再認識血球計數板

周民民 程 姣 朱玉芳

(江蘇省濱海中學 鹽城 224500)(蘇州大學基礎醫學與生物科學學院 215123)

血球計數板是對細胞進行直接計數的重要工具，高中生物學教材中使用血球計數板對酵母菌等微生物進行計數。在教學實踐中發現，教師對計數板的認識有局限。

1 “鏡”中窺“室”，只知其一

高中生物學教材中，“探究酵母菌種群大小的動態變化”實驗以及“顯微鏡直接計數土壤浸出液中分解尿素的細菌”實驗都需使用血球計數板，在蘇教版選修一教材中具體介紹了血球計數板的構造、使用操作、計數方法等。其呈現順序為：血球計數板整體構造→計數室(九個大方格)→中央大方格→其四角的中方格→每個中方格中的小方格。這種呈現順序引導師生由整體到局部逐步分析血球計數板，最終圍繞計數室進行計數并計算，但主要涉及中央大方格的結構和使用。而部分習題和一些高中生物學的教學論文[1]也側重于中方格的使用。由此師生對血球計數板的認識比較局限。

2延展視域，全面認識

酵母菌、細菌等微生物的計數確實是在中央大方格范圍內計數，那計數板的其他區域可用于哪些細胞的顯微計數呢？

紅細胞的計數與酵母菌等微生物的計數方法相同，根據不同血球計數板的規格，在中央大方格(圖1中的A區域)內選擇4或5個中方格為樣方來計數。但白細胞的計數則不同，應選取四角大方格(圖1中的B、C、D、E區域)為樣方來計數(設計數的細胞總數為N)。每個大方格的體積都為0.1mm3，再利用公式計算：細胞數/mL=N/4×104×稀釋倍數，最后得到結果。

圖1 血球計數板的計數室

另外，在動物細胞培養過程中，往往在細胞懸液制備后，需進行細胞計數，以確定細胞接種密度和數量，并了解細胞存活率和增殖度。此時，按白細胞計數方法進行計數，選擇四角大方格[2](B、C、D、E)作為樣方來計數細胞，或者選擇四角大方格和中央大方格[3](A、B、C、D、E)作為樣方來計數細胞。這是因為一些動物細胞體積比微生物大，如果在中央大方格內選擇4或5個中方格計數，樣方較小，易造成較大的誤差。