重組大腸桿菌轉化富馬酸生產L-丙氨酸

徐友強，馬玉岳，姚　粟，姜增妍，張　奇，張　露，裴疆森，程　池

(1. 中國食品發酵工業研究院，北京100015；

2. 山東省富馬酸生物轉化工程技術研究中心，山東煙臺265709)

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重組大腸桿菌轉化富馬酸生產L-丙氨酸

徐友強1，馬玉岳2，姚粟1，姜增妍2，張奇1，張露1，裴疆森1，程池1

(1. 中國食品發酵工業研究院，北京100015；

2. 山東省富馬酸生物轉化工程技術研究中心，山東煙臺265709)

摘要：通過克隆來源于睪丸酮叢毛單胞菌的L-天冬氨酸-β-脫羧酶基因，在一株具有L-天冬氨酸酶生產能力的大腸埃希氏菌CICC 11022S中異源表達，構建轉化富馬酸生產L-丙氨酸的重組工程菌。結果發現：重組工程菌9 h轉化富馬酸產生112.7 g/L的L-丙氨酸，生產速率12.5 g/(L·h)，轉化率93.8%。富馬酸價格較低，有效降低L-丙氨酸生產的原料成本。通過構建重組工程菌，以富馬酸為底物，高效生產L-丙氨酸，結果表明該方法具有較好的工業應用潛力。

關鍵詞：L-丙氨酸；L-天冬氨酸酶；L-天冬氨酸-β-脫羧酶；重組工程菌

L-丙氨酸是一種具有重要價值的氨基酸，在醫藥和食品行業應用廣泛。L-丙氨酸甜味柔和，能與谷氨酸鈉制成混合調味品，可調制并明顯改善食品風味，而不破壞食物原有的風格[1]；是合成甜味劑阿力甜的主要原料，阿力甜的甜度是蔗糖的2 000倍，目前已在多個國家和地區獲準使用[2-3]；是合成維生素B6和L-氨基丙醇(鹽酸左氧氟沙星合成前體)的重要中間體，也是營養劑補糖氨基酸營養輸液的組成成分之一[4-6]。最近，有研究利用L-丙氨酸合成N-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-alanine，用于檢測牛奶中的抗生素氧氟沙星(ofloxacin)，極大提高了檢測的靈敏度[7]；……