二乙烯三胺/一氧化氮聚合物誘導的奶牛乳腺上皮細胞損傷模型的建立

郭詠梅　張博綦　石惠宇　閆素梅　史彬林　郭曉宇

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

?

二乙烯三胺/一氧化氮聚合物誘導的奶牛乳腺上皮細胞損傷模型的建立

郭詠梅張博綦石惠宇閆素梅*史彬林郭曉宇

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

泌乳期間的奶牛由于代謝旺盛，往往會產生大量一氧化氮(NO),誘導發生氧化應激，進而對細胞產生毒害作用。本試驗旨在探討二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(DETA/NO)誘導奶牛乳腺上皮細胞(bovine mammary epithelial cells，BMEC)氧化應激的損傷條件，并建立氧化應激模型。本試驗利用不同濃度(0、10、30、100、500、1 000 μmol/L)的DETA/NO作為刺激源，作用BMEC 2、4、6、8、12、24 h，通過測定細胞存活率、抗氧化指標、炎癥因子和NO含量及誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)活性，篩選適宜的DETA/NO作用時間及作用濃度，建立BMEC氧化損傷模型。結果表明：1 000 μmol/L的DETA/NO作用細胞6 h，細胞存活率降低為74.27%，超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性也均顯著降低(P<0.05)，然而，iNOS活性，NO、白細胞介素-1、白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-α、丙二醛含量則呈現相反的變化規律，顯著升高(P<0.05)。綜上所述，1 000 μmol/L的DETA/NO處理細胞6 h，可構建理想的BMEC氧化應激模型。

二乙烯三胺/一氧化氮聚合物；奶牛乳腺上皮細胞；氧化損傷

氧化應激是指機體在需要清除體內老化的細胞或在遭受各種有害刺激時，體內高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species，RNS)產生過多，氧化程度超出機體對氧化物的清除能力，氧化系統與抗氧化系統失衡，使機體處于氧化應激狀態，并最終導致組織損傷，引起疾病、衰老、甚至死亡。處于泌乳期的奶牛代謝旺盛，尤其在圍產期和泌乳高峰期，由于機體產生較多的自由基而超過機體的防御能力，破壞蛋白質、核酸等生物大分子，使機體正常的代謝發生紊亂，即產生氧化應激[1]。……