伊伐布雷定對心肌梗死兔心肌細胞白介素10表達的影響

戴偉

【摘要】目的：探討伊伐布雷定（Iva）對心肌梗死（MI）兔心肌細胞白介素10表達的影響及其改善心室重構的作用。

方法：新西蘭大白兔46只，采用結扎左冠狀動脈前降支的方法建立心肌梗死模型，將模型制備成功的36只新西蘭大白兔隨機分成4組，每組各9只。假手術組（S組）、心肌梗死組（MI組）、比索洛爾治療組（B組）和伊伐布雷定治療組（Iva組）。B組和Iva組在心肌梗死模型制備成功后12小時，分別給予比索洛爾1.25mg/d和伊伐布雷定17mg/（kg.d）治療4周；S組和MI組在同時間點給予等量生理鹽水，持續4周。4周后稱取體質量、左右心室質量；取兔心肌組織，采用免疫組織化學染色法檢測心肌細胞白介素10的表達。

結果：術后4周，與S組相比，MI組心室的相對質量增加（P<0.01）；與MI組相比，B組和Iva組心室的相對質量降低（P<0.05）。術后4周，與MI組相比，B組和Iva組的白介素10水平顯著升高（P<0.01），cha差異有顯著性（P<0.01）。

結論：Iva對心肌梗死兔治療4周后，可以通過增加心肌細胞抗炎因子白介素10表達改善心室重構，對心肌有保護作用。

心肌梗死（MI） 后心肌細胞產生眾多炎癥因子，其中IL-10是重要的抗炎細胞因子，主要抑制Th細胞產生的IFN，抑制中性粒細胞等炎性細胞的浸潤、游走、增殖及活化，具有抵抗炎癥反應的作用。

伊伐布雷定是首個特異性超極化激活通道（1f）阻滯劑，以劑量依賴性方式抑制If電流降低竇房結節律，對心內傳導、心肌收縮力或心室復極化無明顯影響[2]。Berdeaux A等的研究表明[3]，伊伐布雷定和β受體阻斷劑比較在降低心率相同水平的情況下，伊伐布雷定提供的心臟舒張期灌流時間更長。

動物模型的建立[4]

動物分組

心梗模型制備成功后存活36只兔，其中9只開胸，不結扎動脈的為假手術組（S組），剩下27只隨機分成三組：①心肌梗死組（MI組）②伊伐布雷定治療組（Iva組）③比索洛爾治療組（B組）。

檢測方法及指標

（1）計算心臟右室質量與體質量的比值（RVW/BW）及左室質量與體質量的比值L（VW/BW），即相對質量。

（2）白介素10

采用免疫組織化學SP二步法染色[5]。具體步驟（略）每組取9例，每例測5個視野。由計算機計算出所測陽性反應物相對含量的灰度值及面積。

統計學處理

數據均用 ±s表示，使用簡明統計軟件進行統計學分析，用方差分析進行多個組間比較，用q檢驗（Student Newman-Keuls法）進行兩組間比較。

比較心室的相對質量

與S組相比，MI組心室的相對質量增加（P<0.01）；與MI組相比，B組和Iva組心室的相對質量降低（P<0.05）。

各組心肌細胞中白介素10表達的比較

與MI組相比，B組和Iva組的白介素10水平顯著升高（P<0.01），差異有顯著性（P<0.01）。與S組相比，B組和Iva組之間沒有統計學差異。

討論

越來越多的研究表明炎癥反應在冠狀動脈粥樣硬化的發展過程中發揮著重要作用。目前可以認為冠狀動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，聚集在動脈內膜的低密度脂蛋白可在血管壁中啟動炎癥反應。 白介素10主要抑制Th細胞產生的IFN，抑制中性粒細胞等炎性細胞的浸潤、游走、增殖及活化，在免疫反應中起抗炎作用。

本實驗研究結果顯示，與S組相比，MI組心室的相對質量增加（P<0.01）；與MI組相比，B組和Iva組心室的相對質量降低（P<0.05）。說明心梗后心室發生重構，心室質量增加；而比索洛爾和伊伐布雷定可以改善心梗后心室重構，使心室的相對質量降低。

發生心肌梗死后，炎癥反應在心室重構方面扮演著重要的角色。炎癥細胞因子的增多和生成過多的活性氧族參與了心肌重構。心肌梗死后產生的炎癥反應和釋放的細胞炎癥因子是機體對抗組織損傷的一種重要的保護性反應，它可以促進膠原形成以及血管與細胞的再生，有利于心肌梗死后受損心肌組織的修復和心肌功能的恢復。但是炎癥反應和細胞炎癥因子又可以刺激氧自由基的釋放，介導氧化應激，而氧化應激引起的心肌損傷又可以刺激更多的細胞因子的釋放，由此形成惡性循環，加重心肌損傷，同時，細胞炎癥因子的細胞毒作用還可以直接介導心肌細胞的凋亡、肥大及心室重構。MI后在非梗死區由于I型膠原大量沉積和I/Ⅲ型膠原比例升高，使非梗死區心肌僵硬度增高而順應性降低，從而引起心臟舒張功能不全或衰竭。

給予藥物治療4周后，B組和Iva組心肌細胞組織白介素10的表達高于MI組（P<0.05），說明伊伐布雷定和比索洛爾可以升高心梗后心肌細胞白介素10的表達，增強抗炎效應，減輕炎癥反應；炎癥反應中炎癥因子作用的分子機制及改善心肌梗死后心室重構的作用機理尚不完全明確，其可能是通過增加心肌細胞抗炎因子白介素10表達，減輕間質的纖維化，減少I、Ⅲ型膠原纖維的含量及其構成比，改善心肌梗死后心室重構。

結論

1.伊伐布雷定可以影響心肌梗死兔心肌細胞炎癥因子的表達，降低心肌梗死后的炎癥反應。

2.伊伐布雷定可以通過增加心肌細胞抗炎因子白介素10表達而改善心肌梗死兔的心室重構。

3.伊伐布雷定與比索洛爾相比，在改善心梗后心室重構方面相對一致。

【參考文獻】

[1]廖玉華，心肌梗死免疫機制[J].心臟病學，2009，101（1）： 21-

26.

[2]陳瑩，丁文惠.白細胞介素10基因轉染對大鼠心肌梗死后心室纖維化重構的影響[J].中華老年心腦血管病，2008，10（9）： 31-

33.

[3]Di Francesco D. If inhibition：a novel mechanism of action[J]. J Eur Heart，2010，121（2）： 19-21.

[4]劉斌，于海初.冠狀動脈結扎法與雙極電凝法制備兔急性心肌梗死模型的對比[J].齊魯醫學雜志，2011，26（6）：52-53.

[5]王映梅.白細胞介素17對小鼠心肌成纖維細胞膠原表達的研究[J].細胞與分子免疫學，2011，27（8）：801-803.