卵巢癌組織CXCL12、MMP-9、integrin β1表達及意義

劉靜，張柳，楊勇，李春燕，郭華雄

(荊州市中心醫院，湖北荊州434020)

卵巢癌組織CXCL12、MMP-9、integrin β1表達及意義

劉靜，張柳，楊勇，李春燕，郭華雄

(荊州市中心醫院，湖北荊州434020)

目的 探討趨化因子CXCL12、基質金屬蛋白酶9(MMP-9)及整合素β1(integrin β1)在卵巢癌發生、發展中的作用。方法 選取60例份卵巢癌組織、20例份卵巢交界性腫瘤組織及10例份卵巢良性腫瘤組織，采用免疫組化Envision法檢測CXCL12、MMP-9及integrin β1陽性表達率，分析CXCL12、MMP-9及integrin β1陽性表達與卵巢癌患者臨床病理參數的關系及卵巢癌組織中CXCL12、MMP-9、integrin β1表達的關系。結果 卵巢癌組織中CXCL12、MMP-9及integrin β1陽性表達率均高于卵巢交界性腫瘤組織及卵巢良性腫瘤組織(P均<0.01)。CXCL12陽性表達與卵巢癌臨床分期、淋巴結轉移及腹水有關(P<0.05或<0.01)，MMP-9及integrin β1表達均與卵巢癌組織學分級、TNM分期、淋巴結轉移及腹水有關(P<0.05或<0.01)。卵巢癌組織中CXCL12表達與MMP-9及integrin β1表達均呈正相關(r分別為0.328、0.332，P均為0.001)，MMP-9表達與integrin β1表達呈正相關(r=0.447，P=0.000)。結論 卵巢癌組織CXCL12、MMP-9及integein β1均高表達，三者協同作用，共同促進卵巢癌的發生、發展。

卵巢腫瘤；趨化因子CXCL12；基質金屬蛋白酶9；整合素β1

卵巢癌是婦科三大惡性腫瘤之一，病死率高，導致患者死亡的主要原因是種植轉移。趨化因子CXCL12是由骨髓基質細胞產生的前B淋巴細胞活化因子，介導炎癥反應，被認為是炎癥趨化因子。研究發現，CXCL12與其特異性受體CXCR4結合構成CXCL12/CXCR4生物軸，對腫瘤的發生、發展具有重要的調控作用[1]?；|金屬蛋白酶9(MMP-9)是一種能降解細胞外基質成分的重要蛋白水解酶，參與多種惡性腫瘤的侵襲轉移過程。整合素β1(integrin β1)主要與細胞和間質黏附有關，與細胞基質成分相結合，激活整合素下游相關基因，在腫瘤侵襲轉移中發揮重要作用。本研究檢測卵巢癌組織CXCL12、MMP-9及integrin β1蛋白表達，探討其在卵巢癌發生、發展中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 60例卵巢癌患者于2007～2013年于荊州市中心醫院行手術治療，患者年齡28～69歲、平均52.4歲，>50歲36例、≤50歲24例。術前均未行放化療，術后均留取卵巢癌組織(卵巢癌組)，均經病理檢查證實診斷。組織學分型：漿液性癌45例，黏液性癌15例；參照女性生殖系統腫瘤WHO(2003年版)標準：高分化(G1)15例，中分化(G2)25例，低分化(G3)20例；根據國際婦產科聯盟FIGO分期標準：Ⅰ 期10例，Ⅱ 期18例，Ⅲ 期27例，Ⅳ 期5例；伴有淋巴結轉移28例；伴腹水且找到癌細胞32例(腹水陽性)，無腹水或腹水未找到癌細胞28例(腹水陰性)。另外選取卵巢交界性腫瘤組織20例份(交界性腫瘤組)、卵巢良性腫瘤組織10例份(良性腫瘤組)作為對照。三組患者年齡具有可比性。

1.2 CXCL12、MMP-9及integrin β1表達檢測 三組標本均經10%中性甲醛固定，常規脫水，石蠟包埋，行4 μm連續切片，采用Envision法進行免疫組織化學染色，以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知陽性片作為陽性對照。具體操作步驟參照試劑盒說明書。結果判定標準：以細胞膜和細胞質呈黃色或棕黃色為CXCL12、MMP-9及integrin β1陽性表達。采用半定量-積分法對染色強度及陽性細胞數進行評分[2]。染色強度：陰性記0分，淡黃色記1分，棕黃色記2分，棕褐色記3分；陽性細胞數：無陽性細胞記0分，陽性細胞≤10%記1分，11%～50%記2分，51%～75%記3分，>75%記4分；染色強度評分和陽性細胞數評分乘積≥3判定為陽性。分析CXCL12、MMP-9及integrin β1表達與卵巢癌患者臨床病理參數的關系及CXCL12、MMP-9、integrin β1表達之間的關系。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。計數資料組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Spearman等級相關性分析法。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組CXCL12、MMP-9及integrin β1表達 見表1。

表1 三組CXCL12、MMP-9及integrin β1表達比較

注：與良性腫瘤組比較，*P<0.01；與交界性腫瘤組比較，△P<0.01。

2.2 卵巢癌組織中CXCL12、MMP-9及integrin β1陽性表達與患者臨床病理參數的關系 見表2。

表2 卵巢癌組織中CXCL12、MMP-9及integrin β1表達與患者臨床病理參數的關系

2.3 卵巢癌組織CXCL12、MMP-9、integrin β1表達之間的關系 卵巢癌組織中CXCL12表達與MMP-9及integrin β1表達均呈正相關(r分別為0.328、0.332，P均為0.001)，MMP-9表達與integrin β1表達呈正相關(r=0.447，P=0.000)。

3 討論

腫瘤的發生、侵襲、轉移是一個主動的、有規律的過程，趨化因子在其中發揮重要作用[3]。趨化因子CXCL12是由68個氨基酸組成，屬于CXC趨化因子家族成員。近年來研究發現，CXCL12除趨化作用外還可通過與其特異性受體結合形成生物軸，激活G蛋白介導的信號傳導通路，從而促進腫瘤的發生、發展[4]。CXCR4特異性抑制劑AMD3100可阻斷CXCL12誘導的信號傳導通路[5]。Zhao等[6]研究顯示，CXCL12在腫瘤的發生、發展過程中表現為雙向調節作用，一方面通過促進細胞外基質的降解，促進腫瘤生長及發生浸潤轉移；另一方面通過趨化、活化免疫細胞捕獲遷移中的腫瘤細胞或直接通過抑制血管增殖，發揮抗腫瘤作用。對胰腺癌的研究發現，CXCL12抑制胰腺導管癌的發生及發展[7]。本研究結果顯示，CXCL12高表達促進卵巢癌的發生、發展，與Ghanem等[8]對肝癌的研究結果一致；其機制可能為CXCL12與其特異性受體CXCR4結合，激活G蛋白，使PI3K磷酸化，激活局部黏著酶(FAK)，啟動一系列信號傳導通路[9]。整合素(integrins)是一類位于細胞表面的黏附分子，可介導細胞與細胞、細胞與基質間的反應，參與細胞信號傳導、黏附及遷移，并調控細胞分化及增殖等多個生理過程[10]。本研究結果顯示，integrin β1高表達參與卵巢癌的發生、發展，激活、調節癌細胞的黏附與遷移可能是其作用機制[11]。MMP-9在多種惡性腫瘤中高表達，通過降解基底膜中的Ⅳ型膠原和凝膠，促進腫瘤細胞發生侵襲轉移[12]。本研究中卵巢癌組織MMP-9高表達促進卵巢癌的發生、發展，其機制可能為卵巢癌中MMP-9過表達破壞基底膜，進而促進卵巢癌細胞浸潤轉移。

本研究卵巢癌組織中CXCL12、integrin β1、MMP-9表達均呈正相關，提示三者之間具有協同作用，共同促進卵巢癌的發生、發展。CXCL12與其受體CXCR4結合后可激活細胞表面integrin β1，增強腫瘤細胞與細胞外基質之間的黏附，調節腫瘤細胞的運動與遷移，促進侵襲轉移[13，14]。Laird等[15]研究發現，CXCL12可通過CXCR4/ERK/NF-κB信號傳導促進MMP-9表達，或直接誘導腫瘤細胞分泌MMP-9，從而破壞腫瘤血管壁的基底膜，進而重塑血管、誘導新生血管生長，促進腫瘤發生浸潤轉移[15,16]。

綜上所述，卵巢癌組織中CXCL12、MMP-9及integein β1表達均增加，三者之間協同作用，共同參與卵巢癌的發生、發展。

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荊州市科技發展計劃項目(2009-13-15)。

郭華雄(E-mail: ghx8361@163.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.28.017

R737.31

B

1002-266X(2016)28-0050-03

2015-11-05)