丹紅注射液對不同病情嚴重程度糖尿病患者血小板活化功能和腎功能的影響

李明霞,左麗娟,趙軼峰,王俊芳,張　斌,李秀娟,張志英,任衛東

(河北北方學院附屬第一醫院，河北 張家口 075000)

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丹紅注射液對不同病情嚴重程度糖尿病患者血小板活化功能和腎功能的影響

李明霞,左麗娟,趙軼峰,王俊芳,張斌,李秀娟,張志英,任衛東

(河北北方學院附屬第一醫院，河北 張家口 075000)

[摘要]目的探討丹紅注射液對不同嚴重程度糖尿病患者血小板活化功能及腎功能的影響。方法根據24h尿蛋白排泄率(UAER)將符合條件的170例2型糖尿病患者分為正常蛋白尿組55例、微量尿蛋白組50例、臨床蛋白尿組65例，每組再隨機分為觀察組和對照組。對照組給予常規降糖、降壓、降脂藥物治療，觀察組在對照組治療基礎上給予丹紅注射液靜滴，連用2周。觀察各組治療前后血糖、血脂及血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(GMP140)、血小板溶酶體顆粒膜蛋白(CD63)的表達和UAER、SCr的變化。結果觀察組和對照組治療前血糖、血脂、GMP-140、CD63 、UAER、SCr比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。正常蛋白尿組和微量尿蛋白組中觀察組治療后FBG、TG、TC、LDL-C水平均明顯低于治療前(P均<0.05)，HDL-C水平均明顯高于治療前(P均<0.05)，而對照組僅FBG明顯低于治療前，且觀察組治療后各指標改善情況均明顯優于對照組(P均<0.05)；臨床蛋白尿組中觀察組和對照組治療后FBG、TG、TC、LDL-C、HDL-C均明顯改善(P均<0.05)，且觀察組改善情況均明顯優于對照組(P均<0.05)。正常蛋白尿組中觀察組和對照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，但觀察組和對照組治療后上述指標比較差異均無統計學意義(P均>0.05)；微量尿蛋白組和臨床蛋白尿組中觀察組和對照組治療后GMP-140、CD63、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，且觀察組改善情況明顯優于對照組(P均<0.05)。結論丹紅注射液可明顯降低不同病情嚴重程度糖尿病患者GMP-140、CD63的表達，抑制血小板活化，減少尿蛋白，改善腎功能，尤其對糖尿病腎病患者療效更好。

[關鍵詞]丹紅注射液; 糖尿??；血小板活化；腎功能

近年來，隨著人民生活水平的提高和飲食結構的變化，糖尿病的發病率和患病率正逐年提高，其已成為威脅人民生活健康的重大社會問題[1-2]。在糖尿病的發展過程中，一旦出現腎損害、持續性蛋白尿，則病情難以逆轉，因而及早干預治療對于抑制病情發展、改善腎功能具有非常重要的作用。糖尿病腎病(DN)是指糖尿病微血管病變而導致的腎小球硬化、腎功能受損，繼而可發展為慢性腎衰竭甚至死亡，主要表現為尿白蛋白排泄率增加(UAER>20 μg/min)[3]。近年來，血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(GMP140)和血小板溶酶體顆粒膜蛋白(CD63)在糖尿病發生發展中的作用越來越受到臨床醫師重視。本研究通過觀察丹紅注射液對不同病情嚴重程度2型糖尿病患者血糖、血脂、腎功能及血GMP-140、CD63表達的影響，旨在探討丹紅注射液在糾正糖脂代謝紊亂、抑制血小板活化、改善腎功能方面的作用，現將結果報道如下。

1臨床資料

1.1一般資料選取2014年12月—2015年12月河北北方學院附屬第一醫院內分泌科診治的病程10年以上的2型糖尿病患者170例，均符合2006年WHO規定的2型糖尿病診斷標準[4]：空腹血糖(FBG)>7.0 mmol/L，OGTT試驗2 h血糖≥11.1 mmol/L。排除慢性心力衰竭、心肌梗死、急性腦血管病、嚴重肝功能異常、尿毒癥、庫欣綜合征、惡性腫瘤等疾病者。根據24 h UAER將患者分為正常蛋白尿組55例(UAER<20 μg/min)、微量尿蛋白組50例(UAER 20～200 μg/min)、臨床蛋白尿組65例(UAER >200 μg/min)，每組再隨機分為觀察組和對照組，每組中觀察組和對照組年齡、性別、收縮壓、舒張壓、病程比較差異均無統計學意義(P均>0.05)，見表1。本研究患者均對治療方案知情同意。

1.2治療方法對照組給予常規降糖(二甲雙胍0.5 g 3次/d口服)、降壓(卡托普利25 mg 2次/d口服)、降脂(阿托伐他汀鈣片20 mg 1次/d口服)藥物治療；觀察組在此基礎上給予丹紅注射液(菏澤步長制藥有限公司)30 mL溶入生理鹽水250 mL中靜脈滴注，1次/d，連續應用2周。

1.3觀察指標

1.3.1血糖、血脂水平分別于治療前及治療2周后晨起抽取患者空腹靜脈全血3 mL，采用肝素抗凝，室溫下密封保存，應用AU5400日立全自動生化分析儀，3 000 r/min離心后檢測FBG、三酰甘油 (TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，試劑盒購于寧波亞太生物技術有限責任公司。

1.3.2血GMP-140、CD63表達水平分別于治療前及治療2周后空腹采血3 mL，置于2%二乙胺四乙酸(EDTA)抗凝試管，首先進行單克隆抗體標記，后采用FACsCantoI型流式細胞儀(美國BD公司)嚴格按照說明書檢測GMP-140、CD63表達水平，GMP-140、CD63相關抗體均購于美國Becton dickion公司。

1.3.3血肌酐(SCr)及UAER水平分別于治療前及治療2周后晨起抽取患者空腹靜脈全血3 mL，采用AU5400全自動生化分析儀檢測SCr水平；留取24 h尿液，采用免疫法進行尿微量白蛋白檢測(試劑盒購于上海科華生物工程股份有限公司)，計算UAER。

2結果

2.1各組治療前后FBG、血脂水平比較各組中觀察組和對照組治療前FBG、TG、TC、HDL-C和LDL-C比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。正常蛋白尿組和微量尿蛋白組中觀察組治療后FBG、TG、TC、LDL-C水平均明顯低于治療前(P均<0.05)，HDL-C水平均明顯高于治療前(P均<0.05)，而對照組僅FBG明顯低于治療前，且觀察組治療后各指標改善情況均明顯優于對照組(P均<0.05)；臨床蛋白尿組中觀察組和對照組治療后FBG、TG、TC、LDL-C、HDL-C均明顯改善(P均<0.05)，且觀察組改善情況均明顯優于對照組(P均<0.05)。見表2。

2.2各組治療前后血小板化功能及腎功能比較各組中觀察組和對照組治療前GMP-140、CD63 、UAER、SCr比較差異均無統計學意義(P均>0.05)；正常蛋白尿組中觀察組和對照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，但觀察組和對照組治療后上述指標比較差異均無統計學意義(P均>0.05)；微量尿蛋白組和臨床蛋白尿組中觀察組和對照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，且觀察組改善情況明顯優于對照組(P均<0.05)。見表3。

3討論

糖尿病腎病的發生、發展與多種因素有關，其中血小板活化和內皮細胞損傷引起的微血栓形成是重要因素[5]。GMP140系選擇素家族黏附分子，表達于血小板-ɑ顆粒膜表面，當血小板活化時，ɑ顆粒可迅速與血小板膜融合而表達[6]。CD63活化時經一系列脫粒反應表達于血小板膜表面，介導中性粒細胞對活化內皮的黏附[7]。近年研究發現，當機體長期處于高血糖狀態時，GMP-140和CD63快速、大量、穩定地表達在血小板膜表面，通過凝集素等細胞表面糖復合物相互作用，使細胞黏附力增大，介導活化的內皮細胞與中性粒細胞、單核細胞及T淋巴細胞亞群的黏附功能，參與血栓形成和炎癥反應，因而二者表達增加成為血小板活化的特異性標志物[8-9]。

表1　各組一般情況比較

注：1 mmHg=0.133 kPa。

表2　各組治療前后FBG、血脂水平比較

注：①與對照組比較，P<0.05。

表3　各組治療前后血小板活化功能及腎功能比較±s)

注：① 與對照組比較，P<0.05。

丹紅注射液是從丹參、紅花中提取有效成分制成的中藥制劑，主要功能為活血化瘀、通絡止痛。其中丹參有肝素樣作用，能抑制血小板聚集，激活纖溶，抑制微血栓形成，改善微循環，促進血管內皮細胞修復；能糾正脂代謝紊亂，降低內皮素水平，升高NO含量，有效改善血流變各指標[10]；紅花有效成分為紅花黃素，能通過抑制由二磷酸腺苷(ADP)誘導的血小板聚集而抑制凝血，通過增加纖溶酶的活性促進已經形成的纖維蛋白原溶解而發揮抗血栓的功效，因而被稱為活血化瘀之要藥[11]。相關研究發現，丹紅注射液可通過抑制核因子κB(NF-κB)、下調腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)等炎性因子水平而減緩糖尿病腎病的發展演進，保護腎臟功能；還可降低糖尿病腎病患者血漿AngⅡ水平，減輕腎血管張力，增加腎血流量，減少尿白蛋白排泄率[11-12]。

本研究結果顯示，丹紅注射液能明顯降低正常蛋白尿組、微量蛋白尿組和臨床蛋白尿組FBG、TG、TC、LDL-C及GMP-140、CD63、 UAER、SCr水平，提高HDL-C水平，且對于糖尿病腎病患者作用更加明顯。提示丹紅注射液能有效改善不同病情嚴重程度糖尿病患者的脂代謝紊亂，有效降低尿微量白蛋白排泄率，延緩腎損害，抑制血小板活化，保護腎功能，建議臨床推廣應用。

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Effect of Danhong injection on platelet activation and renal function in patients with diabetic nephropathy at different severity degree

LI Mingxia,ZUO Lijuan,ZHAO Yifeng,WANG Junfang,ZHANG Bin,LI Xiujuan,ZHANG Zhiying,REN Weidong

(The First Affiliated Hospital of Hebei North College, Zhangjiakou 075000)

Abstract:Objective It is to explore the effect of Danhong injection on platelet activation and renal function in patients with diabetic nephropathy at different severity degree. Methods One hundred and seventy patients with type 2 diabetes (T2DM) were selected in the study. All patients were divided into normal proteinuria (Nor-upor) (55 cases), micro protein urine (Mic-upor) (50 cases) and clinical protein urine (Cli-upor) (65 cases) according to 24h urinary albumin (UAER). All types were divided randomly into observation group and control group,the control group was treated by conventional hypoglycemic and antihypertensive drugs and the observation group was added with Danhong injection by intravenous drip for 2 weeks. The changes of blood glucose, blood lipid, GMP-140, CD63, UAER and SCR were observed before and after treatment. Results There was no significant differences in the level of blood glucose, blood lipid ,UAER, SCR, GMP-140 and CD63 between the two groups before treatment(P>0.05). The level of FBG, HbA1C, TG, TC and LDL-C significantly decreased and the level of HDL-C increased significantly in the observation groups of Nor-upor and Mic-upor, while only the level of FBG decreased significantly in the control group. All the improvements of indicators in the observation group were better than those in the control group (P<0.05). The index significantly improved in two groups of Cli-upor after treatment, but all the indicators in the observation group were significantly higher than those in the control group,and there was statistical significance (P<0.05). The levels of UAER, SCr, GMP-140 and CD63 in the two groups of Nor-upor significantly decreased after treatment, but there was no significant differences. The level of UAER, SCr, GMP-140 and CD63 in two groups of Mic-upor and Cli-upor significantly decreased after the treatment, but the indicators in the observation group were significantly higher than those in the control group,there was statistical significance (P<0.05). Conclusion Danhong injection could significantly decrease the expression of GMP-140 and CD63, inhibit platelet activation,reduce urinary protein and improve renal function in patients with diabetic nephropathy.

Key words:Danhong injection；diabetic nephropathy；platelet activation；renal function

[作者簡介]李明霞，女，主治醫師，在職碩士，研究方向為內分泌疾病臨床診療與基礎研究。 [通信作者]任衛東，E-mail:yfynfmsl@163.com

[基金項目]河北省衛計委醫學科學研究重點課題計劃(20150055)

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.20.003

[中圖分類號]R587.1

[文獻標識碼]A

[文章編號]1008-8849(2016)20-2173-05

[收稿日期]2016-01-25