纖維化標志物CTGF與冠心病的相關性*

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·論著·

纖維化標志物CTGF與冠心病的相關性*

陳潔1,黃山1，左麗2△

(1.貴州醫科大學附屬人民醫院臨床檢驗中心，貴州貴陽 550002；

2.貴州醫科大學基礎醫學院，貴州貴陽 550001)

摘要:目的探討血清結締組織生長因子(CTGF)水平與冠心病的關系及其臨床診斷價值。方法將102例行冠狀動脈造影檢查確診的冠心病患者作為冠心病組，將年齡和性別與冠心病組嚴格匹配的冠狀動脈造影檢查正常的98例作為健康對照組；采用t檢驗分析冠心病組與健康對照組間臨床基線資料、CTGF和人轉化生長因子β1(TGF-β1)的差異，采用二元Logistic 逐步回歸方法探討冠心病與CTGF等的相關性，評價其臨床診斷價值。結果冠心病組三酰甘油、總膽固醇、載脂蛋白A1、高密度脂蛋白、脂蛋白a、低密度脂蛋白、TGF-β1和CTGF與健康對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。經Spearman相關分析顯示CTGF和TGF-β1呈正相關(r=0.773,P=0.002)；檢測CTGF可以在評價冠心病的危險分層方面起到積極的作用。結論年齡、吸煙、高血壓、總膽固醇、載脂蛋白A1、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白a、CTGF、TGF-β1是冠心病的影響因素，臨床工作中檢測CTGF可以作為評估冠狀動脈狹窄及嚴重程度的指標。

關鍵詞:冠心病；結締組織生長因子；臨床意義

近年來隨著醫學技術的不斷發展，原先認為生物學作用較單一的細胞因子，可能發揮著更廣泛的生物學作用，研究表明纖維化標志物結締組織生長因子(CTGF)在冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的發生、發展中起重要作用，在冠狀動脈綜合征的診斷、危險性評估、療效觀察和預后估計等方面起著重要的作用[1]。本研究旨在探討纖維化標志物及其上游因子人轉化生長因子β1(TGF-β1)與冠心病的相關性，結合臨床基線資料，評估它們與冠心病的相關性及臨床價值。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年1～12月在貴州醫科大學附屬人民醫院心內科病區行冠狀動脈造影檢查的住院患者200例，參考《內科學》(第7版)診斷標準，冠心病患者以左冠狀動脈主干、左旋支、左前降支和右主干為目標血管分支節段，以最高狹窄程度的目標節段作為診斷依據。冠心病組102例，男69例，女33例,年齡(67±8)歲,其中穩定型心絞痛53例，不穩定型心絞痛30例，心肌梗死19例，另外98例冠狀動脈造影正常者設為健康對照組,其中男66例，女32例,年齡(65±9)歲。冠心病組和健康對照組在性別、年齡、吸煙構成比、體質量指數和高血壓構成比嚴格匹配，具有可對比性。排除標準：風濕性心臟病、動脈血管硬化癥、各種纖維化疾病、陳舊性心肌梗死病程少于3個月、心功能不全、急、慢性炎癥期患者、血液腫瘤疾病、自身免疫性疾病、肝功能不全、痛風、腎功能不全、冠狀動脈支架植入后、血液透析患者和惡性腫瘤患者，同時進行包括是否吸煙、性別、年齡、血壓、體質量指數等各基線臨床資料的問卷調查。所有納入研究的患者均簽署知情同意書，該研究得到了醫院倫理委員會的批準。

1.2方法

1.2.1標本制備在當天清晨冠狀動脈造影檢查術前，進行空腹無菌采集肘靜脈血，分離血清；一般生化指標檢測總膽固醇、三酰甘油、載脂蛋白A1、載脂蛋白B、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、C反應蛋白、脂蛋白a。領取一份凍存在-80 ℃待檢測纖維化標志物TGF-β1和CTGF。

1.2.2檢驗方法一般生化指標采用寧波美康880系列全自動生化分析儀及配套試劑檢測；TGF-β1、CTGF兩種標志物的檢測采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測，試劑盒購于上海瓦蘭科技公司，嚴格按照說明書操作執行。

1.2.3冠狀動脈造影嚴格按照Judkins法手術操作規程執行[2]，造影結果有2位臨床經驗豐富的主任醫師共同分析診斷。

2結果

2.1兩組檢測結果比較冠心病組三酰甘油、總膽固醇、載脂蛋白A1、高密度脂蛋白、脂蛋白a、低密度脂蛋白、TGF-β1和CTGF與健康對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1　　冠心病組和健康對照組檢測結果比較

2.2冠心病危險因素的二元Logistic回歸分析進行二元Logistic 逐步回歸分析，以2種纖維化標志物TGF-β1、CTGF及臨床基線資料為變量，以冠心病為因變量，探討冠心病的危險因素。結果見表2。年齡、吸煙、高血壓、總膽固醇、低密度脂蛋白、脂蛋白a、CTGF和TGF-β1是冠心病的獨立危險因素；高密度脂蛋白及其主要載體載脂蛋白A1是冠心病的保護因素。

表2　　冠心病相關因素的二元Logistic回歸分析

2.3CTGF和TGF-β1相關性分析經Spearman相關分析顯示，CTGF和TGF-β1相關，相關系數分別為r=0.773,P=0.002。

2.4CTGF和TGF-β1在冠心病組中比較穩定型心絞痛患者血清CTGF和TGF-β1的值分別為(211.32±19.64)pg/mL、(176.42±24.21)ng/mL；不穩定型心絞痛患者血清CTGF和TGF-β1的值分別為(281.32±25.64)pg/mL、(236.42±26.21)ng/mL；心肌梗死患者中血清CTGF和TGF-β1的值分別為(381.32±32.64)pg/mL、(306.42±24.21)ng/mL。CTGF和TGF-β1在冠心病各亞型分組中比較差異有統計學意義(P<0.05)，并且兩者呈正相關。

3討論

CTGF是由成纖維細胞、平滑肌細胞和血管內皮細胞合成分泌的，促進結締組織細胞增殖。血管平滑肌細胞參與構成了粥樣組織，是其中的一個重要組成部分，動脈粥樣硬化形成發展過程中，在CTGF刺激下，加速從動脈中膜向內膜遷移，形成泡沫細胞，從而促進動脈粥樣硬化的形成。導致了冠狀動脈狹窄，從而引起心肌組織缺血缺氧，導致心絞痛和心肌梗死的發生。冠心病的發病機制比較復雜，其中冠狀動脈狹窄是導致其發生的重要危險因素，許多因素如吸煙、性別[3]、年齡、肥胖[4]、高血壓[5]等都與冠心病密切相關，為此本研究設計將這些傳統危險因素在冠心病組和健康對照組進行嚴格匹配，以使研究具有同質性。

由表1可見這2個纖維化標志物CTGF和TGF-β1組間比較差異有統計學意義(P<0.05)，并且在不同的冠心病亞組間比較差異均具有統計學意義(P<0.05)，CTGF和TGF-β1經Spearman相關性分析顯示具有相關性(r=0.773,P=0.002),故此認為2個纖維化標志物因子可以作為診斷冠心病的指標，并對冠心病的危險分層發揮重要作用。顧秀峰等[6]和Ponticos[7]從不同方面論證了動脈粥樣硬化形成和發展中CTGF的作用，并提出干預CTGF的作用可能達到緩解和改善動脈粥樣硬化的狀態。本實驗三酰甘油、總膽固醇、載脂蛋白A1、高密度脂蛋白、脂蛋白a、低密度脂蛋白、TGF-β1和CTGF與健康對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。說明檢測三酰甘油、總膽固醇、載脂蛋白A1、高密度脂蛋白、脂蛋白a、低密度脂蛋白并評價其嚴重程度對冠心病的預防和診斷有重要意義。

由表2結果可知年齡、吸煙、高血壓、總膽固醇、低密度脂蛋白、脂蛋白a、CTGF和TGF-β1是冠心病的獨立危險因素；高密度脂蛋白及其主要載體載脂蛋白A1是冠心病的保護因素。在冠狀動脈狹窄的發展過程中，炎癥和血脂譜的紊亂也是冠狀動脈綜合征患者冠狀動脈狹窄的重要的特征，CTGF是TGF-β1的下游直接發生效應的介質，在形成癱痕、修復損傷與病理狀態下纖維化的形成方面起到重要作用?？梢酝ㄟ^考察患者年齡、吸煙、高血壓、總膽固醇、低密度脂蛋白、脂蛋白a、CTGF和TGF-β1、高密度脂蛋白及其主要載體載脂蛋白A1的指標來預計罹患冠心病的可能性以及已患冠心病患者的嚴重程度。促纖維化導致動脈硬化與動脈粥樣硬化[8-10]作用互相促進和影響，有學者[11]認為，基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達有賴于CTGF在血液中水平，可以通過調節其水平，繼而干預動脈粥樣硬化進程，從而影響冠心病的發生、發展及危險分層。冠心病患者及發病率近年來節節攀升，嚴重威脅人類健康，對其進行早發現、早治療將變得越來越重要，CTGF作為冠狀動脈綜合征的獨立危險因素，研究認為CTGF對預防和早診斷早治療冠心病患者有非常重要的意義。

CTGF和TGF-β1在穩定型心絞痛、不穩定型心絞痛和心肌梗死間比較差異有統計學意義(P<0.05)，而且水平隨病情嚴重程度增加而逐步升高。說明檢測CTGF和TGF-β1在判斷不穩定型心絞痛、心肌梗死與穩定型心絞痛的疾病分型和其嚴重程度有重要意義。姜建國等[8]研究表明通過下調CTGF表達，抑制MMP-2和MMP-9在血管平滑肌細胞中的表達，CTGF轉染可顯著增加胰腺癌細胞MMP-9、血管內皮生長因子(VEGF)的表達并促進其細胞增殖。細胞的生長、分化和免疫功能都離不開TGF-β1的調節作用，其在體內發揮著廣泛的生物學作用，TGF-β1作為CTGF上游介質，在對CTGF的基因轉錄、翻譯等發揮著重要的調控作用，是CTGF發揮生物學作用網絡中的重要節點因子[9]。這方面Chen等[10]研究認為CTGF血清濃度急性心肌梗死組水平要高于不穩定型心絞痛組和穩定型心絞痛組，結果與本研究一致。

綜上所述，冠心病是一個多種危險因素相互作用和影響的疾病過程，其中傳統危險因素有年齡、性別、血脂異常和吸煙等，纖維化標志物中TGF-β1和CTGF是反應冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的指標，檢測CTGF可以更高效的預防和早診斷早治療冠心病，在評價冠心病的危險分層方面也起到積極的作用。

參考文獻

[1]曾慶鑫，張坤，王少斌，等.血漿CTGF水平與急性動脈粥樣硬化性腦梗死的相關性研究[J].包頭醫學院學報，2014,30(1)：57-59.

[2]胡龍，黃政，章敬水，等.多功能5F tiger1導管與6F Judkins導管在經橈動脈途徑冠狀動脈造影中的對比[J].安徽醫藥，2013,17(3)：424-426.

[3]劉穎，蔡建華，鄢華，等.青年男性急性心肌梗死的危險因素及介入治療1年后隨訪分析[J].中國心血管雜志，2014,19(3)：172-176.

[4]武海濱，胡如英，龔巍巍，等.2010至2012年浙江省25歲及以上居民急性冠心病事件監測[J].中華心血管病雜志，2015,43(2)：179-184.

[5]王越越，汪琦瑛，韓國鑫，等.青年冠心病患者臨床特點及危險因素分析[J].中華急診醫學雜志，2015,24(4)：386-391.

[6]顧秀峰，張寰，劉勇，等.糖基化終產物對大鼠主動脈平滑肌細胞結締組織生長因子表達的影響[J].中華老年醫學雜志，2009,28(10)：847-852.

[7]Ponticos M.Connective tissue growth factor(CCN2) in blood vessels[J].Vascul Pharmacol，2013,58(3):189-193.

[8]姜建國，焦霞，朱曉蔚，等.CTGF基因轉染對胰腺癌細胞MMP-9、VEGF表達及增殖的影響[J].江蘇大學學報：醫學版，2013，23(5)：377-382.

[9]李玉，張言鎮，周艷菊，等.血清TGF-β1和CTGF水平與急性冠脈綜合征的關系[J].現代醫藥衛生，2011,27(7)：968-971.

[10]Chen C,Wei L,Chen WJ,et al.Serum TGF-β1 and SMAD3 levels are closely associated with coronary artery disease[J].BMC Cardiovascular Disorders，2014,14(3):18.

[11]羅俊生，馮旭，關寧，等.CTGF-siRNA轉染對血管平肌細胞MMP-2、MMP-9表達的影響[J].軍醫進修學院學報，2012,33(9):960-962.

The correlation between CTGF of fibrosis marker and coronary heart disease*

ChenJie1,HuangShan1,ZuoLi2△

(1.ClinicalLaboratoryCentre,People′sHospitalofGuizhouMedicineUniversity,Guiyang,Guizhou550002,China;2.BasicMedicalCollegeofGuizhouMedicineUniversity,Guiyang,Guizhou550001,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the correlation and clinical significance between CTGF of fibrosis marker and coronary heart disease.MethodsTotally 102 cases of coronary heart disease patients by coronary artery angiography ensured were used as coronary heart disease group,98 cases with age and sex strict matching of coronary heart disease were normal and were used as control group;T test was used to analysis the difference with disease group and control group at base clinical data,serum CTGF and TGF-β1,the correlation between coronary heart disease and serum CTGF level was evaluated by logistic regression analysis,and clinical diagnosed value was evaluated.ResultsTriglyceride,total cholesterol,apolipoprotein A1,high density lipoprotein,lipoprotein alpha,low density lipoprotein，TGF-β1 and CTGF in coronary heart disease group were significantly higher than those in control group(P<0.05).Spearman correlation analysis showed that CTGF and TGF-β1 were positively correlated (r=0.773,P=0.002).Serum CTGF can play positive role in the evaluation of the risk stratification of coronary heart disease.ConclusionAge,smoking,hypertension,total cholesterol，apolipoprotein A1,high density lipoprotein,low density lipoprotein,lipoprotein alpha,CTGF and TGF-β1 were influencing factors for coronary heart disease.Detection of CTGF in clinical work can be used as assessment coronary artery stenosis and severity index.

Key words:coronary heart disease;connective tissue growth factor;clinical significance

(收稿日期：2015-11-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.029

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)04-0501-03

基金項目：貴州省省長資金臨床應用課題專項研究項目[黔省專合字(2012)117號];貴州省衛生廳科學技術基金項目(gzwkj2012-1-129)，貴州省衛生廳立項資助項目(gzwkj2012-1-062)。

作者簡介：陳潔,女，主管檢驗師，主要從事檢驗醫學方法學及臨床應用研究?！魍ㄓ嵶髡撸珽-mail:zuoligymc@163.com。