基質金屬蛋白酶-9在宮頸癌血清中表達及臨床意義①

吳英杰,李　影

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科，黑龍江 佳木斯 154003)

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基質金屬蛋白酶-9在宮頸癌血清中表達及臨床意義①

吳英杰,李影

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科，黑龍江 佳木斯 154003)

摘要：目的:檢測宮頸鱗癌患者血清中MMP-9表達水平,探討MMP-9與宮頸癌患者相關的臨床意義,為宮頸癌的臨床診斷、監測、治療及其預后的情況提供一定實驗依據。方法：應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測了46例宮頸鱗癌患者、23例宮頸上皮內瘤變患者(CIN)和26例正常健康婦女的血清中MMP-9水平,并進行對照分析。結果：宮頸鱗癌患者的血清當中MMP-9水平明顯高于宮頸上皮內瘤變(CIN)患者及健康婦女(P<0.01),MMP-9水平與患者的臨床分期(P<0.05)、淋巴結轉移有顯著相關(P<0.01),術后血清MMP-9表達水平較術前明顯下降,差異有統計學意義(P<0.05)。結論：通過檢測宮頸癌患者血清MMP-9表達水平，可做為臨床判斷宮頸癌浸潤和轉移可靠指標。對宮頸鱗癌疾病診斷、治療及其預后等提供一定良好的臨床實驗依據。

關鍵詞：宮頸鱗癌；血清；CIN；MMP-9

宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤，其發生率占女性生殖系統惡性腫瘤第一位。近年來我國調查、統計宮頸癌發病率有所增高，目前仍在持續上升[1],并呈年輕化趨勢，且年輕患者預后差易復發，每年大約3萬余名婦女死于宮頸癌[2]，對女性的健康及生命了構成嚴重威脅。因此，尋找其生物學行為的指標對臨床診斷、治療具有極其重要意義。MMP-9的異常表達和人類惡性腫瘤的浸潤轉移密切相關[3]。它是降解基底膜和細胞外基質成分的蛋白水解酶，在促進腫瘤血管形成、腫瘤生長及轉移過程中起到主導作用。近年來多數研究都注重MMP-9在宮頸癌組織中的表達水平，但在宮頸癌患者血清中表達情況研究仍較少,本實驗研究宮頸癌患者血清中的MMP-9表達水平，探討血清MMP-9在宮頸癌發病機制，診斷、治療及預后中的關系、分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料

本實驗采集95例女性血清。年齡28~62歲，中位年齡為42歲，其中46例宮頸鱗癌患者(來自佳木斯大學附屬第一醫院婦產科、佳木斯市中心醫院2013-11~2014-12期間的住院患者，通過病理診斷確診宮頸鱗癌)。采用FIGO,2009年的臨床分期：Ⅰ期17例(ⅠA 7例、ⅠB、10例)、Ⅱ期18例(ⅡA 13例、ⅡB 5例)、Ⅲ期11例(ⅢA 8例、ⅢB 3例)。淋巴結轉移：有淋巴結轉移的宮頸癌患者21例、無淋巴結轉移的宮頸癌患者25例。所有ⅠA-ⅡA的患者采用全子宮切除術或廣泛子宮切除術及盆腔淋巴結切除術，ⅡB-ⅢB采用放療。 23例為宮頸上皮內瘤變患者(CIN)，并且都排除了身體其他部位的腫瘤。26例為正常無宮頸疾病非妊娠健康婦女為對照組，肝功能、腎功能正常，均無心、肺、肝、胃、腎等重要器官的疾病，并無腫瘤家族史。所有的被檢者均取得了研究對象的知情同意。

1.2主要試劑及儀器

(1)人MMP-9酶聯免疫試劑盒購于長春廣邁醫療器戒有限公司； (2)TGW16離心機，振蕩器(美國Beekman公司)； (3)全自動酶標儀(美國ThermoEleetron)； (4)-80℃低溫冰箱(佳木斯大學提供)。

1.3試驗方法

采集所有宮頸鱗癌患者46例、宮頸上皮內瘤變23例及健康非妊娠無宮頸疾病婦女對照組26例血清標本。入院后術前各組在未經過任何治療的情況下，清晨空腹采集了外周靜脈血5mL,術后組與術后第7天采集了患者外周靜脈血5mL，3000r/min離心20min，后取上清分別裝于無菌的干燥試管，置于-80℃冰箱儲存備用，采用酶聯免疫吸附實驗 (ELISA) 法檢測MMP-9，操作步驟嚴格按說明書操作。

1.4統計學方法

2　結果

見表1~4。

表1　3組血清中MMP-9表達水平

分 組例數(n)濃度(ng/mL)正常健康對照組2697.98±12.73CIN組23156.92±17.33宮頸癌組46180.27±14.87

注： 宮頸癌-CIN P<0.01; 宮頸癌-正常 P<0.01; CIN-正常 P<0.01; 各組間比較 F=252.556， P<0.01。

臨床分期組間比較， 隨臨床期別增高MMP-9水平增高，各組比較有統計學差異(P<0.05)。

無淋巴轉移組與有淋巴轉移比較，有明顯統計學意義(P<0.01)。

MMP-9在宮頸癌術前和術后及正常健康對照組比較均有顯著差異(P<0.01)。

3　討論

宮頸癌是嚴重危害婦女健康、生命的最常見婦科惡性腫瘤，惡性腫瘤主要表現在侵襲和轉移，它是導致患者死亡的主要原因。現研究從宮頸感染高危型 HPV病毒后經宮頸癌前病變(CIN)、原位癌最終形成浸潤型宮頸鱗癌，是一個多因素、多步驟共同參與的復雜過程,在此過程中癌細胞需要穿透細胞外基質屏障、基底膜以及血管壁進入人體的生存微環境等多個復雜過程[4]。MMP -9是一種明膠酶型基質金屬蛋白酶，,它能降解Ⅳ、Ⅴ型膠原和Ⅰ、Ⅴ型明膠，侵蝕正常組織表面的細胞外基質和基底膜,促使癌細胞沿著破壞的基底膜向周圍組織浸潤，并促進癌細胞轉移[5，7]。此外，MMP-9還參與腫瘤新血管形成，其機制與降解血管基底膜和周圍間質以及VEGF的合成和分泌有密切相關[8]。

江忠清等[9]、杜曉燕等[10]研究證明：MMP-9在宮頸癌組織中的陽性表達促進腫瘤新血管形成，并與臨床分期、盆腔淋巴轉移、組織學分化程度存在相關性。MMP -9在宮頸癌發生、發展及癌細胞擴散及轉移過程中可能起至關重要作用。本研究顯示宮頸癌患者血清中 MMP-9水平較正常健康人和宮頸CIN患者血清中MMP-9水平明顯升高,說明宮頸癌組織具有分泌MMP-9的能力,隨臨床分期增高血清中MMP-9水平升高;有轉移的患者血清中MMP-9水平較無轉移者明顯升高。表明：宮頸癌癌細胞可分泌大量MMP-9進入血環系統,其降解基底膜及細胞外基質,為癌細胞侵襲、轉移過程中突破各種屏障奠定了一定基礎,為癌細胞的浸潤、轉移創造有利的環境。綜合本研究及上述研究結果，血清MMP-9水平與癌組織MMP-9表達一樣可以反映宮頸癌的形成、侵襲和轉移。徐希等[11]研究發現胃癌患者血清中MMP-9 水平顯著高于健康人，其中有淋巴結轉移者顯著高于無淋巴結轉移者，腫瘤浸潤突破漿膜層者顯著高于未突破漿膜層者，晚期胃癌(Ⅲ、Ⅳ) 顯著高于早期胃癌(Ⅰ、Ⅱ期)，MMP-9是值得重視的胃癌監測指標。以上研究與本研究結果相似。

本實驗研究中,在30例行宮頸癌手術的患者中,術后血清中MMP-9表達水平較術前明顯下降,考慮手術祛除了MMP-9宮頸癌細胞分泌源，因此術后MMP-9下降，可見宮頸癌細胞及其引起其它分泌MMP-9在血清中占據一定重要比例，所以,檢測血清中MMP-9水平對預測癌細胞的浸潤、轉移和預后判斷具有重要價值。因此,我們認血清中MMP-9的表達水平能夠反映宮頸癌患者機體腫瘤的負荷狀態,檢測血清中MMP-9的表達水平,對于宮頸癌的診斷治療可能是一個較好的參考指標;能夠為臨床研究提供一定的實驗依據。

參考文獻：

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[10]杜曉燕,孔衛平,張景麗,等.宮頸鱗癌組織中MMP-9和VEGF的表達與微血管密度相關性研究[J].現代中西醫結合雜志，2013, 22(26):2857-2860

[11]徐希，陳偉昌，朱一凡，等.胃癌患者血清MMP-9、NGAL 水平及其臨床意義[J].Chin J Gastroenterol,2014,19(8):468-171

中圖分類號：R737.33

文獻標識碼：B

文章編號：1008-0104(2015)06-0107-02

作者簡介：①吳英杰(1964～)女，黑龍江佳木斯人，學士，主任醫師，碩士研究生導師。

通訊作者：李影(1974～)女，吉林長春人，在讀碩士研究生，E-mail：598872593@qq.com。

(收稿日期：2015-03-09)