MGMT VEGF在腦膠質瘤中的表達及臨床意義分析

徐紅超　陶靜莉　許成杰　方　琦

廣東醫學院附屬醫院神經外科　廣州　524001

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MGMT VEGF在腦膠質瘤中的表達及臨床意義分析

徐紅超陶靜莉許成杰方琦

廣東醫學院附屬醫院神經外科廣州524001

【摘要】目的分析MGMT、VEGF在腦膠質瘤中的表達及臨床意義。方法270例腦膠質瘤患者為腫瘤組，行顱腦外傷手術治療的250例患者為對照組。取腫瘤組患者腦膠質瘤標本及對照組正常腦組織標本，檢測MGMT、VEGF的陽性表達率。同時，統計并對比分析腫瘤組患者不同病理分級、腫瘤類型生存質量及預后下MGMT和VEGF的陽性表達率。結果腫瘤組患者MGMT和VEGF的陽性表達率依次為68.52%、77.78%，對照組依次為12%、28%，2組比較差異具有統計學意義(P<0.05)。腫瘤組患者在MGMT和VEGF的陽性表達率上，高級別膠質瘤組患者高于低級別膠質瘤組(P<0.05)；KPS≤70分組患者高于KPS≤70分組(P<0.05)；術后12個月內死亡組患者高于術后12個月后存活組(P<0.05)。而不同類型膠質瘤組患者中，MGMT和VEGF的陽性表達率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。結論MGMT、VEGF的表達與腦膠質瘤的發生、發展密切相關，可作為腦膠質瘤治療效果評價、病情判斷及生存質量、預后評估的重要參考依據。

【關鍵詞】腦膠質瘤；MGMT；VEGF

腦膠質瘤是顱內最常見的惡性腫瘤類型，占40%～60%，因具有侵襲性生長、無控性增值等特點而成為人類腫瘤死亡的重要原因[1]。近年來，盡管在手術聯合放化療等綜合治療措施下，腦膠質瘤患者的預后仍未得到明顯的改善。而隨著臨床腫瘤醫學對腫瘤疾病發病機制研究的不斷深入以及分子生物學研究的顯著進展，一些新型細胞因子及生物標志物的不斷研發，為腫瘤疾病的治療及預后評估提供了新的參考依據。據相關研究報道指出，DNA修復酶——O(6)-甲基鳥嘌呤- DNA甲基轉移酶(MGMT)與膠質瘤的發生密切相關，且在膠質瘤組織中的陽性表達是造成腫瘤耐藥性升高的重要原因[2]。因此，該指標可能是預測腫瘤治療效果及患者預后的重要參考指標。血管內皮生長因子(VEGF)則在腫瘤疾病的發生、發展中機制中發揮了重要的參與作用，同樣是評估腫瘤患者病情及預后的有效指標。本文主要探討MGMT、VEGF在腦膠質瘤中的表達及臨床意義，以期為該病的治療、病情及預后評估提供參考依據。

1資料和方法

1.1臨床資料選擇我院2010-01-2013-10收治的270例腦膠質瘤患者為腫瘤組，所有患者均經手術病理確診。男160例，女110例；年齡30～75歲，平均(53.5±6.2)歲；WHO病理分級Ⅰ級30例，Ⅱ級80例，Ⅲ級100例，Ⅳ級60例；腫瘤類型：星形細胞瘤110例，少枝膠質細胞瘤80例，少枝星形細胞瘤50例，多形性膠質母細胞瘤30例。另選擇于我院行顱腦外傷手術治療的250例患者為對照組，男150例，女100例；年齡30～75歲，平均(54.7±5.8)歲。所有研究對象均自愿簽署倫理學知情同意書。2組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2方法(1)主要儀器及試劑：主要儀器：石蠟切片機，石蠟自動脫水機，光學顯微鏡及其成像系統，烤箱，孵箱；主要試劑：濃縮型鼠抗人MGMT單克隆抗體，兔抗人VEGF單克隆抗體，通用型SP廣譜試劑盒，PBS緩沖溶液，DAB顯色試劑盒。(2)標本采集：腫瘤組患者組織標本為手術切除的腦膠質瘤標本，對照組患者組織標本為顱腦外傷手術切除的正常腦組織標本。(3)MGMT、VEGF表達檢測：MGMT、VEGF表達的檢測采用免疫組織化學染色法。首先，腫瘤組患者腫瘤組織和對照組正常腦組織切除后，采用10%中性甲醛組織將標本用固定，常規石蠟包埋。4 μm切片連續5張，烘烤、脫蠟、脫水后，放置于枸櫞酸鹽緩沖液中予以組織抗原修復，PBS沖洗3次。滴加一抗，孵育過夜；再滴加二抗，3%雙氧水室溫孵育。再次予以PBS沖洗3次，每張切片予以DAB顯色液滴加，蘇木精對比復染，酒精脫水，二甲苯透明，中性樹脂封固。用PBS液代替一抗作為陰性對照，采用結腸癌的組織切片作陽性對照。

1.3免疫組化染色結果判定標準MGMT以光學顯微鏡下細胞漿或細胞核呈棕褐色為陽性細胞判斷標準，VEGF以細胞質呈棕黃色為陽性細胞判斷標準。參照Krajewska法進行半定量分析：高倍鏡(×400)下隨機抽取5個視野進行陽性細胞計數，計算陽性細胞率，并予以分級：0級：比率<5%；1級：比率5%～25%；2級：比率25%～50%；3級：比率50%～75%；4級：比率>75%。然后，染色強度評價標準：陰性：0級；1級：弱陽性；2級：陽性；3級：強陽性。最后，以陽性細胞率級別×軟色強度級別/2≥0.5判斷MGMT及VEGF為陽性表達[3]。

1.4觀察指標

1.4.12組患者腦組織標本MGMT和VEGF的陽性表達率：根據檢測結果，統計2組患者腦組織標本MGMT和VEGF的陽性表達率。

1.4.2腫瘤組患者不同病理分級及腫瘤類型下MGMT和VEGF的陽性表達率：根據腫瘤組270例患者的WHO病理分級及腫瘤類型，統計不同病理分級及腫瘤類型下MGMT和VEGF的陽性表達率。

1.4.3腫瘤組患者不同生存質量及預后下MGMT和VEGF的陽性表達率：術后觀察隨訪12個月，采用生存質量評分量表(KPS)進行評分。KPS>70分，提示患者可正常生活；KPS≤70分，提示患者缺乏正常生活能力。同時，觀察術后12個月后患者的預后情況。統計不同生存質量及預后下MGMT和VEGF的陽性表達率。

1.5統計學方法采用SPSS 20.0統計軟件，計數檢測數據以率的形式表示，2組間比較采用用χ2檢驗，多組間比較采用卡方檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.12組患者腦組織標本MGMT和VEGF的陽性表達率比較腫瘤組患者MGMT和VEGF的陽性表達率依次為68.52%(185例)、77.78%(210例)，對照組依次為12%(30例)、28%(70例)，2組比較差異具有統計學意義(P<0.05)。

2.2腫瘤組患者不同病理分級、腫瘤類型生存質量及預后下MGMT和VEGF的陽性表達率比較表1可以看出，在MGMT和VEGF的陽性表達率上，高級別膠質瘤組患者高于低級別膠質瘤組(P<0.05)；KPS≤70分組患者高于KPS≤70分組(P<0.05)；術后12個月內死亡組患者高于術后12個月后存活組(P<0.05)。而不同類型膠質瘤組患者中，MGMT和VEGF的陽性表達率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。

表1　腫瘤組患者不同病理分級、腫瘤類型生存質量及

3討論

3.1MGMT在腦膠質瘤中的表達及臨床意義目前，烷化劑類化療藥物是腦膠質瘤臨床治療的有效藥物之一，尤其是替莫唑胺，作為一種新型烷化劑，能夠在體內經代謝與DNA鳥嘌呤形成六氧-甲基鳥嘌呤(O6-MeG)，造成DNA蓄積性損傷，最終導致腫瘤細胞死亡而發揮抗腫瘤作用，為NCCN指南所推薦的治療膠質瘤的一線化療藥物[4]。而MGMT為一種獨特的DNA修復酶，在DNA的損傷修復中發揮著獨特的作用。據相關臨床研究報道證實，因MGMT在腫瘤細胞的中過表達，可將細胞DNA上的O6-MeG移去，對腫瘤細胞起到保護作用而免受烷化劑的損害，進而導致腫瘤細胞對替莫唑胺產生耐藥，成為制約膠質瘤化療治療效果的重要因素[5]。本研究中，腫瘤組患者MGMT的陽性表達率高于對照組，與文獻報道一致[6]。提示MGMT可能在腦膠質瘤的發生機制中發揮了重要的作用，而這一具體作用機制尚需進一步研究。同時，本研究結果顯示，在MGMT的陽性表達率上，高級別膠質瘤組患者高于低級別膠質瘤組，KPS≤70分組患者高于KPS≤70分組，術后12個月內死亡組患者高于術后12個月后存活組。提示MGMT的陽性表達與腦膠質瘤的病理分級、生存質量及預后密切相關，可作為患者臨床治療效果評價、病情判斷及預后評估的重要參考依據[7]。

3.2VEGF在腦膠質瘤中的表達及臨床意義VEGF作為最重要的血管生長刺激因子，通過增加微血管通透性，能夠促進血管內皮細胞增殖，進而為腫瘤組織的生長提供養分，在腫瘤的發生、發展中發揮著重要的促進作用[8]。本研究中，腫瘤組患者VEGF的陽性表達率高于對照組，與文獻報道結果一致[9]。同時，在VEGF的陽性表達率上，高級別膠質瘤組患者高于低級別膠質瘤組，KPS≤70分組患者高于KPS≤70分組，術后12個月內死亡組患者高于術后12個月后存活組。表明VEGF的表達與腦膠質瘤的發展及預后密切相關，VEGF的高表達反映了腦膠質瘤不良的生物學行為，陽性表達率越高，提示腦膠質瘤侵襲性強、破壞性大，患者病情越嚴重，預后越差，可為患者病情的判斷及預后的評估提供指導意義。

綜上，MGMT、VEGF的表達與腦膠質瘤的發生、發展密切相關，可作為腦膠質瘤治療效果評價、病情判斷及生存質量、預后評估的重要參考依據。

4參考文獻

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(收稿2015-03-12)

【中圖分類號】R739.4

【文獻標識碼】A

【文章編號】1673-5110(2016)02-0041-03