原人參二醇對人肺腺癌A549細胞作用的meta分析

許　宏，楊佳卉，楊景麗（蘭州大學第一臨床醫學院，甘肅　蘭州730020）

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原人參二醇對人肺腺癌A549細胞作用的meta分析

許宏，楊佳卉，楊景麗
（蘭州大學第一臨床醫學院，甘肅蘭州730020）

摘要：利用Meta分析方法評價原人參二醇對人肺腺癌A549細胞的作用。meta分析結果顯示：原人參二醇[20(S)-原人參二醇或20(R)-原人參二醇]對人肺腺癌A549細胞在阻滯細胞周期、抑制細胞增殖、促進細胞凋亡不同方面有明顯的作用,且隨著濃度增大，作用隨之更加明顯。

關鍵詞：原人參二醇；人肺腺癌A549細胞；細胞周期；細胞存活率；細胞凋亡

肺癌是一種嚴重影響人類生命健康的疾病之一，目前已成為世界上發病率和死亡率最高的惡性腫瘤。肺腺癌惡性程度較高，近年來全球范圍內發病率呈上升趨勢，已經超越鱗癌成為最常見的肺癌，A549細胞是人肺腺癌的細胞株，屬于常見的惡性腫瘤類型。目前，肺癌病因及發病機制尚未完全闡明，但從腫瘤細胞學來看，肺癌發生的本質在于細胞增殖與凋亡的調節失控。近年來中藥的抗癌機制研究取得了很大進展，尤其對肺癌細胞增殖周期的調控與誘導細胞凋亡兩方面內容。積極尋找特效和低毒的腫瘤防治藥物成為當今我國乃至世界面臨的緊迫任務之一[1]。人參作為中國傳統中藥，在中藥史上占有重要的地位，具有大補元氣、補氣益肺、安神益智的功效，被用于多種古方驗方的主藥，人參為五加科多年生草本植物,其成分具有諸多生物活性[2]。現代醫學研究表明，人參具有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物活性作用[3]。原人參二醇為從人參中提取出的有效成分之一。為了客觀的評價原人參二醇對人肺腺癌A549細胞的作用，本研究采用meta分析的方法合并分析當前所有原人參二醇與A549細胞的關系的研究，期望為原人參二醇在肺腺癌治療中的價值提供證據。

1　資料與方法

1.1納入排除標準

納入原人參二醇對人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響的研究，原人參二醇的濃度不限。排除：①聯合其他化學藥；②數據不完整或有錯誤。對重復發表的文獻僅保留最先發表的一篇。對同一研究多次發表，僅保留樣本量最大和信息最全的一篇。

1.2文獻檢索

利用“人參”、“A549”、“肺癌”、“肺腺癌”檢索萬方數據庫、中國期刊全文數據庫、維普中文科技期刊數據庫，獲取有關原人參二醇對人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響的研究，檢索實施時間為2015年5月，所有檢索策略均通過多次預檢索后確定，檢索式根據具體數據庫做相應的調整。此外，追查已納入文獻的參考文獻，以獲取以上檢索未發現的相關信息。

1.3資料提取

提取內容主要包括：①一般資料：題目、作者姓名、發表日期和文獻來源。②人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡情況。③實驗的方法。如遇分歧通過討論或根據第3位研究人員的意見協商處理。

1.4統計分析

對不同濃度原人參二醇對的人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響采用RevMan5.2統計軟件Meta分析，以均數差（MD）為效應量，效應量以95%CI表示。

2　結果

2.120(S)-原人參二醇對A549細胞細胞周期的影響[4-5]

由表1可知，在20 (S)-原人參二醇作用24h時，檢測G0/G1期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統計學意義（P＜0.05）。檢測G2/M期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，20μmol/mL和40μmol/mL組有統計學意義（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統計學意義（P＜0.05）。檢測S期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統計學意義（P＜0.05）。

表1　20(S)-原人參二醇對A549細胞細胞周期的影響

2.220(S)-原人參二醇對A549細胞存活率的影響[5-65]

由2表可知，在20 (R)-原人參二醇作用72h時，檢測細胞存活率，對照組分別和1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統計學意（P＜0.05）；1μmol/mL分和10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 10μmol/ml分和50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 50μmol/mL和100μmol/mL相比，無統計學意義（P＞0.05）。

表2　20(R)一原人參二醇對對A549細胞存活率的影響

2.320(S)-原人參二醇對A549細胞凋亡率的影響[4,5]

由表3可知，在20(S)-原人參二醇作用24h時，定量分析G0/G1期前的亞二倍體凋亡峰（SubG1)得到細胞凋亡率。對照組分別和10μmol/mL、20μmol/ mL、40μmol/mL相比，均有統計學意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統計學意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統計學意義（P＜0.05）。

表3　20(S)-原人參二醇A549細胞凋亡率的影響

3　討論

人參被人們稱為“百草之王”,是我國傳統的名貴藥材。人參含有多種人參皂苷單體及人參倍半萜稀、人參酸、人參英、人參奎酮、人參寧、人參多糖、B族維生素、煙酸、膽堿、多種氨基酸以及微量元素鍺等成分[7]。其主要活性成分是人參皂苷,人參皂苷具有抗疲勞、延緩衰老、抑制腫瘤細胞生長、調節中樞神經系統、提高機體免疫力、改善心腦血管供血不足等作用。關于抗腫瘤作用方面研究最多的是二醇組人參皂苷，20(S)-人參皂苷Rg3和Rh2,它們在抑制腫瘤血管生成、降低腫瘤微血管密度、誘導腫瘤細胞凋亡、抗腫瘤轉移、對化療藥物減毒增效等方面具有較廣泛的抗腫瘤功效[8,9]。將人參皂苷Rg3的3位上的末端葡萄糖水解掉可得到人參皂苷Rh2,再把人參皂苷Rh2的3位上的最后一個葡萄糖水解掉就得到20(S)-原人參二醇,20(S)-原人參二醇作為人參二醇組皂苷化學水解及人腸道菌代謝的最終產物,有可能比人參皂苷Rg3和人參皂苷Rh2具有更強的抗癌活性、抗癌增效減毒作用以及增強機體免疫功能的作用,而且生物利用度可能更高[10]。20(S)-原人參二醇的分子式為C30H52O3。

本研究結果顯示，20(S)-原人參二醇以0μmol/ mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/ mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細胞24h后，實驗組G0/G1期細胞與對照組相比，呈現濃度依賴性遞增，而G2/M期與S期細胞數目相應減少，提示20(S)-原人參二醇對A549細胞的周期調控作用主要發生于Gl期，阻止其向G2/M期與S期發展,即可將細胞阻滯于Gl期，從而抑制細胞的增值。張銳等研究結果表明20(S)-原人參二醇對A549細胞的殺傷作用可能由于其對A549細胞凋亡的誘導。

20 (R)-原人參二醇以分別以對照組以0μmol/ mL、1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL作用于A549細胞72h后，實驗組細胞存活率與對照組相比，呈現濃度依賴性遞增。

20 (S)-原人參二醇以0μmol/mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細胞24h后，實驗組G0/G1細胞凋亡率與對照組相比，呈現濃度依賴性遞增。有文獻報道AKT活性的下調可能是PPD誘導A549細胞凋亡的一個關鍵步驟，PPD可通過抑制PI3K/AKT信號途徑作用線粒體通路誘導A549細胞凋亡。

參考文獻：

[1]張春晶,于海濤,侯金才等. S型與R型人參皂Rh2對人肺腺癌A549細胞增殖和凋亡的影響[J].中國中藥雜志，2011，36（12）:1670-1674.

[2]周琳.人參皂昔Rh2誘導HeLa和A549細胞凋亡的信號轉導機制[D].湖南：中南大學，2010.

[3]潘正安.中藥大辭典.上海:上海科技出版社,2003:3-5.

[4]張銳.20(S)-原人參二醇誘導非小細胞肺癌A549細胞凋亡及抑制PI3K/AKT信號途徑的研究[D].長春：吉林大學，2009.

[5]張銳,徐華麗,曲紹春等. 20(S)-原人參二醇對肺癌A549細胞增殖和荷瘤裸小鼠腫瘤生長的抑制作用[J].中草藥，2008，39（12）：1838-1841.

[6]劉娜.西洋參莖葉皂昔水解產物化學成分及抗腫瘤活性研究[D].延吉：延邊大學，2008.

[7]徐曉軍，石文，湯永民等.人參皂苷Rh2抗白血病多藥耐藥細胞K562/NCR作用研究[J].中草藥,2010,41(7): 1131-1135.

[8] Zhao J S, Huang L Y, Belmar N,et al. Oral RDP58 al lowCPT -11 dose intensification for enhanced tumor re sponse by decreasing gastrointestinal toxicity [J].Clin Can cer Res,2004, 10: 2851-2859.

[9]陳婷梅,王亞平,陳地龍,等.人參總皂苷誘K562細胞凋亡的實驗研究[J].中草藥, 2003,34(3): 235-237.

[10] Eun-Ah B, Han M J. Metabolish of 20(S)-and 20 (R)-ginsenoside Rg3by human intestinal bacteria and its relation to in vitro biological activities [J].Biol Pharm Bull, 2002, 25:58-63.

中圖分類號：R230.5