CK、Tubulin-β及PCNA與鼻咽癌放療后復發與轉移的相關性研究

劉　洋　劉　碩　孫建軍

作者單位:100048 中國人民解放軍海軍總醫院

CK、Tubulin-β及PCNA與鼻咽癌放療后復發與轉移的相關性研究

劉洋劉碩孫建軍

作者單位:100048 中國人民解放軍海軍總醫院

【摘要】目的探析CK、Tubulin-β及PCNA與鼻咽癌放療后復發與轉移的相關性。方法采用裸鼠體內移植瘤法。根據治療方式的不同將裸鼠分成放射組與未放射組兩組，分別用10只裸鼠接種每組S1、F1細胞。分析鼻咽癌細胞F1、S1放療前、后的細胞形態、體內增殖及轉移能力。結果鼻咽癌及放療后復發組織中CK、Tubulin-β及PCNA水平與臨床分期、頸部淋巴結轉移、年齡及性別無關。放療后復發組織中CK與Tubulin-β及PCNA表達則表現為正相關性(P<0.05)。兩組均未發生肺轉移，比較放療后兩組F1、S1裸鼠移植瘤瘤體質量，放射組均較未放射組低，且有統計學差異(P<0.05)。放療后PCNA、CK的表達水平，S1裸鼠移植瘤明顯比F1高(P<0.05)。結論鼻咽癌放療后的復發過程中CK、Tubulin-β的水平與細胞增殖密切相關，但不是鼻咽癌放療后復發的獨立預測指標。

【關鍵詞】鼻咽癌；細胞角蛋白；微管蛋白；增殖細胞核抗原

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:056～058)

鼻咽癌起源于人體鼻咽部的鱗狀上皮，鼻咽癌多發于我國南方，病發后臨床主要選擇放射治療，但是放療后生存率亦低，多數患者死于遠處轉移或局部復發[1-2]。因其早期癥狀較輕，且部位隱匿，漏診誤診率高。近幾年來，其發病率不斷呈上升趨勢，嚴重威脅人類生命安全。細胞骨架是腫瘤細胞參與多種細胞反應最初的靶結構，鼻咽癌放射敏感異質性機制除可能與不同亞克隆細胞結構有關[3-4]。本組研究通過實驗檢測鼻咽癌及放射治療后復發癌組織中細胞角蛋白(簡稱CK)、微管蛋白(簡稱Tubulin-β)及增殖細胞核抗原(簡稱PCNA)關系，旨在探析鼻咽癌放療后轉移和復發的可能機制。

1材料與方法

1.1　臨床資料

選取2010年6月至2013年2月在中國人民解放軍海軍總醫院接受治療的54例鼻咽癌住院患者。其中男性34例，女性20例，年齡29～79歲，平均年齡46歲。全部病例均為首次診斷，相關病例資料都較為完整，且就診前均無抗癌治療史，其中50例在放療后復發的鼻咽癌患者僅有過放射治療史。

1.2　方法

裸鼠體內移植瘤法。根據治療方式的不同分成放射組與未放射組兩組，分別用10只裸鼠接種每組S1、F1細胞。分析鼻咽癌細胞F1、S1放療前、后的細胞形態、體內增殖及轉移能力。分別測量兩組瘤體體積變化，接種后25 d后將未放射組裸鼠處死，放射組則先給予單次照射、回籠飼養，再于接種后46 d處死裸鼠。對處死后的裸鼠進行全面解剖，然后按照順序分別將淋巴結(肉眼可見)、肺臟以及皮下移植瘤取出，將瘤體剝離，記錄瘤體重量，對腫瘤轉移及生長情況進行詳細觀察。

1.3　統計學方法

2結果

54例鼻咽癌組織中細胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖細胞核抗原(PCNA)陽性表達率分別為63.0%、74.1%、79.6%。放療后復發的鼻咽癌組織中CK、Tubulin-β及PCNA的陽性表達率分別是72.0%，82.0%、98.0%。放療后復發的鼻咽癌組織中PCNA陽性表達率明顯比鼻咽癌組高(P<0.05)，CK、Tubulin-β則無顯著差異(P>0.05)，見表1。

表1　鼻咽癌組與放療后復發的鼻咽癌組織中CK、Tubulin-β

S1、F1裸鼠移植瘤中細胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖細胞核抗原(PCNA)的表達，細胞角蛋白、微管蛋白表達于細胞膜或細胞質，增殖細胞核抗原則表達于細胞核。CK、Tubulin-β表達水平放療后S1與F1裸鼠淋巴結轉移瘤比較，S1均明顯高于F1，且差異具有統計學意義(P<0.05)。比較放射治療后裸鼠移植瘤S1與F1中CK、PCNA的表達情況，S1均顯著高于F1，且差異具有統計學意義(P<0.05)。未放射組S1與F1中CK、Tubulin-β及PCNA表達水平比較無顯著差異(P>0.05)(表2)。

表2　放射前后S1、F1中CK、Tubulin-β及PCNA的

注：FIN表示未放射組F1裸鼠淋巴結轉移瘤；SLN表示未放射組S1裸鼠淋巴結轉移瘤。

3　討論

鼻咽癌是1種頭頸部惡性腫瘤，我國華南地區較為多見。鼻咽癌患者放療后出現遠處轉移或復發的幾率較高，主要是鼻咽癌具有放射敏感性[5]。S1細胞在顯微鏡透視下有大量微管和微絲、少量而嵴小的線粒體呈現，考慮S1細胞的低放射敏感度以及慢增殖可能是由上述原因所致。本研究通過對S1、F1細胞中細胞角蛋白(簡稱CK)、微管蛋白(簡稱Tubulin-β)及增殖細胞核抗原(簡稱PCNA)水平的檢測，研究放射放療后鼻咽癌患者復發的影響因素，給提高治療鼻咽癌患者的療效提供一定的理論依據。

郭立兵等[6]楊芝萍等[7]文獻報道，CK、Tubulin-β的表達水平與鼻咽癌患者頸部的淋巴結轉移、臨床分期、年齡及性別等因素的關系不明顯。本研究結果提示CK、Tubulin-β作為細胞反應的靶結構，參與了輻射致使的細胞變化的活動，但是還無法作為鼻咽癌患者放射敏感度以及轉移的一項獨立判斷指標。

熊暉等[8]彭濤等[9]文獻報道，細胞一旦接觸射線，CK與Tubulin-β表達會異常，同時細胞表型也會因此而發生變化，其如轉移這樣的惡性特征會增強，并會改變細胞表型使其惡性特征如轉移增強，放射治療后S1較高的轉移率與CK與Tubulin-β的高表達可能存在一定的聯系。宦佳樂等[10]文獻報道中則指出，放射治療后轉移率較高可能與細胞角蛋白和微管蛋白高表達有著一定關系。本組研究結果，比較CK、Tubulin-β在放射治療后S1與F1裸鼠淋巴結轉移瘤，S1均明顯高于F1(P<0.05)。對裸鼠移植瘤放射治療后S1與F1中CK、PCNA表達的比較發現，S1均顯著高于F1，且差異性明顯，因而具有統計學意義標準(P<0.05)。與上述文獻報道一致。此外，本研究還發現鼻咽癌組放療后，其癌細胞核異型性沒有復發組明顯，說明鼻咽癌存在放射抗性的患者經放療后增殖能力依然良好，鼻咽癌患者放療后轉移及復發可能基于放療后活躍的細胞增殖活動。

綜上所述，鼻咽癌放療后的復發過程中CK、Tubulin-β與細胞增殖密切相關，但不是鼻咽癌放療后復發的獨立預測指標。

參考文獻

[1]Ma Liqin hole Xiangquan.Jin Sheng Hong,et al.Effect of different age groups and long-term effect of radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma factors 〔J〕.Journal of Clinical Oncology,2007,18 (8):595-597.

[2]袁健,孫寧,王麗京,等.鼻咽癌放射敏感性異質性的形態學差異觀察〔J〕.實用腫瘤雜志,2007,22(4):304-307.

[3]潘建基,張瑜,林少俊,等.1706例鼻咽癌放療遠期療效分析〔J〕.中華放射腫瘤學雜志,2008,17(4):247-251.

[4]龍鎮,謝民強,張濤,等.改性載順鉑磁性納米藥物聯合放療靶向治療鼻咽癌裸鼠移植瘤的研究〔J〕.南方醫科大學學報,2009,9(4):445-447.

[5]Mo Yuzhen.Zhu Xiaodong.60Co segmentation irradiation were observed on growth of human nasopharyngeal carcinoma cell 〔J〕.Chinese Journal of oncology,2009,16 (24):90-92.

[6]郭立兵,石衛民,宋維舒,等.老年鼻咽癌組織增殖細胞核抗原、血管內皮細胞表達與PET/CT顯像FDG攝取的相關性〔J〕.中國老年學雜志,2012,18(7):32-34.

[7]楊芝萍,杜月光,謝永紅,等.人重組血管內皮抑素聯合放療對鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤抑制及其機制的探討〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2012,19(4):662-665.

[8]熊暉,孫寧,姚運紅,等.CK、Tubulin-β和PCNA在鼻咽癌放療后復發組織中的表達及意義〔J〕.腫瘤防治研究,2012,39(2):125-126.

[9]彭濤,袁玉林,張岑,等.輻射致鼻咽癌細胞株cdk1和survivin表達與細胞增殖時相轉換的關系〔J〕.解剖學雜志,2014,37(1):95-97.

[10]宦佳樂,邢鵬飛,徐瑩瑩,等.頸淋巴結陰性鼻咽癌放療范圍的選擇:一個基于薈萃分析的結果〔J〕.中華放射醫學與防護雜志,2014,34(4):778-781.

(編輯：吳小紅)

(編輯：吳小紅)

Correlation of CK,Tubulin-beta,PCNA and Recurrence and Transfer of Nasopharyngeal Carcinoma Patients after Radiotherapy

LIUYang,LIUShuo,SUNJianjun.NavyGeneralHospitalofPLA,Beijing,100048

【Abstract】ObjectiveTo study the correlation of CK,Tubulin-beta,proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and recurrence and transfer of nasopharyngeal carcinoma patients after radiotherapy.MethodsThe method of implanted tumor in nude mice was adopted in this experiment,and were divided into radiation group and non-radiation group.10 mice were vaccinate against F1,S1 cells of each group.The cellular morphology,proliferation in vivo and transfer ability of nasopharyngeal carcinoma cells F1,S1 before and after radiotherapy were analyzed.ResultsThe levels of CK,Tubulin-beta and PCNA in nasopharyngeal carcinoma and the recurrence tissue after radiotherapy had no correlation with clinical stage,age and sex,cervical lymph node metastasis.The CK had positive correlation with the expressions of Tubulin-beta and PCNA in the recurrence tissue (P<0.05).The 2 groups had no lung metastasis after radiotherapy,the transplanted tumor of body mass of F1,S1 in nude mice were compared,the mass in the radiation group were all lighter than those of non-irradiated group,and the differences had statistical significance (P<0.05 standard).The levels of PCNA,CK in S1 xenografts in nude mice were higher than those in F1 transplantation tumor in nude mice after radiotherapy (P<0.05).ConclusionThe levels of CK,Tubulin-beta during the recurrence of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy has close correlation with cell proliferation,but they are not the independent predictor of recurrence after radiotherapy of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】Nasopharyngeal carcinoma;Cytokeratin;Tubulin;Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)

中圖分類號：R739.63

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2016)01-0056-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.01.017

通訊作者：孫建軍

收稿日期(2015-04-15修回日期 2015-05-04) (2015-01-09修回日期 2015-04-29)