輔助性T細胞應答在肺纖維化發生、發展過程中作用的研究進展

杜麗娟，何成詩， 由鳳鳴，嚴然

(1成都中醫藥大學，成都610075；2川北醫學院附屬醫院)

·綜述·

輔助性T細胞應答在肺纖維化發生、發展過程中作用的研究進展

杜麗娟1,2，何成詩1， 由鳳鳴1，嚴然1

(1成都中醫藥大學，成都610075；2川北醫學院附屬醫院)

肺纖維化是多種原因引起的慢性肺破壞性疾病的共同結局，其發病率及病死率呈升高趨勢。輔助性 T(Th)細胞是免疫系統主要的效應及調節細胞，主要功能是輔助或誘導免疫應答。當Th1細胞分泌的肺纖維化相關細胞因子IL-1、轉化生長因子β(TGF-β)，Th2細胞分泌的IL-6、IL-13，Th17細胞分泌的IL-17、IL-22等炎癥因子表達失調，可導致Th1/Th2及Th17/Treg失衡，一方面直接參與肺損傷，另一方面通過多種信號通路影響疾病進展，激活核轉錄因子調控多種參與肺纖維化相關的基因表達，造成肺部炎癥和纖維化形成。

肺纖維化；輔助性T細胞；白細胞介素；轉化生長因子β

肺纖維化是多種原因引起的慢性肺破壞性疾病的共同結局，其病理表現為肺部炎癥導致肺泡持續性損傷、成纖維細胞增殖、細胞外基質過度沉積，目前尚無根治或特效的治療方法。近年來研究認為，在肺纖維化發展過程中包括三個環節：肺泡的免疫和炎癥反應、肺實質損傷和受損肺泡修復(纖維化)，其中輔助性 T(Th)細胞即 CD4+T 細胞異常活化在肺纖維化的發生、發展過程中處于中心環節。Th細胞亞群Th1/Th2及Th17/Treg失衡可能是肺纖維化發病的最直接和最重要的因素。本研究對Th細胞及其相關細胞因子在肺纖維化發病中的作用作一綜述。

1 Th1、Th2細胞與肺纖維化的關系

Th細胞是免疫系統主要的效應及調節細胞，主要功能是輔助或誘導免疫應答。Th細胞根據產生的細胞因子不同分為Th1和Th2細胞，正常狀態下兩種細胞通過分泌細胞因子進行相互調節，保持Th1/Th2的動態平衡。

1.1 Th1細胞分泌的肺纖維化相關細胞因子 在肺纖維化發病過程中，Th1細胞發揮直接或間接作用。Th1細胞分泌的與肺纖維化相關的細胞因子包括轉化生長因子β(TGF-β)、 IL-1等，促進細胞免疫應答，導致肺部炎癥損傷甚至纖維化。① TGF-β：TGF-β是參與肺纖維化的Th1型細胞因子中最重要的一種，主要有TGF-β1、β2、β3，其中以TGF-β1最重要。TGF-β能促進細胞外基質(ECM)與細胞黏附，通過抑制ECM降解酶活性，增強降解酶抑制物活性，抑制ECM降解，同時刺激成纖維細胞α-平滑肌肌動蛋白(ɑ-SMA)基因表達，調節肺炎癥細胞核上皮細胞功能，促進成纖維細胞合成，分泌大量膠原。在博萊霉素誘導肺纖維化大鼠模型中，TGF-β1表達顯著升高，且隨著時間延長和肺纖維化程度加重TGF-β1表達逐漸增加；推測肺組織中成纖維細胞具有分泌TGF-β等多種細胞因子的能力，通過分泌這些細胞因子，影響肺纖維化病理進程[1]。半定量RT-PCR檢測結果顯示，在肺損傷及肺纖維化階段，TGF表達均明顯增加[2]。TGF-β受多個細胞內信號途徑轉導和調控，如TGF-β1/Smad3信號通路、RhoA/Rho相關卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信號轉導通路等，激活上述途徑可刺激大鼠肺成纖維細胞向肌成纖維細胞分化，進而促進膠原蛋白合成，使肺纖維化進一步發展[3～5]；誘導人肺泡上皮A549細胞發生上皮-間質轉化(EMT)，分別在蛋白水平和RNA水平抑制p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和c-Jun氨基端激酶(JNK)信號通道，增加間質細胞表型蛋白表達和減少上皮細胞表型蛋白表達，增加p38 MAPK和JNK通道蛋白表達。無論蛋白水平抑制或基因沉默，激活p38 MAPK和JNK通路均可減輕A549細胞的EMT，故認為p38 MAPK和JNK信號通道調控TGF-β表達[6]。此外，研究發現TGF-β受MicroRNA-26a調節，MicroRNA-26a直接針對細胞周期蛋白D2調節TGF-β1、TGF-β2，影響肺成纖維細胞增殖[7]。② IL-1：IL-1是發揮免疫調節作用的致炎細胞因子，由單核巨噬細胞分泌合成，包括IL-1α、IL-1β和IL-1受體拮抗物(IL-1ra)，是體內調節免疫和炎癥反應的中心介質。Guo等[8]發現二氧化硅誘導肺纖維化模型小鼠肺內IL-1β高表達，且IL-1β可抑制TGF-β1、Ⅰ型膠原、纖連蛋白的基因表達，減輕肺纖維化。金玉蘭等[9]認為，肺泡巨噬細胞早期凋亡及細胞因子IL-1、IL-8表達變化可能是二氧化硅致大鼠肺纖維化發生、發展的重要原因。有研究認為，IL-1β與IL-17A高度相關，在特發肺纖維化患者的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17A、IL-1β水平均增加，推測肺內存在IL-1β-IL-23-IL-17A軸，該軸相關因子的變化將導致肺部炎癥和纖維化[10,11]。Aumiller等[12]認為，特發肺纖維化患者IL-1β表達增強可能與WNT/β-catenin信號通路有關。

1.2 Th2細胞分泌的肺纖維化相關細胞因子 Th2細胞分泌的參與肺纖維化發病的主要細胞因子有IL-13、IL-6，其與誘導B細胞生長、分化和免疫復合物形成密切相關，對機體體液免疫反應具有重要作用，同時可抑制纖維母細胞凋亡，促進肺纖維化。① IL-13：IL-13是調控肺纖維化的主要Th2型細胞因子，其受體主要包括IL-13Rɑ1、IL-13Rɑ2，其中IL-13Rɑ2可作為“誘餌”受體，與IL-13Rɑ1/IL-4Rɑ復合物競爭結合IL-13，進而調節IL-13介導的炎癥反應。Aoki等[13]研究發現，人類中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)能誘導巨噬細胞產生IL-13，認為HNE可能成為控制肺纖維化炎癥反應的關鍵。Chandriani等[14]發現，在特發性肺纖維化患者肺組織中IL-13、IL-4、IL-13Rɑ2、IL-13誘導目標基因高表達。IL-13Rɑ2表達依賴STAT6信號通路，通過IL-4或IL-13誘導肺成纖維細胞產生。安培培等[15]認為，IL-13Rɑ2參與肺成纖維細胞的增殖和轉移，IL-13可直接作用于成纖維細胞并可能以IL-13Rɑ2為起點發揮致肺纖維化作用。② IL-6：肺間質中的成纖維細胞、肺泡巨噬細胞、內皮細胞、支氣管上皮細胞等均可產生IL-6。IL-6作為前炎性細胞因子，在促進細胞生長和抗細胞凋亡過程中發揮重要作用。IL-6跨膜信號轉導途徑有兩條：經典通路和反式信號通路。在經典途徑中，IL-6與膜結合受體IL-6R結合后經受體關聯的gp130向胞內傳遞次級信號；在反式信號通路中，IL-6與游離的亞單位IL-6Rɑ結合成IL-6/sIL-6Rɑ復合體，結合至膜表面受體gp130亞單位上，進而完成信號轉導。Le等[16]發現，小鼠肺纖維化模型肺內sIL-6Rɑ水平增加，IL-6表達增強，認為IL-6主要通過反式信號通路使巨噬細胞產生sIL-6Rɑ，導致成纖維細胞增殖、ECM產生增多，加速肺纖維化形成。Moodley等[17]研究發現，IL-6可誘導B細胞生長、分化并產生免疫球蛋白，形成免疫復合物，造成肺損傷，同時減緩肺纖維化過程的纖維母細胞凋亡，促進肺纖維化形成。

2 Th17細胞亞群與肺纖維化的關系

Th17細胞亞群主要分泌IL-17A、IL-17F、IL-22等炎癥因子，介導炎性反應、自身免疫性疾病、腫瘤和移植排斥反應等的發生、發展。Th17細胞亞群分泌的與肺纖維化相關的細胞因子主要包括 IL17、IL-22等，參與成纖維細胞增殖、肺泡上皮細胞EMT、膠原合成和炎癥細胞因子分泌等，進而促進肺纖維化的發生、發展。① IL-17：IL-17主要由Th17細胞分泌，被認為是一種能誘導趨化因子釋放的促炎因子，可通過誘導其他炎癥細胞因子IL-6、TNF-α及趨化因子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)、巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)等表達，導致中性粒細胞聚集，介導組織損傷。Galati等[18]研究發現，肺纖維化患者NK細胞比例明顯減少，CD4+CD25 high Foxp3+調節性T(Treg)細胞明顯增加，TGF-β/IL-17比例增大，認為Treg/Th17免疫失衡可引起特發性肺纖維化，加重肺纖維化免疫炎癥，促進肺部膠原纖維沉積。Song等[19]發現，去除Treg細胞的肺纖維化小鼠模型Th17反應增加，Treg細胞可通過TGF-β1和IL-1β促進Th17細胞分化。Dong等[20]認為，IL-17具有促進小鼠肺纖維化形成中肺成纖維細胞增殖、轉化和膠原合成等作用。Wang等[21]研究發現，接受4個月IL-17A抗體注射的小鼠肺內IL-17表達下降，BALF中L-17A、TGF-β1和IL-6聚集減少，認為IL-17A抗體治療能夠減輕射線誘導的肺泡炎和肺纖維化。Mi等[22]研究發現，肺纖維化模型IL-17A表達升高，靶向干擾IL-17A可抑制免疫反應向Th1型細胞免疫反應轉變，能有效誘導自噬。Hayashi等[23]認為，IL-17A/F通過CD40介導的信號通路上調IL-17A 和 IL-17F肌動蛋白表達，促進IL-6產生，使膠原、血管內皮生長因子、血管生成素表達升高，最終導致細胞外基質沉積，引起肺纖維化。② IL-22：IL-22的主要結構與IL-10極其相似，被歸為IL-10細胞因子家族，主要由 Th17細胞分泌，另外固有淋巴細胞、γδ T細胞和NK T細胞也可分泌IL-22，具有抗炎和免疫調節作用。Liang等[24]認為，IL-22在博萊霉素誘導的肺纖維化過程中發揮保護作用。博來霉素誘導肺纖維化小鼠模型肺組織IL-22表達降低，肺和脾臟IL-22產生的γδ T細胞比例明顯降低，調控IL-22能改善肺泡上皮細胞系A549細胞向間充質轉變，部分逆轉受損細胞。

綜上所述，Th細胞可能在肺纖維化發病過程中發揮雙重作用，一方面直接參與肺損傷，另一方面通過多種信號通路調節疾病進展，如激活核轉錄因子調控多種參與肺纖維化相關的基因表達。

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國家自然科學基金資助項目(81473669)；四川省中醫藥管理局項目(2014A009)。

何成詩(E-mail: 18980880131@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.28.038

R563

A

1002-266X(2016)24-0103-03

2016-01-12)