硒蛋白x基因沉默和過氧化氫處理對人正常肝臟細胞中硒蛋白基因表達和抗氧化酶活性的影響

湯加勇　趙　華　賈　剛　劉光芒　陳小玲　蔡景義　吳彩梅

(四川農業大學動物營養研究所，成都611130)

?

硒蛋白x基因沉默和過氧化氫處理對人正常肝臟細胞中硒蛋白基因表達和抗氧化酶活性的影響

湯加勇趙華*賈剛劉光芒陳小玲蔡景義吳彩梅

(四川農業大學動物營養研究所，成都611130)

本試驗旨在探討硒蛋白x(Selx)基因沉默和過氧化氫(H2O2)處理對人正常肝臟細胞(LO2)中硒蛋白基因表達和抗氧化酶活性的影響，為探索Selx與其他硒蛋白之間的調控關系及Selx的功能奠定基礎。對本實驗室保存的Selx基因穩定沉默LO2細胞株(siSelx)和對照細胞株(CK)，利用噻唑蘭(MTT)法比較其生長速率；siSelx和CK用200 μmol/L H2O2處理2.5 h后，采用熒光定量PCR技術考察25個硒蛋白基因的表達量；同時比較Selx基因沉默以及H2O2處理對LO2細胞株中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及總抗氧化能力(T-AOC)的影響。結果顯示：1)Selx基因沉默顯著降低了LO2細胞株的生長速率(P<0.05)；2)Selx基因沉默顯著上調了Gpx6、Txnrd2、Seli基因的表達量(P<0.05)，顯著下調了Dio2、Dio3、Selm、Sepw1基因的表達量(P<0.05)；H2O2處理顯著上調了Dio1基因的表達量(P<0.05)，顯著下調了Gpx2基因的表達量(P<0.05)；Selx基因沉默后H2O2處理顯著上調了Gpx6、Txnrd2、Dio1基因的表達量(P<0.05)，顯著下調了Txnrd3、Dio2、Selm、Sepw1、Selv基因的表達量(P<0.05)；3)Selx基因沉默顯著提高了LO2細胞株GSH-Px活性(P<0.05)，顯著提高了SOD的活性(P<0.05)；Selx基因沉默后H2O2處理顯著提高了GSH-Px活性(P<0.05)。由此可見，Selx基因沉默降低了LO2細胞株的生長速率，Selx基因沉默后H2O2處理影響部分硒蛋白基因在細胞中的表達量，同時也影響了GSH-Px、SOD活性。

Selx基因；沉默；H2O2；表達

硒(Se)是哺乳動物新陳代謝所必需的基本微量元素，在動物的生長、繁殖等方面起著重要作用。Se在動物體內主要以硒蛋白的形式來發揮其多種生理功能，在人中已分離得到了25種硒蛋白[1]。很多硒蛋白在動物體內是作為細胞重要的抗氧化防御系統，起著清除氧自由基、保護生物膜完整等功能[2-4]。在動物飼糧中添加一定量的Se可以增加體內硒蛋白的表達，從而增強動物機體的免疫及抗氧化功能等[3-4]。到目前還有很多硒蛋白的功能和作用機理不完全清楚，其中就包含硒蛋白x(Selx)。……