不同濃度地西他濱對破骨細胞分化的影響

糜寶國　關邯峰　劉常宇　雷琢瑋　宋超　劉慧勇　鄧杝　熊偉　廖暉　方忠　李鋒

·實驗研究論著·

不同濃度地西他濱對破骨細胞分化的影響

糜寶國關邯峰劉常宇雷琢瑋宋超劉慧勇鄧杝熊偉廖暉方忠李鋒

目的探討不同濃度梯度地西他濱對破骨細胞形成、活性及吸收功能的影響。方法不同濃度地西他濱（0、0.1、0.25和0.5 μmol/L）處理單核巨噬（RAW264.7）細胞。通過4’，6?聯瞇?2?苯基吲哚（4，6?Diamidino?2?phenylindole dihydrochloride，DAPI）染色和微絲綠色熒光探針（F?actin?Trakcer Green）染色后觀察F?actin環的形成即破骨細胞輪廓；抗酒石酸酸性磷酸酶檢測試劑盒檢測細胞上清中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性，骨板吸收實驗檢測破骨細胞的骨吸收能力；Q?PCR實驗檢測破骨細胞標志基因抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate?resistant acid phosphatase，TRAP）、組織蛋白酶K（cathepsin K，CK）和脊髓基質金屬蛋白酶?9（matrix metalloproteinase?9，MMP?9）的mRNA表達。結果不同濃度地西他濱抑制核因子NF ?κB配體激活因子（receptor activator of NF?κB ligand，RANKL）誘導RAW264.7細胞形成F?actin環，降低了破骨細胞的TRAP酶活性，抑制了破骨細胞的骨吸收能力，同時也下調了破骨細胞標志基因TRAP、CK和MMP?9的mRNA表達。且隨著藥物濃度的增高，上述的抑制作用越明顯。結論地西他濱抑制破骨細胞形成、活性和骨吸收能力，且這種抑制作用隨著藥物濃度的增加而逐漸增強。

破骨細胞；細胞分化；RNA干擾

骨重塑過程是通過成骨細胞骨形成和破骨細胞骨吸收的循環來實現的。破骨細胞來源于骨髓單核巨噬細胞系，由多核巨噬細胞組成，在人體生理性骨重建和病理性骨破壞過程中發揮著重要作用［1，2］。

近年來，隨著對破骨細胞分化調控機制的認識加深，NF?κB配體激活因子（receptor activator of NF?κB ligand，RANKL）在破骨細胞分化、成熟和活化過程中的作用備受關注。……