糞便鈣衛蛋白對兒童潰瘍性結腸炎診斷和治療的指導作用

秦臻，吳成，陳苗苗

(安徽省兒童醫院，合肥 230000)

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糞便鈣衛蛋白對兒童潰瘍性結腸炎診斷和治療的指導作用

秦臻，吳成，陳苗苗

(安徽省兒童醫院，合肥 230000)

摘要：目的探討糞便鈣衛蛋白對兒童潰瘍性結腸炎(UC)診斷及治療的指導作用。方法選取UC患兒57例(UC組)，單純腹瀉患兒30例(腹瀉組)，健康兒童60例(健康對照組)。留取糞便，采用ELISA法檢測鈣衛蛋白。UC組采用“升階梯”方案(美沙拉嗪無效時加用激素，繼而加用單克隆抗體)治療，比較治療前后糞便鈣衛蛋白變化，分析鈣衛蛋白診斷UC的效能及其與治療的關系。結果UC組、腹瀉組、健康對照組中位糞便鈣衛蛋白分別為307.93、124.95和19.17 μg/g，UC組明顯高于腹瀉組和健康對照組(P均<0.01)，腹瀉組與健康對照組比較無統計學差異(P>0.05)；UC組活動期、緩解期患兒中位糞便鈣衛蛋白分別為333.53、273.50 μg/g，P<0.05；ROC曲線分析顯示糞便鈣衛蛋白升高的臨界值為175.53 μg/g，對應診斷UC的最佳靈敏度和特異度分別為77.2%和87.9%。UC組治療后活動期患兒中位糞便鈣衛蛋白明顯下降；中位糞便鈣衛蛋白≥307.93 μg/g者激素使用率、用藥時間長于<307.93 μg/g者(P均<0.05)。結論糞便鈣衛蛋白診斷兒童UC準確、無創、安全，有助于臨床選擇治療藥物及判斷治療效果。

關鍵詞：糞便鈣衛蛋白；兒童；潰瘍性結腸炎；診斷

潰瘍性結腸炎(UC)是一種與免疫、炎癥、遺傳、環境多種因素相關的炎癥性腸病， 20~40歲為高發人群。兒童雖不是UC的高發人群，但是多項研究證實，UC發病年齡越早、患兒預后越差，癌變幾率越高，且治療效果不佳[1~7]。腸鏡檢查為UC的主要診斷手段，但其為有創檢查，操作難度大，部分患兒家長拒絕接受，導致兒童UC確診困難。鈣衛蛋白是一種來源于中性粒細胞和巨噬細胞的含鈣蛋白，具有極強的穩定性，其作為炎癥反應標記物主要用于評估機體炎癥反應程度。本研究探討糞便鈣衛蛋白對兒童UC診斷及治療的指導作用。

1資料與方法

1.1臨床資料研究對象為2011年5月~2014年12月我院收治的UC患兒57例(UC組)，其中男33例、女24例，年齡8~14(10.4±1.5)歲，均符合我國炎癥性腸病診治規范的共識意見[4]；活動期32例、緩解期25例。排除標準：①合并其他消化系統器質性疾病者；②合并嚴重肝腎功能不全者；③近期服用非甾體類抗炎藥物者。采取UC“升階梯”方案治療，即美沙拉嗪無效時加用激素，繼而加用單克隆抗體；療程8~24周。選取同期因腹瀉就診而腸鏡未見明顯病變的患兒30例(腹瀉組)男17例，女13例，年齡9~14(10.8±1.7)歲；健康兒童60例作為健康對照組，男30例，女30例，年齡6~13(10.5±1.6)歲。三組性別、年齡具有可比性。

1.2糞便鈣衛蛋白檢測三組均留取糞便標本5~10 g，2 h內送至醫院，置于-20 ℃冰箱保存。按照糞便重量(1 g)：萃取液容積(49 mL)的比例加入萃取液，充分震蕩混勻后提取混懸液2 mL，高速離心10 min后再次提取上清液1 mL，置于-20 ℃冰箱待檢。上述操作于標本留取后72 h內完成。 采用ELISA法檢測糞便鈣衛蛋白，試劑盒購自北京海瑞翔天生物制劑有限公司，酶標儀設置為405 nm進行吸光度(A) 測定。標準液包括7個濃度，最高濃度標準液的A值為1.2～1.5。計算標準曲線和標本鈣衛蛋白濃度。分析糞便鈣衛蛋白診斷UC的效能，UC組治療前后糞便鈣衛蛋白及其與治療的關系。

1.3統計學方法采用SPSS15.0統計軟件。不符合正態分布的計量資料以中位數(四分位數間距)表示，采取Kruskal-Wallis秩和檢驗，兩兩比較采取SNK-q檢驗，計數資料比較采取χ2檢驗。鈣衛蛋白的診斷價值由ROC曲線完成。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1三組糞便鈣衛蛋白水平比較UC組、腹瀉組、健康對照組中位糞便鈣衛蛋白分別為307.93 μg/g(183.3 μg/g，458.58 μg/g)、124.95 μg/g(86.81 μg/g，303.75 μg/g)和19.17 μg/g(14.17 μg/g，29.88 μg/g)，UC組明顯高于腹瀉組和健康對照組(P均<0.01)，而腹瀉組與健康對照組比較無統計學差異(P>0.05)。32例活動期患兒鈣衛蛋白為333.53 μg/g(245.04 μg/g，507.58 μg/g)，緩解期患兒為273.50 μg/g(113.16 μg/g，374.53 μg/g)，活動期明顯高于緩解期(Z=-2.332，P=0.02)。

2.2糞便鈣衛蛋白診斷UC的效能以UC為準劃定ROC曲線，結果顯示，曲線下面積(AUC)為0.895(0.845，0.945)，位于0.7~0.9之間，認為糞便鈣衛蛋白診斷UC達到“準確”的標準(P<0.01)。選取曲線中youden指數(靈敏度+特異度-1)對應的點作為糞便鈣衛蛋白升高的臨界值，結果顯示，糞便鈣衛蛋白升高的臨界值為175.53 μg/g，對應診斷UC的最佳靈敏度和特異度分別為77.2%和87.9%。見圖1。

圖1　糞便鈣衛蛋白診斷UC的ROC曲線

2.3UC組治療前后糞便鈣衛蛋白變化及其與治療的關系治療后UC組活動期患兒糞便鈣衛蛋白降至256.87 μg/g(135.04 μg/g，429.86 μg/g)，明顯低于治療前(P<0.05)，與緩解期患兒比較無明顯差異(P>0.05)；活動期患兒糞便鈣衛蛋白≥307.93 μg/g與<307.93 μg/g者激素使用率分別為75.86%、50.00%，用藥時間分別為(13.8±1.2)、(8.6±0.9)周；二者比較，P均<0.05。

3討論

鈣衛蛋白是來源于中性粒細胞和巨噬細胞的主要蛋白質，由兩條重鏈14和一條輕鏈8非共價結合形成的異二聚體，具有較強的抗熱性和抗蛋白酶活性，不被細菌和溶菌酶分解，體外存在時間長，穩定性強，是急性炎癥活化的良好標記物[8]。腸黏膜炎癥變化時大量中性粒細胞聚集，故檢測中性粒細胞相關蛋白有助于確定診斷。

國內外研究顯示，糞便鈣衛蛋白和腸黏膜鈣衛蛋白表達呈正相關性，兩者在UC患者中明顯升高[9~12]。但上述研究均集中在成人UC患者，且糞便鈣衛蛋白對UC治療的指導價值尚未得知。本研究結果顯示，UC患兒中位糞便鈣衛蛋白明顯高于腹瀉組和健康對照組，與國內外相關研究的報道差異不大，糞便鈣衛蛋白升高考慮與UC腸黏膜中性粒細胞聚集有關，進一步證實UC患者高炎癥反應的特點。本研究AUC為0.895(0.845，0.945)，證實糞便鈣衛蛋白診斷UC較為準確。

當前國內外普遍認同UC“升階梯”治療方案，即抗炎藥物作為基礎治療，無效時加用激素，當激素耐藥或無效時再加用單克隆抗體類藥物。本研究結果顯示，UC組活動期患兒給予美沙拉嗪、激素等藥物治療后，鈣衛蛋白明顯下降，與緩解期患兒無明顯差異，說明治療后腸道內炎癥病變程度下降，總體趨于好轉。但是57例UC患兒的治療方案并不相同，用藥時間也有差異。我們發現，糞便鈣衛蛋白≥307.93 μg/g的UC患兒激素使用率高，使用時間長，提示糞便鈣衛蛋白≥307.93 μg/g者治療難度較大，單用美沙拉秦常無法獲得滿意療效，臨床對此類患兒應及早使用激素甚至單克隆抗體，并延長治療時間，以確保療效。

總之，糞便鈣衛蛋白是一種無創、安全的檢測方法，具有無創、可重復測定等優點，對于診斷兒童UC有一定準確性，也可用于指導治療。

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(收稿日期：2015-07-12)

中圖分類號：R574.62；R446.6

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)04-0059-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.04.022