乙型肝炎合并肝硬化患者血清GP73變化特征及臨床意義

王純明，孫　莉，張寶偉

(嶧城人民醫(yī)院檢驗科,山東棗莊 277300)

?

·論著·

乙型肝炎合并肝硬化患者血清GP73變化特征及臨床意義

王純明，孫莉，張寶偉

(嶧城人民醫(yī)院檢驗科,山東棗莊 277300)

摘要:目的明確慢乙型肝炎患者血清GP73變化特征及可能的臨床意義。方法觀察了109例慢乙型肝炎肝硬化患者血清GP73水平及可能的相關(guān)因素，其中代償期肝硬化患者60例，失代償肝硬化患者49例。對血清GP73鑒別代償性及失代償性肝硬化的診斷性能進行了受試者工作特征曲線(ROC)分析。結(jié)果慢乙型肝炎肝硬化患者血清GP73與血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、乙型肝炎病毒拷貝數(shù)(HBV DNA)水平顯著相關(guān)，但與患者血清清蛋白水平呈顯著負相關(guān)。失代償性肝硬化患者[(215.9±96.56)ng/mL]血清GP73水平顯著高于代償期肝硬化患者[(113.7±68.95)ng/mL]。ROC分析結(jié)果顯示，曲線下面積為0.82(95%CI：0.74～0.90，P<0.05)。當cut-off值設(shè)定為大于或等于140.5 ng/mL時，在乙型肝炎肝硬化患者人群中，GP73 診斷失代償期肝硬化的靈敏度和特異度分別為77.55%和75.00%。結(jié)論慢性乙型肝炎合并肝硬化患者血清GP73水平與肝損傷及病毒復(fù)制狀態(tài)有關(guān)。檢測血清GP73有助于肝硬化代償與失代償期之間的鑒別。

關(guān)鍵詞:慢性乙型肝炎；肝硬化；診斷；高爾基體蛋白73

高爾基體蛋白73(GP73)由2000年美國密西根大學(xué)的科研人員首先體外克隆[1]。隨后該項目組的科研人員發(fā)現(xiàn)，該蛋白在病毒性和非病毒性肝病患者中表達上調(diào)[2]。之后的多項研究證實，GP73是一項新的肝癌標志物[3-4]。近期，中華醫(yī)學(xué)會肝癌學(xué)組也推薦將該標志物用于肝癌的診斷。但該標志物在肝硬化患者中的變化特征及可能的影響因素目前尚不明了。本研究對慢性乙型肝炎合并肝硬化患者的血清GP73水平特征及可能的臨床意義進行了初步分析。

1資料與方法

1.1一般資料本研究回顧性觀察了2013年6月至2015年4月棗莊市嶧城區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)科住院的109例乙型肝炎肝硬化患者。其中男76例，年齡32～76歲，平均51歲；女33例，年齡36～77歲，平均56歲。年齡差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.637，P=0.009 6)。109例肝硬化患者中，代償期肝硬化(CC)患者60例；失代償期肝硬化(DCC)患者49例。所有患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)均為陽性。所有患者均符合我國慢性乙型肝炎防治指南相關(guān)標準[5]。包括：(1)HBsAg陽性持續(xù)半年以上；(2)兩種或兩種以上的影像學(xué)肝硬化診斷；(3)符合肝硬化臨床表現(xiàn)。所有患者均于開始藥物治療前采集血清標本。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準后進行。

1.2血清GP73檢測GP73采用標準酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法分析，按照試劑盒提供的操作說明書進行(北京熱景生物技術(shù)有限公司)。

1.3血清生化及乙型肝炎病毒拷貝數(shù)(HBV DNA)分析血清酶學(xué)采用標準酶法測定。生化分析采用AU5800 全自動生化分析儀進行。HBV DNA分析試劑為達安生物技術(shù)公司產(chǎn)品，采用qPCR分析法分析。

2結(jié)果

2.1人口學(xué)資料本研究CC與DCC組患者的HBsAg、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)，總膽紅素(TBIL)，清蛋白(ALB)資料見表1。

表1　　CC和DCC患者之間基本人口學(xué)資料

2.2血清GP73與病毒復(fù)制狀態(tài)為明確肝硬化患者血清GP73水平的可能影響因素，對患者血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽紅素(TBIL)、清蛋白(ALB)以及血清HBV DNA水平進行了相關(guān)分析。結(jié)果顯示，患者血清GP73水平與ALT及HBV DNA顯著相關(guān)，與血清ALB水平呈顯著負相關(guān)；而與TBIL水平無顯著相關(guān)性見表2。

表2　　血清GP73與其他標志物水平相關(guān)性分析

2.3失代償期肝硬化患者顯著高于代償期患者為進一步明確患者肝功能整體狀態(tài)對血清GP73水平的影響，對60例CC患者以及49例DCC患者的血清GP73進行了分析。結(jié)果顯示，與CC患者(113.7±68.95 ng/mL)相比，DCC患者血清GP73(215.9±96.56 ng/mL)顯著升高(t=6.44，P<0.05)，見圖1A。以CC患者為“健康對照”人群，DCC患者為“患者”人群，觀察了血清GP73對兩者的鑒別診斷性能，進行了ROC分析。結(jié)果顯示，ROC分析曲線下面積為0.82(95%CI：0.74～0.90，P<0.05)。根據(jù)最大似然比，確定診斷最佳cut-off值。當cut-off值設(shè)定為大于或等于140.5 ng/mL時，GP73 診斷DCC的靈敏度和特異度分別為77.55%和75.00%，見圖1B。

圖1

3討論

近年來的研究結(jié)果顯示，GP73可能是一項新的肝癌診斷標志物[6]。但也越來越多的研究也顯示，該蛋白在慢性肝炎、肝硬化、慢加急性肝衰竭[7-8]，甚至其他非肝炎病毒感染時，血清水平也升高。而且，在慢性乙型肝炎感染人群中，該蛋白的表達水平可能與肝纖維化進程相關(guān)[9-10]。顯然，明確該蛋白在不同肝部內(nèi)表達水平的影響因素，是最終客觀闡述該標志物臨床意義的關(guān)鍵。

本研究結(jié)果顯示，對肝硬化患者而言，肝細胞損傷及病毒復(fù)制與肝硬化患者血清GP73均呈顯著相關(guān)關(guān)系。該結(jié)果提示，病毒復(fù)制及所導(dǎo)致的肝細胞損傷可能是患者血清GP73增加的原因。該結(jié)果與早期的報告結(jié)論一致，即病毒在肝細胞內(nèi)的復(fù)制可以上調(diào)GP73基因的表達[11]。臨床上，丙型肝炎病毒感染、艾滋病病毒感染患者，該蛋白水平均顯著高于健康對照人群[12]。這些結(jié)果提示，慢性乙型肝炎感染，尤其是肝硬化患者，乙型肝炎病毒復(fù)制可能是血清GP73增加的重要影響因素。

本研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化患者血清GP73水平與ALB水平呈顯著負相關(guān)關(guān)系。提示，該蛋白水平可能與肝病進程相關(guān)。為了明確這種關(guān)系，筆者對代償期肝硬化患者與失代償期肝硬化患者的血清GP73進行了對照分析。與預(yù)期推測一致，失代償期肝硬化患者血清GP73水平顯著高于代償期肝硬化患者。以大于或等于140.5 ng/mL作為診斷失代償肝硬化的cut-0ff值，GP73診斷失代償肝硬化的靈敏度和特異度分別為77.55%和75.00%。提示，對慢性乙型肝炎感染合并肝硬化患者而言，檢測血清GP73有助于肝功能代償與失代償?shù)蔫b別。

參考文獻

[1]Kladney RD,Bulla GA,Guo L,et al.GP73,a novel Golgi-localized protein upregulated by viral infection[J].Gene,2000,249(1):53-65.

[2]Kladney RD,Cui X,Bulla GA,et al.Expression of GP73,a resident Golgi membrane protein,in viral and nonviral liver disease[J].Hepatology,2002,35(6):1431-1440.

[3] Marrero JA,Romano PR,Nikolaeva O,et al.GP73,a resident Golgi glycoprotein,is a novel serum marker for hepatocellular carcinoma[J].J Hepatol,2005,43(6):1007-1012.

[4]Mao Y,Yang H,Xu H,et al.Golgi protein 73(GOLPH2) is a valuable serum marker for hepatocellular carcinoma[J].Gut,2010,59(12):1687-1693.

[5]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會/感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南[J].中華肝臟病雜志,2010,13(12):881-891.

[6]Riener MO,Stenner F,Liewen H,et al.Alpha-fetoprotein and serum golgi phosphoprotein 2 are equally discriminative in detecting early hepatocellular carcinomas[J].Hepatology,2009,50(1):326.

[7]Wei H,Li B,Zhang R,et al.Serum GP73,a marker for evaluating progression in patients with chronic HBV infections[J].PLoS One,2013,8(2):53862.

[8]Wei H,Zhang J,Li H,et al.GP73,a new marker for diagnosing HBV-ACLF in population with chronic HBV infections[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2014,79(1):19-24.

[9]Wei H,Hao X,Li B,et al.GP73 is a potential marker for evaluating AIDS progression and antiretroviral therapy efficacy[J].Mol Biol Rep,2013,40(11):6397-6405.

[10]Liu X,Wan X,Li Z,et al.Golgi protein 73(GP73),a useful serum marker in liver diseases[J].Clin Chem Lab Med,2011,49(8):1311-1316.

[11]Kladney RD,Tollefson AE,Wold WS,et al.Upregulation of the Golgi protein GP73 by adenovirus infection requires the E1A CtBP interaction domain[J].Virology,2002,301(2):236-246.

[12]Hu L,Yao W,Wang F,et al.GP73 is upregulated by hepatitis C virus (HCV) infection and enhances HCV′ secretion[J].PLoS One,2014,9(3):90553.

Clinical profile and characteristics of serum GP73 in cirrhotic patients with chronic hepatitis B infections

WangChunming,SunLi,ZhangBaowei

(People′sHospitalofYichengDistrictinZaozhuangCity,Zaozhuang,Shandong277300,China)

Abstract:ObjectiveTo explore clinical profile and significance of serum golgi protein 73(GP73) in cirrhotic patients with chronic hepatitis B virus (HBV) infection.MethodsA total of 109 cirrhotic patients with HBV infection were included,in which 60 patients were compensated cirrhosis,and 49 patients were decompensated cirrhosis.The receiver operating characteristic curve(ROC) analysis were used to evaluate the clinical significance of GP73 for diagnosing decompensated cirrhosis in cirrhotic population.ResultsSerum GP73 level in cirrhotic patients was correlated with alanine aminotransferase (ALT) and HBV DNA,but negatively correlated with albumin levels.Serum GP73 levels in patients with decompensated cirrhosis was (215.9±96.56)ng/mL,which was significant higher than(113.7±68.95)ng/mL in patients with compensated cirrhosis.The area under ROC was 0.82(95%CI：0.74～0.90,P<0.05).The sensitivity and specificity of GP73 diagnosing decompensated cirrhosis in cirrhotic population with chronic HBV infection were 77.55% and 75.00% respectively,when the cut-off was set at 140.5 ng/mL.ConclusionSerum GP73 level is related with liver injury and HBV replication.GP73 might be an useful marker for diagnosing decompensated cirrhosis in cirrhotic population with chronic HBV infections.

Key words:chronic hepatitis B;cirrhosis;diagnosis;golgi protein 73

(收稿日期：2015-12-11)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.019

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0765-02

作者簡介：王純明，男，主管檢驗師，主要從事臨床檢驗與生物化學(xué)研究。