常用急性肝損傷動物模型研究進展

李若飛　于春萍　蘭丁璇　付子杰

【摘? 要】肝臟是人類重要的代謝器官，承擔著維持生命的重要功能，還有解毒、造血和凝血作用，其中一些有損肝臟的物質也必須依靠肝臟解毒，故肝損傷的發生率極高，肝病的防治工作刻不容緩。尋找一種較為適合的肝損傷模型是進行肝病防治研究的必要前提，目前常用的肝損傷模型有化學性、免疫性、酒精性還有其他類肝損傷模型。本文將近幾年常用的各種急性肝損傷的動物模型進行綜述，為選擇合適的造模方法提供思路。

【關鍵詞】急性肝損傷;動物模型;方法

【中圖分類號】R575?????? 【文獻標識碼】A ????【文章編號】1004-7484（2019）06-0323-01

化學性肝損傷

四氯化碳（CCl4）。四氯化碳是最常用的致化學性肝損傷的藥物，其特異性高，能夠有效造成肝臟發生脂質過氧化反應。 CCl4進入體內后，能夠在肝藥酶的催化作用下產生自由基，與細胞膜上的大分子物質共價結合，產生脂質過氧化反應，破壞細胞膜的結構和功能。周迎春[1]給小鼠灌胃1% CCl4（0.1 ml/10 g），24h后建立小鼠急性肝損傷模型，該模型重復性好，具有強烈的肝毒性，能使血清中ALT、AST含量迅速升高，是理想的造模藥物。但CCI4揮發性強，可經多途徑傳播吸收，對實驗人員有一定的危害。

對乙酰氨基酚（AP）。AP是目前臨床常常用的解熱鎮痛藥，但長期過量應用，會造成肝損傷疾病。AP在體內代謝產生的N-乙酰對苯醌亞胺（NAPQI）可與肝細胞內生物大分子共價結合，影響蛋白質的正常生理功能。吳洋東等[2]給昆明種系小鼠一次性腹腔注射AP 200mg/kg，40h后造成急性肝損傷模型，AP可造成肝損傷而不會損害其他組織器官，模型重復性好，是常用的肝損傷模型。

D-氨基半乳糖（D-GaIN）。D-氨基半乳糖（D-GaIN）可對肝細胞磷酸尿嘧啶產生干擾，可以損害質膜，形成肝細胞內復合物，消耗尿苷三磷酸，使肝細胞出現炎癥和彌漫性壞死，其病理變化與病毒性肝炎相似。王超等給小鼠一次性腹腔注射10% D-GalN 生理鹽水溶液，劑量為600 mg /kg ， 16h后造成急性肝損傷模型。也可以利用脂多糖聯合D - 氨基半乳糖致急性肝損傷，肝細胞彌漫性壞死后，肝臟對內毒素（LPS）的解毒能力降低，使肝損傷加重。該模型的穩定性好，重復性高，且對實驗人員無危害。但該模型具有不可逆性，且D-氨基半乳糖的價格較為昂貴，限制了其應用。

α- 萘基異硫氰酸酯（ANIT）。ANIT 可引起脂質過氧化，阻塞膽管，使血清中膽紅素升高，導致動物急性黃疸型肝損傷。黃正明等一次性給予大鼠15%ANIT（50 mL/kg）成模。ANIT可導致動物急性黃疸型肝損傷，是研究退黃藥物研究的理想模型。

異煙肼（INH）。異煙肼是臨床上治療結核的一線用藥，大劑量應用可致肝損傷。INH可與肝臟大分子物質共價結合使細胞受損，其代謝產物還誘導自由基產生，發生脂質過氧化反應，從而損害肝細胞。祿保平等經實驗得出，一次性灌胃80mg/Kg異煙肼，18h后可建立小鼠急性肝損傷模型。異煙肼聯合利福平大劑量應用同樣可以造成急性肝損傷。

免疫性肝損傷

刀豆蛋白A（Con A）。Con A是一種T細胞絲裂原，具有較強的嗜肝性，可激活T細胞分泌各種細胞因子，短時間內導致小鼠肝臟被大量中性粒細胞炎性細胞浸潤，導致肝臟損傷。李紅等給小鼠尾靜脈注射劑量為12mg/kg的Con A 8h后造模成功。該模型是最為常用的致免疫性肝損傷模型藥物，且簡便快速，具有較強的特異性。

卡介苗（BCG）聯合脂多糖（LPS）。BCG使致敏T淋巴細胞激活，并在肝臟中大量堆積，LPS進一步激活致敏的巨噬細胞，促使其釋放大量細胞因子，導致肝組織的過氧化損傷[3]。BCG與LPS聯合應用，還會使胞膜通透性改變， 細胞內外離子失衡，從而使肝細胞壞死。陳偉平等人給小鼠尾靜脈注射BCG 5mg/2ml， 12 d后， 尾靜脈注射LPS 7.5g/0.2ml，禁食12h后成模。BCG和LPS 的聯合使用相較于卡介苗以及脂多糖的單獨使用效果明顯，簡便易行且持續時間長久。

酒精性肝損傷

酒精性肝損傷的發生十分常見，乙醇在體內不能儲存，主要由肝臟代謝為乙醛，進而在酶的催化下轉化為乙酸，隨尿液排出體外。當酒精攝入過量時，乙醇和乙醛在體內堆積，抑制三羧酸循環，損傷線粒體。乙醇過量攝入還會使機體產生大量細胞因子和炎癥介質，使枯否細胞解毒能力受到抑制，進而出現內毒素血癥。另外，乙醇導致的肝損傷還與脂質過氧化和氧化應激有關[4]。齊慧慧等給小鼠一次性灌胃50% 乙醇（6g/kg）成功造成急性酒精性肝損傷模型。酒精性肝損傷的發病機制復雜，目前對急性酒精性肝損傷多采用支持治療等輔助治療，還沒有令人滿意的治療藥物和方法，但效果往往不能達到滿意的效果。注意飲食，戒酒才是避免形成急性酒精性肝損傷的根本方法。

其他類肝損傷

其他一些重金屬離子也會造成肝損傷，作用機制大多與氧化應激及脂質過氧化有關。如鎘離子進入體內，消耗GSH，與分子巰基蛋白結合，從而使活性氧化物增多，引發脂質過氧化反應。吳永琴等給予小鼠 4mg/kg CdCl2，18小時后成功建立急性肝損傷模型。此模型主要用于治療重金屬導致的肝損傷藥物的篩選。

討論：急性肝損傷的造模方法多種，已經取得巨大進展，然而要選擇一種較為合適的模型卻并不容易，因為肝損傷疾病的病理機制尚未完全闡明，且還有許多未知的藥物作用靶點，所以，急性肝損傷模型還需更加深入研究。

參考文獻：

[1]周迎春.四氯化碳誘導的小鼠急性肝損傷模型的實驗研究[J].黑龍江中醫藥.2018，47（1）：90-91.

[2]吳洋東，虞滌霞，劉紅艷，高瀟，程勇衛，段瑞嫻，郭燕，唐望先.肝泰膠囊保護對乙酰氨基酚所致急性肝損傷實驗研究[J].中國藥師雜志.2008，11（6）：628-630.

[3]邱英鋒，繆曉輝，蔡雄，王俊學，張瑞祺，倪武.卡介苗加脂多糖建立的大鼠急性免疫性肝損傷模型的研究[J].西北國防醫學雜志.2004，25：345-347.

[4]安紅姬.酒精所致肝損傷作用機制的研究進展[J].中國藥物經濟學.2013，（9）：526-527.