摘要]目的 本研究旨在進一步研究闡明腫瘤相關巨噬細胞特異性標志物CD68相對表達量與卵巢癌發生發展及預后的關系。方法 納入我院2012年1月～2015年1月卵巢癌手術切除患者的病例樣本共計48例，對這48例卵巢癌病例采用逆轉錄實時定量聚合酶鏈反應RT-PCR的方法對腫瘤相關巨噬細胞特異性標志物CD68的相對表達量進行檢測。結果 腫瘤相關巨噬細胞特異性標志物CD68相對表達量與患者的年齡、分化程度、腫瘤侵襲深度及瘤組織大小、是否轉移等并不存在相關性（P>0.05）；而淋巴受累方面，淋巴受累組的腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調（P<0.05），無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統計學意義（P>0.05），腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調與淋巴結受累轉移的風險有關；生存分析方面，腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調的患者中生存時間較高表達的患者明顯增長。結論 腫瘤相關巨噬細胞相對表達量水平與卵巢癌的淋巴結轉移及預后有著相關性。

[關鍵詞]腫瘤相關巨噬細胞；相對表達量；卵巢癌

[中圖分類號]R737.31 [文獻標識碼]B [文章編號]2095-0616（2016）05-166-04

卵巢癌是最常見的婦科腫瘤之一，盡管對卵巢癌的診斷和治療技術不斷的提高，但是該病的預后仍不理想，早期診斷對疾病的及時發現及治療具有重要的臨床意義。目前認為腫瘤相關巨噬細胞在腫瘤淋巴結轉移及預后有著相關性，為此學術界對腫瘤相關巨噬細胞進行不斷深入研究。為了探討腫瘤相關巨噬細胞與卵巢癌的相關性，我們通過對這48例卵巢癌病例采用逆轉錄實時定量聚合酶鏈反應的方法對腫瘤相關巨噬細胞的相對表達量進行檢測，初步探討腫瘤相關巨噬細胞的表達與卵巢癌的發生發展之間的作用關系。

1資料與方法

1.1一般資料

納入我院2012年1月～2015年1月婦科行卵巢癌手術切除患者的病例樣本共計48例，年齡為42～78歲，平均（613±1.1）歲，所有的患者均為初診的患者，術前未進行任何放療、化療及分子靶向治療等，收集標本前該臨床試驗研究通過了醫院倫理委員會的批準，所有病例患者簽訂知情同意書。在術中取材之后，腫瘤的位置以病理組織報告為標準，對組織的病理學進行分型，腫瘤的浸潤程度按照國際抗癌聯盟標準分類，淋巴分化以及轉移采用的國際WHO的診斷標準進行分析判斷，對所有手術治療的患者從出院到死亡進行隨訪觀察，隨訪的時間以每月1次，最后一次隨訪時間為2015年7月25日，最長隨訪時間為3.5年，平均隨訪時間為（23±1.2）年。

1.2 RNA提取及RT-PCR反應

對48例卵巢癌組織采用RNA提取試劑盒（美國Invitroge公司）進行RNA提取，采用TaqMan腫瘤相關巨噬細胞試劑盒（美國Santa Cruz公司）檢測腫瘤相關巨噬細胞在患者卵巢癌組織中的表達情況。

1.3統計學檢測

數據采用SPSS18.0統計學軟件進行分析，對臨床病理因素之間的風險情況采用理論Logistic回歸分析，組間比較用方差分析，組間均數比較采用t檢驗，組間率的比較用x²檢驗。運用Kaplan-Meier的生存曲線對腫瘤切除術后患者的生存情況進行分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1腫瘤相關巨噬細胞CD68的相對表達量與臨床病理特征之間的比較

48例卵巢癌組織的腫瘤相關巨噬細胞CD68的相對表達量為0.436，95%CI為0.323～0.534.表達量低于平均值的有21例，高于平均值的有27例，淋巴受累組的腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調（P<0.05），而無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2腫瘤相關巨噬細胞CD68相對表達量的高低與臨床病理因素之間的關系

腫瘤相關巨噬細胞相對表達量的低增加了淋巴結轉移的風險，調整之后風險的OR=5.05，95%CI為1.14～23.45，P<0.05，見表2。

2.3腫瘤相關巨噬細胞的相對表達量與預后之間的相關性

48例卵巢癌組織的腫瘤相關巨噬細胞的相對表達量為0.436，95%CI為0.323～0.534。21例腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調的患者中生存時間為（127.34±10.90）個月，而腫瘤相關巨噬細胞高表達的患者生存時間為（69.23±12.43）個月，兩組比較差異具有統計學意義（t=6.647，P=0.000），腫瘤相關巨噬細胞表達的高低與預后有著一定的相關性。

3討論

卵巢癌是來源于卵巢上皮的惡性腫瘤之一，每年我國有超過40萬的新發病例，由于早期卵巢癌發病并無明顯的臨床癥狀，大部分卵巢癌患者初次入院檢查已經是中晚期，因此探求研究卵巢癌發病的機制具有重要的現實意義。通過大量的臨床研究發現，腫瘤相關巨噬細胞是一類在腫瘤發生及發展中發揮重要生物學效應的分子，卵巢癌患者腹膜匯總巨噬細胞的浸潤明顯增加。目前對腫瘤組織中巨噬細胞增多的機制尚未研究清楚，發現了相當多表型和功能出現一定的差異性。隨著生物信息學的發展，腫瘤相關巨噬細胞在腫瘤中的相關研究越來越深入，研究發現腫瘤相關巨噬細胞參與者各類腫瘤的生長、發育，與腫瘤細胞的增殖凋亡以及侵襲轉移密切相關，涉及到各類腫瘤的發生發展，且腫瘤相關巨噬細胞的表達譜還決定著腫瘤的基因反應，在腫瘤亞型、轉移等臨床病理因素中發揮著重要作用，尤其對于術后的生存期及預后具有一定的相關性，研究提示了腫瘤相關巨噬細胞可以用于對腫瘤預后的評估，其表達量與腫瘤的預后有著一定的相關性。

我們通過腫瘤相關巨噬細胞標志物CD68的表達水平與卵巢癌之間的相關性分析，該分子產生蛋白酶和生長因子直接促進腫瘤浸潤和轉移，以往的研究發現腫瘤相關巨噬細胞在不同腫瘤組織中均有差異性表達，其調控功能也有所不同。文獻報道腫瘤相關巨噬細胞的下調在結腸癌、乳腺癌、宮頸癌等中具有預后判斷介質。研究還發現在膀胱癌中腫瘤相關巨噬細胞表達的下調可作為膀胱癌晚期的標志性分子。過表達的腫瘤相關巨噬細胞可以誘導子宮內膜癌的發生，其中對Ishikawa細胞的生長具有顯著的抑制作用，還能提高順鉑對子宮內膜癌的細胞毒作用。腫瘤相關巨噬細胞主要通過負調控腫瘤相關巨噬細胞對整個相關基因表達體系發揮著精細調節的作用。通過負相的調控機制，促進了腫瘤的發生發展，而抑制過表達的腫瘤相關巨噬細胞，可以從而可以抑制腫瘤細胞的增殖和遷移侵襲能力。因此可以說腫瘤相關巨噬細胞在腫瘤的調控中具有重要的作用。本研究結果顯示了，淋巴受累組的腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調，而無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統計學意義，腫瘤相關巨噬細胞相對表達量明顯下調與淋巴結受累轉移的風險有關；生存分析方面，腫瘤相關巨噬細胞表達的高低與預后有著一定的相關性。

綜上所述，我們發現腫瘤相關巨噬細胞在卵巢癌表達下調與組織分化及預后有著密切的相關性，提示腫瘤相關巨噬細胞可能與卵巢癌的轉移侵襲等影響預后的因素有關，該分子差異性表達推測可能是卵巢癌早期的潛在標志物。