王春玲 章宏塔高有領? 錢國英?(.浙江萬里學院生物與環境學院,寧波3500;2.上海海洋大學水產與生命學院,上海20306)
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黃顙魚促甲狀腺激素受體基因的克隆及其對飼料中添加碘化鉀的表達反應
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(1.浙江萬里學院生物與環境學院,寧波315100;2.上海海洋大學水產與生命學院,上海201306)
摘要:本試驗旨在得到黃顙魚促甲狀腺激素受體(TSHR)基因的cDNA全長序列,同時掌握其組織表達差異,并揭示飼料中添加碘化鉀對黃顙魚甲狀腺TSHR基因表達及生長性能的影響。采用cDNA末端快速擴增(RACE)技術克隆TSHR基因cDNA全長序列,再應用熒光定量PCR技術檢測TSHR基因的相對表達量,并制備了碘化鉀添加量分別為0(對照)、10、50和100 mg/ kg的4種試驗飼料進行為期27 d的黃顙魚養殖試驗。結果顯示:本試驗成功克隆得到長度為2 786 bp的TSHR基因cDNA的全長序列,其中開放閱讀框2 238 bp,編碼745個氨基酸,Blast程序分析表明黃顙魚TSHR氨基酸序列與其他已知魚類的相似性為60%~87%。組織表達分析結果表明TSHR基因在甲狀腺組織中的相對表達量較高,其次是肝臟、肌肉和腸道。養殖試驗結果表明,100 mg/ kg組甲狀腺TSHR基因相對表達量顯著高于其他各組(P<0.05),50 和100 mg/ kg組的增重、特定生長率和飼料系數顯著優于對照組(P<0.05)。由此得出,飼料中添加適量的碘化鉀不僅影響TSHR基因的表達,還能有效促進黃顙魚的生長。
關鍵詞:黃顙魚;碘化鉀;促甲狀腺激素受體;基因克隆;基因表達
甲狀腺激素(THs)由甲狀腺組織合成和分泌,包括四碘甲狀腺原氨酸(T4)和3,5,3-三碘甲狀腺原氨酸(T3),是含量極低的生物活性物質,幾乎作用于水生動物的各個部分,研究證實THs不僅可以促進機體的生長、發育,維持機體代謝平衡,還能夠促進神經系統的發育,提高其興奮性,維持機體的免疫系統[1-4]。……