瀏陽黑山羊瘤胃上皮細胞周期分布、增殖和凋亡特點

韓奇鵬　羅　玲　揭紅東　王凱軍　張佩華*　周傳社　孔志偉　湯少勛

(1.湖南農業大學,動物科學技術學院,畜禽遺傳改良湖南省重點實驗室，長沙410128；2.中國科學院,亞熱帶農業生態研究所,亞熱帶農業生態過程重點實驗室，湖南省畜禽健康養殖工程技術中心，農業部中南動物營養與飼料科學觀測實驗站，長沙410125)

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瀏陽黑山羊瘤胃上皮細胞周期分布、增殖和凋亡特點

韓奇鵬1，2羅玲1揭紅東1王凱軍1張佩華1*周傳社2*孔志偉2湯少勛2

(1.湖南農業大學,動物科學技術學院,畜禽遺傳改良湖南省重點實驗室，長沙410128；2.中國科學院,亞熱帶農業生態研究所,亞熱帶農業生態過程重點實驗室，湖南省畜禽健康養殖工程技術中心，農業部中南動物營養與飼料科學觀測實驗站，長沙410125)

摘要：本研究旨在建立瀏陽黑山羊瘤胃上皮細胞的體外培養模型，并對其周期分布、增殖和凋亡特點進行研究。試驗采集60日齡瀏陽黑山羊的瘤胃上皮組織，應用0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)消化法對山羊瘤胃上皮組織進行消化，得到單個的山羊瘤胃上皮原代細胞進行體外培養。通過倒置顯微鏡對原代和傳代培養階段細胞形態進行觀察，采用細胞計數法檢測細胞的生長活性，應用細胞免疫組化學方法對傳代細胞進行鑒定，并用流式細胞術檢測山羊瘤胃上皮傳代細胞周期分布情況和凋亡比率。結果顯示：1)經0.25%胰蛋白酶+0.02% EDTA消化獲得的山羊瘤胃上皮原代細胞，培養1 d開始貼壁生長，2 d開始生長較快(對數期)，呈典型的“波峰”狀生長，3～4 d生長最為迅速，7 d生長速度平穩(平臺期)。……