恐懼、焦慮、抑郁情緒對小鼠機械性痛閾的影響

王中立，戴建國，侍昊，格根塔那，顧樂盈，唐宗湘

(1.南京中醫藥大學 基礎醫學院，江蘇 南京　210023； 2.內蒙古民族大學

蒙醫藥學院，內蒙古 通遼　 028000)

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恐懼、焦慮、抑郁情緒對小鼠機械性痛閾的影響

王中立1，戴建國1，侍昊1，格根塔那2，顧樂盈1，唐宗湘1

(1.南京中醫藥大學 基礎醫學院，江蘇 南京210023； 2.內蒙古民族大學

蒙醫藥學院，內蒙古 通遼 028000)

[摘要]目的：觀察恐懼、焦慮和抑郁情緒對小鼠機械痛閾的影響。方法:將60只C57BL/6N小鼠隨機分為6組， 制備恐懼、焦慮和抑郁模型并分別設置對照組。通過小鼠在遭受電擊環境中僵立時間和次數評價小鼠恐懼狀態，采用高架十字迷宮、明暗穿梭箱和曠場試驗觀測小鼠焦慮狀態，采用強迫游泳和強迫懸尾實驗觀測小鼠抑郁樣行為。同時應用Von Frey纖維絲檢測3種情緒模型小鼠的機械疼痛閾值。結果:與對照組比較：恐懼模型組的僵立時間和次數顯著增加；焦慮模型組在高架十字迷宮開放臂停留時間比例及明暗穿梭箱實驗中穿梭次數顯著減少，曠場試驗記錄小鼠周邊活動路徑與總路徑之比顯著增加；抑郁模型組在強迫游泳和強迫懸尾實驗中的不動時間顯著延長。提示恐懼、焦慮、抑郁動物模型建立成功。Von Frey實驗結果顯示，與對照組小鼠比較，恐懼小鼠組機械痛閾升高，而焦慮小鼠組和抑郁小鼠組機械痛閾顯著降低。結論:恐懼情緒可以升高小鼠機械痛閾，而焦慮和抑郁情緒則降低其機械痛閾。

[關鍵詞]恐懼； 焦慮； 抑郁； 行為實驗； 機械痛閾

疼痛是最常見的臨床癥狀之一，與多種疾病相關，并且影響疾病的進程和臨床治療效果。疼痛既對機體產生影響，也對患者的精神、心理產生影響[1]。大量臨床研究證明，患者情緒變化可對疼痛感覺產生明顯影響，所以調整患者情緒可能成為治療疼痛的重要輔助方法[2]。另外，在疾病發生過程中，患者往往出現恐懼、焦慮、抑郁等多種負面情緒，這些情緒因素對機體疼痛的影響是疼痛研究的重要內容之一。本研究以C57BL/6N小鼠作為對象，觀察在不同的負面情緒下小鼠機械痛閾的變化，為探討情緒改變對機械疼痛閾值的影響提供實驗研究數據。

1材料與方法

1.1實驗動物

雄性C57BL/6N小鼠60只，體重18～22 g，購自于上海杰思捷實驗動物有限公司，飼養于南京中醫藥大學實驗動物中心，實驗期間所有動物自由進食飲水，晝夜交替時間為1h。

1.2實驗儀器

高架十字迷宮、明暗穿梭箱、條件性恐懼行為學儀器、曠場試驗儀器、強迫游泳及強迫懸尾儀器均采用上海吉量行為學儀器產品。機械疼痛閾值檢測采用Von Frey纖維絲檢測。

1.3動物分組與造模

60只小鼠采用隨機體重法分為6組，每組10只，參照文獻[3- 5]制備動物恐懼模型、焦慮模型和抑郁模型，并分別設置對照組。

1.4檢測指標

檢測恐懼模型組小鼠在遭受電擊環境中的僵立行為，包括小鼠僵立次數、僵立時間；檢測焦慮模型組小鼠在經典的高架十字迷宮實驗中開放臂停留時間比例、明暗穿梭箱穿梭次數，以及曠場試驗中在曠場周邊區域活動的路徑與總路徑之比；檢測抑郁模型組小鼠在強迫懸尾和強迫游泳實驗中抑郁樣行為。機械疼痛閾值用VonFrey纖維絲檢測，應用經典的“up and down”法記錄實驗結果，并根據公式計算小鼠50%縮足閾值[6]。

1.5統計學處理

2結果

2.1各組動物實驗前基礎數據比較

隨機分組后檢測各組小鼠體重、自發活動情況以及基礎機械痛閾。結果顯示，各實驗組之間以上3項基礎數據差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1各組小鼠初始體重、自發活動及基礎機械痛閾比較(n=10)

指 標恐懼模型對照組模型組焦慮模型對照組模型組抑郁模型對照組 模型組初始體重/g20.9±1.1521.13±1.06 20.18±1.01 20.56±1.13 19.97±0.89 20.05±1.11 自發活動路徑/mm16439±821.9517210±860.5016298±808.7016174±814.9 15992±799.6 16041±802.05機械痛閾/g1.05±0.041.12±0.05 1.12±0.06 1.16±0.05 0.97±0.04 0.95±0.06

2.2恐懼情緒對小鼠機械痛閾的影響

通過條件性恐懼造模后，模型組小鼠呈現明顯的恐懼行為，表現為小鼠僵立次數、僵立時間均顯著增加，確定小鼠恐懼模型制備成功。小鼠機械痛閾檢測結果顯示，恐懼能夠顯著增加其機械痛閾(表2)。

表2小鼠恐懼行為及其對機械痛閾的影響(n=10)

組 別僵立時間/s僵立次數機械痛閾/g對照組97.02±4.81 7±0.34 1.02±0.05 模型組161.46±8.06a28±1.39b1.71±0.08a

與對照組比較，aP<0.05，bP<0.01

2.3焦慮情緒對小鼠機械痛閾的影響

在高架十字迷宮實驗中小鼠開放臂停留時間比例顯著減少；在明暗穿梭箱實驗中小鼠穿梭次數顯著減少；曠場試驗中小鼠周邊活動路徑與總路徑之比明顯增加，與對照組比較差異均有統計學意義，提示小鼠焦慮模型制備成功。焦慮情緒對小鼠機械痛閾影響的檢測結果顯示，焦慮情緒能夠明顯增加其機械痛閾(表3)。

2.4抑郁情緒對小鼠機械痛閾的影響

在強迫懸尾和強迫游泳實驗中小鼠抑郁樣行為較對照組呈現顯著增強，抑郁模型制備成功。小鼠機械疼痛閾值檢測結果顯示，抑郁情緒能夠明顯增加其機械痛閾(表4)。

表3小鼠焦慮行為及其對機械痛閾的影響(n=10)

組 別穿梭次數開放臂停留時間比例/%曠場周邊路徑比例/%機械痛閾/g對照組62±3.12 79±3.94 45.9±2.31 0.98±0.04 模型組41±2.05a13±0.62b76.8±3.82a0.51±0.02a

與對照組比較，aP<0.05，bP<0.01

表4小鼠抑郁行為及其對機械痛閾的影響(n=10)

組 別懸尾不動時間/s游泳不動時間/s機械痛閾/g對照組115±5.73 88±4.38 1.13±0.05 模型組167±8.35a137±6.88a0.67±0.03a

與對照組比較，aP<0.05

3討論

慢性疼痛患者常伴有一些心理方面的改變，同時在患有焦慮、抑郁等情緒疾病的患者中也有疼痛的臨床表現。另外，在腫瘤[7]、口腔疾病[8]、術后恢復[9]等治療和康復過程中適當地調節患者焦慮和抑郁情緒均能夠改善患者的主觀疼痛感覺。說明情緒也參與了疼痛的發生和發展過程，相同的致痛因素作用于生物個體，可以因情緒的差異導致主體感受疼痛程度不同[10]。本實驗制備了3種負面情緒模型即恐懼、焦慮和抑郁模型，觀察不同情緒下小鼠機械痛閾的變化。結果顯示：在恐懼情緒下小鼠的機械痛閾明顯升高，對機械刺激敏感性下降；而在焦慮和抑郁的情緒下小鼠機械痛閾顯著下降，對機械刺激的敏感性升高。這從機械痛閾角度反映了在不同負面情緒下疼痛感覺的變化，但其神經生物學機制尚需進一步探討研究。目前，研究者認為產生此種改變的物質基礎在于管控情緒和疼痛的腦區結構上存在交叉，如杏仁核和前額葉與情緒和疼痛的關系均較密切[11]。當恐懼發生時，機體表現為對抗性反應會激活前額葉介導的鎮痛機制，由此產生對疼痛刺激的耐受[12]。所以在測定恐懼模型小鼠機械疼痛閾值時出現了疼痛閾值的增加。神經內分泌的改變也是負面情緒和疼痛相互影響的重要原因之一。單胺類神經遞質功能的顯著降低與抑郁情緒密切相關，研究顯示，針刺鎮痛顯效的同時，作為重要的單胺類神經遞質5- 羥色胺系統被顯著加強；同時實驗人員發現，神經阻滯治療后對患者的疼痛和情緒具有雙重改善作用[13]，抗抑郁藥物可以緩解部分疼痛，也說明兩者可以互為因果并相互影響[14]。因此，在焦慮和抑郁模型動物中疼痛的閾值會降低，導致疼痛敏感性增加。

綜上所述，情緒的改變可以直接影響小鼠的機械痛閾，導致其對疼痛刺激的行為學改變。由此可知，疼痛與情緒關系密切，不同的情緒可以導致機械痛閾上調或下調，所以臨床治療疼痛的過程中，重視患者情緒的改變能夠減緩疼痛，也能夠促進相關疾病的治療。

[參考文獻]

[1] 杜燕平，毛英，曾云霞.心理干預對門診換藥患者負性情緒及疼痛的影響[J].中國醫學工程，2015(6):140- 141．

[2] 趙瓊嫻，尹善德.優質護理服務對婦科腹腔鏡手術患者焦慮抑郁情緒及術后疼痛的影響[J].中國煤炭工業醫學雜志，2015，18(8):1437- 1440．

[3] 王紅波，安獻麗，李幼虹，等.干預條件性恐懼記憶表達的相關影響因素分析[J].心理科學進展，2010，18(5):718- 724．

[4] WELLMAN L L，FITZPATRICK M E，MACHIDA M，et al.The basolateral amygdala determines the effects of fear memory on sleep in an animal model of PTSD[J].Exp Brain Res，2014，232(5):1555- 1565．

[5] 許晶，李曉秋.慢性應激抑郁模型的建立及其評價[J].中國行為醫學科學，2003，12(1):14- 17．

[6] CHAPLAN S R，BACH F W，POGREL J W，et al.Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw[J].J Neurosci Methods，1994，53(1):55- 63．

[7] 高文斌，王麗雙，尹良偉，等.惡性腫瘤患者抑郁情緒與疼痛的調查分析[J].神經疾病與精神衛生，2002，2(3):186- 188．

[8] 劉澤忠，劉陽.負性情緒和牙列缺損患者種植術后疼痛的相關性研究[J].安徽醫藥，2015，19(6):1155- 1156．

[9] 俞碧霞.甲狀腺手術患者疼痛及負性情緒的護理干預效果[J].當代護士(中旬刊)，2015，(8):31- 33.

[10] OUTCALT S D，KROENKE K，KREBS E E，et al.Chronic pain and comorbid mental health conditions:independent associations of posttraumatic stress disorder and depression with pain，disability，and quality of life[J].J Behav Med，2015，38(3):535- 543．

[11] 黃進，康曉征，羅非.杏仁核參與疼痛情緒過程的研究進展[J].生理科學進展，2005，36(4):289- 294．

[12] RHUDY J L，MEAGHER M W.Fear and anxiety:divergent effects on human pain thresholds[J].Pain，2000，84(1):65- 75．

[13] 張忠漢，吳秀英，王彬，等.神經阻滯對髂腹下神經痛患者疼痛與不良情緒的雙重改善作用[J].中國臨床康復，2005，9(24):47- 49．

[14] 張田，傅安球.創傷后應激障礙的生物學影響因素及相關藥物治療的研究進展[J].東南大學學報：醫學版，2011，30(4):649- 652．

doi：10.3969/j.issn.1671- 6264.2016.02.006

[中圖分類號]R395.3

[文獻標識碼]A

[文章編號]1671- 6264(2016)02- 0186- 03

[通信作者]唐宗湘E- mail：zongxiangtang1@163.com

[作者簡介]王中立(1983-)，男，河北保定人，在讀博士研究生。E- mail：zhongliwangtcm@126.com

[基金項目]國家自然科學基金(31271181);江蘇省高?！扒嗨{工程”、江蘇省中西醫結合優勢學科、南京中醫藥大學江蘇省中醫藥防治腫瘤協同創新中心項目

[收稿日期]2015- 11- 16[修回日期] 2015- 12- 31

[引文格式] 王中立,戴建國,侍昊,等.恐懼、焦慮、抑郁情緒對小鼠機械性痛閾的影響[J].東南大學學報:醫學版，2016,35(2)：186- 188.

·論著·