血清維生素D濃度與子宮內膜癌相關性研究*

西安交通大學第二附屬醫院婦產科(西安710004)　段　釗　韓紅芳　王　穎

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血清維生素D濃度與子宮內膜癌相關性研究*

西安交通大學第二附屬醫院婦產科(西安710004)段釗韓紅芳王穎

摘要目的：探討血清維生素D濃度與子宮內膜癌的相關性。 方法：收集子宮內膜相關病變患者118例為試驗組，其中子宮內膜增生癥22例，子宮內膜癌96例，并以30例體檢健康婦女作為對照組。收集所有研究對象的清晨空腹肘靜脈血標本。采用放射免疫法檢測標本血清中維生素D的濃度。結果：子宮內膜癌患者血清維生素D水平較正常對照組減低，隨著子宮內膜癌病理分級及FIGO分期的升高，血清維生素D濃度逐漸減低，有淋巴轉移患者較無淋巴轉移者血清維生素D濃度亦減低，差異均有統計學意義。結論：血清維生素D濃度與子宮內膜癌惡性程度呈負相關。

主題詞子宮內膜腫瘤 維生素D@抗腫瘤作用

本研究通過檢測子宮內膜癌患者血清維生素D的濃度，初步探討血清維生素D水平與子宮內膜癌臨床病理學特征間的相關性。

對象與方法

1研究對象收集2014年1月至2015年12月西安交通大學第二附屬醫院婦產科收治的子宮內膜相關病變患者118例為試驗組，其中子宮內膜增生癥22例，子宮內膜癌96例，并以30例體檢健康婦女作為對照組。收集研究對象的清晨空腹肘靜脈血標本。所有病例按照子宮內膜活檢或術后病理學診斷分組，所有患者均未行放療、化療和激素治療，試驗組年齡28～72歲，平均年齡50.5歲，對照組年齡25～70歲，平均年齡45.5歲。子宮內膜癌的分類按照1988年國際婦科病理協會(ISGP)的分類法分類，并按2009年5月國際婦產科聯盟(FIGO)重新修訂的子宮內膜癌的手術病理分期標準進行病理分級和分期[1]。

2方法標本采集及預處理 取患者的空腹靜脈血5ml，分離血清，凍存于-80℃的冰箱。血清VD測定采用采用酶聯免疫法檢測，酶標儀檢測血清25(OH)2VD3，具體操作步驟按照說明書進行。

3統計學方法所有數據應用SPSS13.0 軟件包進行統計分析, 方法包括t檢驗、單因素方差分析等，P<0.05認為有顯著性差異。

結果

正常對照組25(OH)2VD3水平為37.78±4.95pg/ml，子宮內膜癌患者為29.39±6.36pg/ml，子宮內膜增生癥為31.51±3.86pg/ml，子宮內膜癌和子宮內膜增生癥患者血清25(OH)2VD3水平均顯著低于正常對照組，子宮內膜增生癥與子宮內膜癌之間無顯著性差異(P=0.148)；病理分級結果為：G1級患者血清25(OH)2VD3水平為34.16±6.07pg/ml，G2級的患者為30.65±5.60pg/ml，G3級的患者為25.06±5.71pg/ml。兩兩比較的結果顯示，病理分級G1和G3級(P=0.02)、G2和G3級(P=0.000)的患者血清25(OH)2VD3水平均有統計學意義；G1和G2級患者無顯著性差異(P=0.054)；FIGO分期Ⅰ期患者血清25(OH)2VD3水平為33.72±5.26pg/ml，Ⅱ期患者為29.76±6.24pg/ml，Ⅲ期患者為25.79±5.63pg/ml。兩兩比較的結果顯示Ⅰ期和Ⅱ期(P=0.032)，Ⅰ期與Ⅲ期(P=0.003)，Ⅱ期與Ⅲ期(P=0.021)患者血清 25(OH)2VD3水平差別有統計學意義；無淋巴結轉移的患者血清25(OH)2VD3水平為30.46±5.97pg/ml，淋巴結轉移的患者為24.74±6.06pg/ml，差別有統計學意義(P=0.001)。表明血清25(OH)2VD3水平與子宮內癌惡性程度呈負相關性。

討論

維生素D的前體7-脫氫膽固醇存在于皮膚中，在陽光的作用下轉化為維生素D3，維生素D3隨血液循環到肝臟轉化為維生素D的另一種形式25位單脫氧膽固醇，這種形式的效用更大。隨后25位單脫氧膽固醇進入腎臟被轉化為1，25位二羥膽鈣化醇，此形式是維生素D活性形式，活性最強。25(OH)D3是維生素D在血液中的主要運輸形式，其血清濃度高，半衰期長，是評價體內維生素D營養狀況最為可靠的指標。我們測定所指的維生素D也就是25(OH)D3血清水平。

流行病學及實驗室研究證明了維生素D及其類似物具有明顯可靠的腫瘤防治作用。目前認為，維生素D作為促進鈣吸收的活性物質，與鈣的協同發揮抗腫瘤作用；維生素D的受體作為核受體，參與靶基因的調控，進而干預腫瘤細胞的增殖與分化，影響瘤細胞的生物學行為。維生素D還可結合到細胞表面膜受體或者其它受體，介導第二受體激活旁路通路，控制許多參與過量表達生物活性的基因表達。另外，維生素D通過調控細胞周期、誘導細胞凋亡、影響生長因子等途徑達到預防和治療癌癥的作用。

維生素D在體內外試驗中均可抑制子宮內膜癌的生長和轉移。Yabushita等[2]發現50nmol的calcitriol可以抑制子宮內膜癌RL95-2細胞株的生長，RL95-2細胞的生長形態也發生改變，由極性腺樣結構轉變為柱狀。維生素D與鉑類藥物聯合使用，可以增強鉑類藥物抗腫瘤作用。Saunders等[3]研究證實卡鉑和calcitriol聯合應用可以以濃度依賴方式抑制腫瘤細胞生長。因而可以確定維生素D對子宮內膜癌無論單用，還是與抗腫瘤藥物聯合應用，均能抑制瘤細胞生長。Lee的研究[4]發現calcitriol與雌激素聯合使用促進了子宮內膜癌細胞凋亡和細胞周期阻滯，顯現了抗腫瘤作用。

Nada等的研究發現一個并不引起血鈣升高的維生素D2衍生物抑制了裸鼠的移植卵巢以及子宮內膜癌的生長。這也是通過體內補充維生素D抑制腫瘤的生長，相對于培養細胞抗腫瘤作用更令人信服維生素D的抗子宮內膜癌的作用。美國喬治敦大學的一項研究也發現,補充維生素D可以降低肥胖實驗鼠患子宮內膜癌的風險。研究人員通過對實驗鼠進行基因處理, 使實驗鼠容易發生子宮內膜癌。在隨后的實驗中對實驗鼠添加維生素D在食物中。研究發現, 經過補充維生素D的肥胖實驗鼠患子宮內膜癌明顯降低(25%), 而未添加維生素D肥胖實驗鼠子宮內膜癌發生率顯著增高(67%)。不過,補充維生素D對體重正常的實驗鼠卻未顯現保護作用。

本研究發現與健康婦女相比，子宮內膜癌患者的血清25(OH)D3水平明顯降低，且有統計學意義；值得注意的是子宮內膜癌患者的25(OH)D3水平與FIGO分期、病理分級、淋巴結轉移相關，提示25(OH)D3水平與與子宮內膜癌的發生發展存在一定的關系。本研究的發現證實維生素D水平降低可能與子宮內膜癌的發生發展有關，維生素D補充可能有益于子宮內膜癌患者。因而，維生素D在治療子宮內膜癌時有一定的臨床指導意義。

參考文獻

[1]Peerelli S.Revised FIGO staging for carcinoma of the vulva,cervix ,and endometrium[J].Int J Gynaecol Obstet,2009,105(2):103-104.

[2]Yabushita H, Hirata M, Noguchi M, Nakanishi M. Vitamin D receptor in endometrial carcinoma and the differentiation-inducing effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3 on endometrial carcinoma cell lines[J]. J Obstet Gynaecol Res. 1996;22:529-39.

[3]Saunders DE, Christensen C, Wappler NL,etal. Additive inhibition of RL95-2 endometrial carcinoma cell growth by carboplatin and 1,25 dihydroxyvitamin D3[J]. GYNECOL ONCOL. 1993;51:155-9.

[4]Lee LR, Teng PN, Nguyen H,etal. Progesterone enhances calcitriol antitumor activity by upregulating vitamin D receptor expression and promoting apoptosis in endometrial cancer cells[J]. Cancer Prev Res (Phila). 2013;6:731-43.

(收稿：2016-02-02)

【中圖分類號】R737.33

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.011

Biological effects of siRNA interference targeting MeCP2 gene on cervical cancer Hela cells

Department of Obstetrics and Gynecology, The Second Affiliated Hospital

of Xi'an Jiaotong University(Xi'an 710004)Duan ZhaoHan HongfangWang Ying

ABSTRACTObjective To investigate the biological effects of MeCP2 on cervical cancer Hela cells and molecular mechanism. Methods siRNA interference were used to knockdown MeCP2. MTT assay were used to analyze the effects of MeCP2 on proliferation of cervical cancer Hela cells. To analyze the effects of MeCP2 on the cell cycle and apoptosis of cervical cancer Hela cells with flow cytometer. To examine the effects of MeCP2 siRNA on the expression of Cyclin D1, P-ERK1/2 and P-p38 with Western Blot. Results MeCP2 mRNA and protein significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01). MeCP2 siRNA inhibits proliferation of cervical cancer Hela cells. The number of S and G2/M phase cells significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01), meanwhile the number of G1/G0 phase cells remarkably increased (P<0.01). The number of early apoptotic cells and late apoptotic cells remarkably increased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01). It was found that Cyclin D1 and P-ERK1/2 proteins significantly decreased in MeCP2 siRNA group compared to negative control group (P<0.01), P-p38 proteins remarkably increased (P<0.01). Conclusion MeCP2 promotes proliferation of cervical cancer Hela cells through regulating P-ERK1/2 and Cyclin D1 expression, and inhibits apoptosis by suppressing P-p38 MAPK signal pathway.

KEY WORDSEndometrial NeoplasmsVitamin D@Antitumor activity

*陜西省自然科學基金資助項目(2013JM4012)