產γ-氨基丁酸屎腸球菌的篩選及γ-氨基丁酸的定量

朱　泉　程金龍　朱元召　尹　龍　倪晉東　程茂基　楊章平

(1.安徽農業大學動物科技學院，合肥230061；2.江蘇優仕生物科技發展有限公司，宿遷223831；3.安徽科技學院動物科學學院，鳳陽233100；4.揚州大學動物科學與技術學院，揚州225009)

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產γ-氨基丁酸屎腸球菌的篩選及γ-氨基丁酸的定量

朱泉1程金龍2朱元召3*尹龍2倪晉東2程茂基1楊章平4

(1.安徽農業大學動物科技學院，合肥230061；2.江蘇優仕生物科技發展有限公司，宿遷223831；3.安徽科技學院動物科學學院，鳳陽233100；4.揚州大學動物科學與技術學院，揚州225009)

本試驗旨在利用分子生物學方法鑒定分離得到1株產γ-氨基丁酸(GABA)屎腸球菌，并定量測定所產GABA的量。從泡菜、酸奶、土壤、新鮮牛奶樣品中篩選出一目標菌株F6，進行形態學特征與革蘭氏染色鑒定；再擴增菌株F6的16S rDNA基因，然后測定該基因序列和構建系統發育樹；同時采用高效液相色譜(HPLC)法定量測定菌株F6發酵液中的GABA含量。結果表明：菌株F6菌落大而光滑、圓形、直徑1～2 mm、邊緣整齊、乳白色；在分離培養基上菌落周圍形成透明圈，使分離培養基呈黃色；在MRS固體培養基上菌落不透明，周圍有透明圈。革蘭氏染色鑒定菌株F6為陽性菌。分子生物學鑒定分析顯示，菌株F6的16S rDNA基因序列與GenBank數據庫中屎腸球菌(Enterococcusfaecium)的相似性大于99%。HPLC法測定得到GABA標準曲線線性方程為Y=7 080 733.139 5X-4 511.692 7(R2=0.999 4)，通過方程得出菌株F6發酵液中的GABA含量為7.1 g/L，保留時間為7～10 min。結果提示，本試驗篩選得到1株高產GABA的屎腸球菌F6。

屎腸球菌；γ-氨基丁酸；16S rDNA基因序列；高效液相色譜法定量；篩選

乳酸菌具有調節機體胃腸道微生態平衡、有益于畜禽健康、改善畜禽生產性能、減少環境污染、替代飼用抗生素等重要作用，在動物生產中的應用日益廣泛。……