梅州地區2010-2014年兒童肺炎支原體感染及耐藥情況分析

李舟文，肖光文，張國雄，徐美蘭，喬亞峰，曾令斌

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梅州地區2010-2014年兒童肺炎支原體感染及耐藥情況分析

李舟文1，肖光文1，張國雄2，徐美蘭1，喬亞峰1，曾令斌1

1.嘉應學院醫學院，梅州514031；2.梅州市人民醫院檢驗科，梅州514031

摘要：目的了解兒童社區獲得性肺炎患者肺炎支原體感染及藥敏情況，為臨床診斷和治療提供有力依據。方法對2010年1月到2014年12月期間梅州地區3家醫院兒科門診及住院部治療的5 076例社區獲得性肺炎患兒進行咽拭子肺炎支原體培養，并檢測對紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素和克拉霉素6種藥物的敏感性。結果對肺炎支原體培養的結果表明，肺炎支原體陽性者1 782例，總陽性率為35.11%，其中2012年感染率最高達43.68%，為流行高峰期。季節分布方面，一年四季均可發病，春夏季節感染率高于秋冬季節，季節間陽性率差異有統計學意義(P<0.05)。性別方面，女性陽性率(35.91%)高于男性(34.36%)，但差異無統計學意義。患兒年齡方面，1～3歲組感染率最高為42.42%，6～12歲組感染率最低為16.49%，且各年齡組間陽性率差異有統計學意義(P<0.05)。藥敏實驗結果顯示，紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素和克拉霉素的敏感率分別為41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其中紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈現明顯的逐年下降趨勢，這4種藥物不同年份敏感率之間的差異有統計學意義(均P<0.05)。克林霉素2010—2014年敏感率波動不明顯，克拉霉素雖然也呈現逐年下降的趨勢但幅度不大，這兩種藥物不同年份敏感率之間的差異沒有統計學意義(均P>0.05)。結論社區獲得性肺炎患兒中肺炎支原體感染率較高，嬰幼兒期發病率較高，易發于春夏季節。對社區獲得性肺炎患兒應盡早進行肺炎支原體培養及藥敏檢測，使患兒得到及時正確的治療，減少耐藥株的出現。

關鍵詞：社區獲得性肺炎；肺炎支原體；兒童；藥敏試驗

Supported by the Guangdong Medical Scientific Research Funds (No. B2015036) and the Meizhou City Science and Technology Plan Projects (No. 2015B041)

肺炎支原體 (Mycoplsmapneumoniae，Mp) 是一類引起人類非典型性肺炎和其他呼吸道疾病的病原體之一。它無細胞壁，通過飛沫傳播，其引起的疾病小兒肺炎支原體肺炎( Mycoplasma Pneumonia Pneumonia，MPP ) 具有起病突然，進展快，病程比較長等臨床特征，以及出現肺部哮鳴音突出，喘憋、呼吸困難等臨床表現。一些患兒病情比較嚴重時，還有導致肺外并發癥的可能，對患兒的成長發育產生嚴重影響，甚至引起患兒的死亡[1]。文獻表明兒童MPP的發病率和其病原體耐藥性存在地域差異性，目前已成為社區獲得性肺炎(Community Acquired Pneumonia，CAP)最常見的病原體[2]。為了了解近五年來CAP患兒Mp感染及耐藥的形勢，為小兒MPP的預防和治療提供指導，本研究對梅州地區3家醫院2010年1月至2014年12月門診和住院的CAP患兒Mp感染及其耐藥情況進行了分析，報告如下。

1資料與方法

1.1研究對象2010年1月到2014年12月，本市3家醫院兒科門診及住院部治療的CAP患兒5 076例，其中，男2 628例，女2 448 例；～1歲組2 028例，～3歲組1 530例，～6歲組954例，～12歲組564例；病程3～15 d；全部病例均行胸部X線檢查，診斷標準按照《社區獲得性肺炎診斷和治療指南》。其中支氣管肺炎3 042例，大葉性或節段性肺炎562例，支氣管炎1 230例，毛細支氣管炎242例。

1.2試劑支原體快速鑒定培養藥敏試劑盒(陜西百盛園生物科技信息有限公司)。檢測原理：支原體利用培養基快速生長因子進行增殖，分解糖類，產生氫離子使培養基的pH值降低，使培養基中的指示劑由原來的紅色轉變成淡黃色。培養基由紅變黃，并且液體澄清，即證明有Mp生長。藥敏板中有9種抗菌藥物，利用9種抗菌藥物的高低濃度在體外對微生物的抑制作用，對微生物作耐藥性分析。藥敏結果判讀:兩孔均呈黃色為敏感；低濃度孔呈紅色、高濃度孔呈黃色為中介；兩孔均呈紅色為耐藥。

1.3Mp的分離培養與藥敏試驗統一入院次日早晨采集所有患兒的咽拭子標本立即送檢。操作步驟如下：1)取1支分裝干粉培養基，在無菌條件下打開蓋子，加入1.5 mL超純水，完全溶解至澄清后，在藥敏板陰性孔中加入50 μL培養液。2)將棉拭子置于培養瓶內，攪動數次，提取棉拭子并對著瓶壁盡量擠壓出其中液體，取出棉拭子棄之，用加樣器吹打數次后分別吸取50 μL加入各藥敏板孔中。3)在每個板孔中滴加1滴石蠟油封口后，將瓶中剩余培養基棄去，藥敏板置于37 ℃電熱培養箱培養24 h。4)取出觀察結果并統計陽性標本及陽性標本紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素6種藥物的藥敏結果。

1.4統計方法數據采用SPSS20.0統計學軟件進行分析，對于不同年份、性別、季度以及年齡階段的兒童CAP之Mp感染率與耐藥性的比較分析采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.12010—2014年Mp的流行情況5 076例CAP患兒咽拭子標本中，Mp培養陽性數為1 782例，總陽性率為35.11%。其中2012年感染率最高達43.68%，明顯高于各組，與其他各組中感染率最高的2014年比較，差異有統計學意義(χ2=35.82，P<0.05)；2010年感染率最低為30.02%；剔出2012年的數據，2010—2014年Mp的感染率呈現逐年升高的趨勢。

2.2CAP患兒Mp感染陽性率與性別的關系男感染903例，感染率為34.36%；女感染879例，感染率為35.91%。女性感染率略高于男性，對2組進行比較，差異無統計學意義(χ2=1.33，P>0.05)。

表1梅州地區CAP患兒不同年份Mp的感染率[例(%)]

Tab.1Infection-rates of Mp in different year groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

年份YearMp+-合計Total感染率Infectionrate201025459284630.022011328724105231.182012498642114043.68a201332965798633.372014373679105235.45合計Total17823294507635.11

注：a與2014年組比較，χ2=35.82，P<0.05。

Note: aCompared with Group 2014 year, χ2=35.82，P<0.05.

2.3CAP患兒Mp感染陽性率與年齡的關系四個不同年齡組Mp感染陽性率比較，差異有統計學意義(χ2=21.24，P<0.05)。其中～3歲組感染率最高為42.42%，～12歲組感染率最低為16.49%。各年齡組感染率的順序為～3歲組>～1歲組>～6歲組>～12歲組。見表2。

表2梅州地區CAP患兒不同年齡組Mp的感染率[例(%)]

Tab.2Infection-rates of Mp in different age groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

年齡組(歲)Agegroup(years)Mp+-合計Total感染率Infectionrate0—18081120202839.841—3649881153042.423—623272295424.326—129347156416.49合計Total17823294507635.11

注：四個不同年齡組間感染陽性率比較，χ2=21.24，P<0.05。

Note: The comparison of infection positive rate between four different age groups, χ2=21.24,P<0.05.

2.4CAP患兒Mp感染陽性率與季節的關系四個不同季節組Mp感染陽性率比較，差異有統計學意義(χ2=35.58，P<0. 05)。其中5～7月組感染率最高為38.18%，8～10月組感染率最低為27.43%。各年齡組感染率的順序為5～7月組>2～4月組>11～1月組>8～10月組。見表3。

表3梅州地區CAP患兒不同季節Mp的感染率[ 例(%)]

Tab.3Infection-rates of Mp in different season groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

季節組(月份)Seasongroup(month)Mp+-合計Total感染率Infectionrate2—46231066168936.895—77121153186538.188—1023762786427.4311—121044865831.91合計Total17823294507635.11

注：四個不同季節組間感染陽性率比較，χ2=35.58，P<0.05。

Note: The comparison of infection positive rate between four different seasons groups, χ2=21.24,P<0.05.

2.52010—2014年Mp培養陽性菌株的藥敏情況本文對兒童常用的6種抗菌藥物的敏感情況進行了分析，2010—2014年紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素的敏感率分別為41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其中紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈現明顯的逐年下降趨勢，這4種藥物不同年份敏感率之間的差異有統計學意義(χ2b=32.35，χ2c=56.15，χ2d=37.55，χ2e=22.57，均P<0.05)。克林霉素2010—2014年敏感率波動不明顯，克拉霉素雖然也呈現逐年下降的趨勢但幅度不大，這兩種藥物不同年份敏感率之間的差異沒有統計學意義(χ2f=1.603，χ2g=1.384，均P>0.05)。見表4。

3討論

根據國內外相關文獻報道[3-4]，目前某些地區Mp的感染率已經超過肺炎鏈球菌而成為CAP最主要的病原體。不同地區和時期小兒MPP發病率相差較大，這可能跟各地區氣候、地理、經濟、衛生環境、檢測手段和檢測年份等不同密切相關[2]。國外有文獻報道感染率達50%[5]，近幾年國內的感染率在30%附近[4,6]。本研究檢測的5 076例CAP患兒咽拭子標本中，Mp培養陽性數為1 782例，總陽性率為35.11%，高于國內近幾年的相關報道，這可能與標本采集及檢測方法，不同地區的氣候條件、地理

表4　2010—2014年Mp培養陽性菌株對6種抗菌藥物的敏感率[株(%)]

注：抗菌藥物不同年份間敏感率的比較，χ2b=32.35，χ2c=56.15，χ2d=37.55，χ2e=22.57，均P<0.05；χ2f=1.603，χ2g=1.384，均P>0.05。

Note: The sensitive rate comparison of antimicrobial agents between the different years, χ2b=32.35,χ2c=56.15,χ2d=37.55,χ2e=22.57, are allP<0.05;χ2f=1.603,χ2g=1.384, are allP>0.05.

位置以及不同地區不同醫院抗菌藥物使用情況等不同有關。咽拭子標本在用藥前和用藥后收集對實驗結果的影響頗大，本研究為消除用藥對實驗結果的影響，所有標本均收集于用藥前。分離培養法是Mp診斷的“金標準”，傳統的培養法費時長、培養條件要求高和容易造成污染等使得臨床運用少。而改良后的Mp快速鑒定培養法[4]具有特異性好、敏感性高、檢測快速、方便等特點，目前被廣泛運用到Mp的診斷和藥敏上。本研究所采用的咽拭子快速鑒定培養法大大的提高了Mp的檢出率。

過去30年歐洲、美國和日本的大量流行病學研究[7-9]均證實了Mp的流行呈現一定的周期性。由于Mp具有2～3周較長的潛伏期以及其較低的傳播率，導致流行期一般持續1年左右，繼而維持數年較低感染率，3～7年后再出現流行高峰。本研究中2012年感染率最高達43.68%，明顯高于各組，與其他各組中感染率最高的2014年比較，差異有統計學意義(χ2=35.82，P<0.05)。說明梅州地區Mp的流行在2012年形成了一個流行的高峰期，但每次高峰期間隔的年限，因為研究年限不夠而不明。關于形成流行高峰期的原因可能和Mp兩種不同基因型之間不斷的轉變有關[10]，而造成基因型的轉變的機理可能和人群免疫狀況的改變有關。本研究剔出2012年的數據，2010～2014年梅州地區Mp的感染率呈現逐年升高的趨勢，表明該地區Mp感染的形勢越來越嚴峻，應該引起衛生防疫部門和臨床醫師的重視。

大多數臨床報道表明，男性和女性患兒MPP的發病率差異無統計學意義，但也有女性患兒發病率高于男性的報道[11]，本研究中男性和女性Mp的感染率差異無統計學意義。由于兒童免疫力較低，又往往無癥狀或急性呼吸道感染癥狀輕微而不去就診，MPP的發病率高于其他年齡組人群，成為可能的Mp儲存宿主，在傳播中起重要的作用。在芬蘭針對CAP患者進行的研究，有21%Mp感染者是5歲以下兒童，西班牙加泰羅尼亞Mp暴發時5歲以下兒童占18%，而5～14歲僅占8.2%[12]；國內陽愛梅等[4]的研究也表明，0～3歲組的感染率遠遠高于其他年齡組；本研究中6～3歲組感染率最高為42.42%，其次是0～1歲組感染率為39.84%，最低的是6～12歲組感染率僅16.49%，4個不同年齡組Mp感染陽性率比較，差異有統計學意義(χ2=21.24，P<0.05)；說明近年來Mp的感染逐漸呈現低齡化，1～3歲可能為最容易感染的年齡段，其原因可能是這個年齡段的兒童免疫功能還不夠成熟但是相對于嬰幼兒人群接觸有所增加。早前的研究認為Mp感染的發生與季節性變化關系不大，但近年的研究結果很多支持與季節性相關，但各地報道的發表季節高峰不盡相同。韓國報道[13]的高峰在秋季和冬季，而日本的報道[9]反而是夏秋季節感染率高于冬春季節，尤其是8月份感染率最高。在我國因為幅員遼闊，各地地理氣候差異巨大，所以報道高峰也不盡相同。本研究結果表明，梅州地區一年四季均可發病，夏春(2～7月)感染率較高，這可能與該地區該時段平均溫度和平均濕度較適合Mp的繁殖有關。

Mp由于沒有細胞壁而對β內酰胺類抗生素具有天然的耐藥性，而對大環內酯類、四環素類等抑制微生物蛋白質合成的抗菌藥物，以及喹諾酮類等抑制DNA復制的抗菌藥物敏感。但四環素類抗生素對兒童骨骼和牙齒的發育有抑制作用，僅僅適合于較大的兒童；而喹諾酮類抗菌藥物對肌肉骨骼系統有一定的損害，所以只是在其他抗菌藥物無效時考慮使用。大環內酯類抗生素就成為了國內外小兒MPP治療的首選藥物，在治療中被大量的使用，這也造成了Mp對這一類藥物的耐藥現象越來越嚴重。自2001年日本首次出現Mp耐藥菌株(Macrolide-resistance Mycoplasma pneumoniae，MRMP)的報道以來，國內外相繼出現了很多的MRMP，尤其以中國和日本最為突出。從2002年到2010年，日本MRMP的感染率已從0%上升到60%[14]，呈現逐年上升的趨勢；從國內來看，鄭定容等[15]報道的深圳地區2011—2012年對羅紅霉素的敏感率為30.5%(39/128)；孔慶東等[6]報道沈陽地區2012—2014年Mp對紅霉素的敏感率為僅為7%(23/326)。本研究選擇了用試劑盒檢測9種藥物中兒童常用的6種進行藥敏分析，2010—2014年該地區紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素的敏感率分別為41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其敏感率普遍高于鄭定容[15]、孔慶東等[6]的報道，與陽愛梅[4]的報道接近。但是其中紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈現明顯的逐年下降趨勢，這可能與診斷不及時及濫用抗生素有關， 應引起臨床醫生及相關人員的高度重視。克林霉素2010—2014年敏感率波動不明顯，克拉霉素雖然也呈現逐年下降的趨勢幅度不大，這可能與本地區這兩種藥物用量較少有關。

綜上所述，通過對梅州地區CAP患兒Mp感染流行及耐藥狀況的研究表明，Mp是本地區CAP的主要病原體，一年四季均可發病，春夏季節感染率更高，1～3 歲是其高發年齡。目前，本地區Mp對大環內酯類抗菌藥物耐藥情況較為嚴峻，敏感率呈現逐年下降趨勢。所以在治療小兒MPP時，經驗型用藥同時建議盡早采集咽拭子做Mp培養及藥敏試驗，根據藥敏結果調整用藥，高度警惕耐藥肺炎支原體肺炎的存在，避免不合理使用抗生素。

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DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.019

通訊作者：肖光文，Email：270591805@qq.com

中圖分類號：R375

文獻標識碼：B

文章編號：1002-2694(2016)03-0306-06

Corresponding author:Xiao guang-wen,Email：270591805@qq.com

收稿日期：2015-10-08；修回日期:2016-01-06

Mycoplasma pneumoniae infection and drug resistance in children in Meizhou area from 2010 to 2014

LI Zhou-wen1,XIAO Guang-wen1,ZHANG Guo-xiong2,XU Mei-lan1,QIAO Ya-feng1,ZENG Ling-bin1

(1.MedicalCollege,JiayingUniversity,Meizhou514031,China；2.ClinicalLaboratory,thePeople'sHospital,Meizhou514000,China)

Abstract:In order to survey the Mycoplasma pneumoniae (Mp) infection and drug resistance in children with Community Acquired Pneumonia(CAP) to provide a rational basis for the clinical diagnosis and treatment of Mp infection, a total of 5 076 throat swabs were collected from children with CAP, who visited the pediatric outpatient department or received treatment in the pediatric ward of three hospitals in Meizhou area from January 2010 to December 2014. The swabs were cultured to detect Mp. The drug sensitivity of Mp to erythromycin, roxithromycin, azithromycin, acetylspiramycin , clindamycin and clarithromycin was evaluated. According to the result of the cultivation of Mp, 1 782 (35.11%) were Mp-positive. The year of 2012 was the epidemic peak, the infection of Mp rate was up to 43.68%. There were cases of Mp infection in all four seasons of the year but infection rates in spring and summer were significantly higher than those in autumn and winter (P<0.05). The infection rate in females was higher than that in males (35.91% vs 34.36%; P>0.05). For the age of the sick children, the infection rate for the age group of younger than 3 years old was the highest as 42.42%. The age group of younger than 12 years old was the lowest as only 16.49%, and there were significant differences in the infection rate among all age groups (P<0.05). According to the results of drug sensitive test, the sensitive rate of erythromycin, roxithromycin, azithromycin, acetylspiramycin, clindamycin and clarithromycin was 41.98% (748/1 782), 55.22% (984/1 782), 66.84% (1 191/1 782), 69.25% (1 234/1 782), 67.79% (1 208/1 782) and 59.32% (1 057/1 782), respectively. The sensitive rate of erythromycin, roxithromycin, azithromycin and acetylspiramycin significantly declined year by year from 2010 to 2014, the differences of their sensitive rate between different years were statistically significance (all P<0.05). The sensitive rate of fluctuations of clindamycin was not obvious and the sensitive rate of clarithromycin had dropped year by year slightly from 2010 to 2014, the differences of their sensitive rate between different years were no statistically significance (all P>0.05). In conclusion, Mp infection rate was very high among children with respiratory tract infection．The incidence of Mp infection was relatively high among infants and young children and children are more susceptible to Mp infection in spring and summer than those in autumn and winter. Throat swabs should be cultured and drug sensitivity tests should be performed as early as possible in children with CAP, so that proper intervention can be undertaken in time to reduce drug-resistant strains of Mp.

Keywords:community acquired pneumonia; Mycoplsma pneumoniae; child; drug sensitivity test

廣東省醫學科學研究基金(No.B2015036)和梅州市科技計劃

項目(No.2015B041)聯合資助