單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響

陳悅　喬春鳳

【摘要】 目的 探討分析單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠層粘連蛋白（LN）及透明質(zhì)酸（HA）含量的影響。方法 50只無特定病原體（SPF）級Wistar大鼠， 依照寒飲射肺證模型進(jìn)行造模， 隨機分成對照組和觀察組， 各25只。對照組采用生理鹽水灌胃， 觀察組采用單葉細(xì)辛灌胃。比較兩組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平。結(jié)果 4周后， 觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著降低大鼠體內(nèi)LN及HA含量。

【關(guān)鍵詞】 寒飲射肺證模型大鼠；單葉細(xì)辛；層粘連蛋白；透明質(zhì)酸；影響

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.218

單葉細(xì)辛性溫， 可歸心、肺、腎經(jīng)， 具有溫肺化飲、通竅止痛以及祛風(fēng)散寒的功效。《本經(jīng)疏證》中記載到單葉細(xì)辛入肺、溫肺散寒， 說明單葉細(xì)辛可溫肺化痰飲、止咳逆。臨床上有關(guān)于單葉細(xì)辛改善寒飲射肺證模型大鼠磷脂、血栓素以及內(nèi)皮素水平的報道[1]， 但是關(guān)于單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響并不多見。故本研究主要探討分析了單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響。現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 50只SPF級Wistar大鼠由當(dāng)?shù)蒯t(yī)學(xué)院實驗動物中心提供， 周齡6～8周， 平均周齡（7.1±0.7）周， 體重178～223 g， 平均體重（202±19）g。將大鼠隨機分成對照組和觀察組， 各25只。HA、LN放免試劑盒由上海信裕生物科技有限公司提供， 烏拉坦由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供， 單葉細(xì)辛由當(dāng)?shù)刂胁菟幏刻峁?制成濃度為1g/ml的溶液待用。超速離心機由上海喬躍電子有限公司提供， 放射免疫自動記數(shù)器由北京科普順科技有限公司提供， 數(shù)顯恒溫水浴鍋由匡貝實業(yè)（上海）有限公司提供， Bio-RAD680酶標(biāo)儀電腦分析系統(tǒng)由美國進(jìn)口。

1. 2 方法

1. 2. 1 建模 腹腔注射適量的烏拉坦進(jìn)行麻醉， 大鼠仰臥并固定， 消毒后于頸部正中切開皮膚， 充分顯露正中氣管與頸總動脈， 在環(huán)狀軟骨下方0.5 cm部位切開氣管前壁， 并作一個縱向切口， 插入“Y”型氣管并固定， 將血液吸凈；將左側(cè)的頸總動脈分離備用， 套管針穿刺置管， 然后結(jié)扎固定；大鼠呼吸恢復(fù)平穩(wěn)后， 左側(cè)管插入軟塑料內(nèi)套管， 將6℃的生理鹽水按2.5 ml/kg的劑量灌注進(jìn)大鼠肺內(nèi)， 0.5 min后抽出， 間隔5 min后重復(fù)灌洗， 共操作5次。

1. 2. 2 用藥與檢測 對照組采用濃度為0.9%生理鹽水灌胃， 劑量為1 ml/kg。觀察組采用單葉細(xì)辛灌胃， 單葉細(xì)辛中藥水提取液按1 ml/kg的劑量灌胃， 兩組大鼠均灌胃4周。采集大鼠的頸總動脈血液進(jìn)行檢測， 應(yīng)用放射免疫分析法檢測大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平， 嚴(yán)格按照說明書步驟執(zhí)行。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

4周后， 觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1， 表2。

3 討論

寒飲射肺證是呼吸系統(tǒng)多發(fā)病證， 西醫(yī)認(rèn)為該病的發(fā)生與受寒引起的炎性細(xì)胞因子釋放有關(guān)， 中醫(yī)則認(rèn)為該病的發(fā)生與宿罹痰飲、復(fù)感寒邪有關(guān)[2]。寒飲射肺的病情進(jìn)展緩慢， 通常會并發(fā)阻塞性肺氣腫、支氣管炎以及哮喘， 甚至可能出現(xiàn)肺源性心臟病、肺動脈高壓而誘發(fā)死亡， 具有十分大的臨床危害性[3]。

HA主要由間質(zhì)細(xì)胞合成， 屬于一種糖胺多糖， 是基質(zhì)的重要組成成分， 其能夠介導(dǎo)成纖維細(xì)胞、炎性因子的遷移、黏附， 是機體炎癥反應(yīng)的重要標(biāo)志物[4]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)HA會積聚于損傷的肺間質(zhì)中， 影響血液與氣體間的交換， 同時肺間質(zhì)細(xì)胞受到損傷后會促進(jìn)HA的產(chǎn)生。LN由上皮、內(nèi)皮、平滑肌等細(xì)胞合成， 主要分布在細(xì)胞基底膜基質(zhì)中， 其水平上升會引起肺細(xì)胞炎性反應(yīng)， 對肺組織產(chǎn)生損傷作用。

中醫(yī)藥理學(xué)研究顯示單葉細(xì)辛具有解熱、抗炎、降溫、鎮(zhèn)痛以及抗驚厥的功效， 并且具有抑制LN和HA分泌的功效， 能夠顯著減輕機體的炎癥反應(yīng)， 從而緩解病情[5]。本次研究結(jié)果顯示， 4周后觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。表明單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著減輕肺組織損傷， 促進(jìn)預(yù)后。

綜上所述， 單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著降低大鼠體內(nèi)LN及HA含量。

參考文獻(xiàn)

[1] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠HYP、IL-17及IL-6動態(tài)表達(dá)的實驗研究.中醫(yī)研究， 2015， 28（6）：58-60.

[2] 李楊， 明海霞， 耿廣琴.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠 LN、HA影響的實驗研究.中醫(yī)藥學(xué)報， 2015， 43（2）：52-54.

[3] 王平， 邱繼云， 陶功定.肺氣虛加寒濕外邪大鼠復(fù)合模型建立的實驗研究.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2012， 7（11）：938-940.

[4] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠TGF-β1、PC-Ⅲ影響的實驗研究.中醫(yī)研究， 2015， 28（10）：63-64.

[5] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠氧自由基代謝及肺組織病理變化的實驗研究.中醫(yī)藥學(xué)報， 2015， 43（5）：35-37.

[收稿日期：2015-12-21]