深圳市大鵬新區兒童小細胞低色素性貧血流行現狀及病因探討*

招湛靜，徐威力，姚雪淦

(深圳市大鵬新區婦幼保健院檢驗科，廣東深圳 518120)

小細胞低色素性貧血是由于紅細胞中血紅蛋白(hemoglobin，Hb)合成障礙所致Hb、紅細胞平均體積(mean corpuscular volume，MCV)和紅細胞平均血紅蛋白(mean corpuscular hemoglobin，MCV)3個紅細胞指標降低的一類貧血，主要多見于缺鐵乏癥(iron deficiency，ID)和珠蛋白生成障礙性貧血[1]。缺鐵性貧血是由于鐵缺乏導致Hb合成減少，我國7歲以下兒童缺鐵性貧血的患病率為7.85%，其中嬰幼兒為20.5%，高發人群為6～24月的嬰幼兒和青春期兒童，因此缺鐵性貧血是我國重點防治的常見病之一[2]。珠蛋白生成障礙性貧血是一組單基因遺傳性血液病，是由于珠蛋白基因的缺陷使得珠蛋白肽鏈中的一種或幾種合成減少或不能合成，導致血紅蛋白的組成成分改變，我國長江以南各省區是珠蛋白生成障礙性貧血高發地區，同時在珠蛋白生成障礙性貧血高發區還發現了單純性小細胞低色素癥病例。因此，為了了解深圳大鵬和龍華新區兒童發生小細胞低色素性貧血的現狀及原因，我們對本地區2 256兒童進行了相關調查，現將報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 隨機收集2014年9月～2016年1月來院體檢兒童2 256例，年齡3個月～13歲，平均年齡5±7.8歲，其中男性963例，女性1 293例。所有研究對象除部分有貧血表現外均無其它疾病，并告知參與者并簽定同意書；珠蛋白生成障礙性貧血和鐵缺乏癥診斷標準依據文獻[3]。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XN-9000全自動血細胞分析儀、試劑、校準品及質控品均由Sysmex公司提供；Backman DXI800全自動化學發光分析儀、試劑、校準品及質控品均由美國貝克曼公司提供；珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測分析儀及試劑盒均由亞能生物技術(深圳)有限公司提供。

1.3 標本采集 所有研究對象均于清晨空腹用無菌真空采血管采集外周靜脈血2～3 ml于EDTA-K2抗凝管內，各2份，充分混勻；再抽2～3 ml于無抗凝干燥管內，及時送檢。

1.4 方法

1.4.1 血液學指標測定：用Sysmex XN-9000全自動血細胞分析儀檢測紅細胞(RBC)，Hb，MCV及MCH等參數。診斷標準：MCV<80 fl，MCH<28 pg，MCHC<32%；Hb<30 g/L：極重度貧血，Hb 30～60 g/L：重度貧血，Hb 60～90 g/L：中度貧血，Hb>90 g/L：輕度貧血。

1.4.2 鐵代謝指標檢測：采用美國Backman DXI800全自動化學發光分析儀檢測血清鐵和鐵蛋白含量水平。診斷標準：血清鐵<8.95 μmol/L，血清鐵蛋白<14 μg/L。

1.4.3 珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測：α-珠蛋白生成障礙性貧血分析采用單管多重gap-PCR技術檢測3種常見的基因缺失型(--SEA，-α4.2，-α3.7)，采用反向點雜交(reverse dot blot，RDB)法檢測3種常見的突變型α-珠蛋白生成障礙性貧血基因(QSM，CSM和WSM)；β-基因變異用反向點雜交法檢測17種常見突變位點(β0包括Int，CD41/42，CD31，CD14/15，CD17，CD71/72，IVS-I-l，CD43，CD27/28；β+包括IVS-II-654，-28，-29，-30，-32，CAP，IVS-I-5，βE)。

1.5 統計學分析 采用SSPS19.0統計軟件對數據進行相關統計分析，計數資料用百分率(%)，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 小細胞低色素性貧血患病率 2 256例深圳大鵬新區體檢兒童共檢出小細胞低色素性貧血患兒239例，占10.6%(239/2 256)，其中<3歲兒童2.26%(51/2 256)，4～7歲兒童4.43%(100/2 256)和8～13歲兒童為3.90%(88/2 256)，4歲以上兒童小細胞低色素性貧血患病率明顯高于3歲以下的兒童，兩者之間差異有統計學意義(χ2=3.292～4.025，P<0.05)，而4歲以上兒童各年齡段之間小細胞低色素性貧血患病率之間差異無統計學意義(χ2=1.107，P>0.05)。

2.2 不同年齡段兒童貧血程度 239例小細胞低色素性貧血患兒發生輕度貧血者177例，占74.06%；中度貧血者60例，占25.10%；重度貧血者2例，占0.84%；未見極重度貧血患兒，其中2例重度貧血都分布在4歲以上兒童。

2.3 珠蛋白生成障礙性貧血、ID檢出率及珠蛋白生成障礙性貧血并發ID發生率 見表1。239例小細胞低色素性貧血患兒中檢出珠蛋白生成障礙性貧血、ID及珠蛋白生成障礙性貧血并發ID患兒分別為155，139及54例，檢出率分別為64.9%(155/239)，58.2%(139/239)及34.8%(54/155)。

表1 239例小細胞低色素性貧血中珠蛋白生成障礙性貧血、ID及珠蛋白生成障礙性貧血并發ID檢出率[%(n)]

注：#為4～13歲與<3歲組兒童比較；*為4～7歲與8～13歲組兒童比較。

2.4 單純性小細胞低色素癥的珠蛋白生成障礙性貧血發生率 239例小細胞低色素性貧血患兒中檢出32例單純性小細胞低色素癥患兒，占13.4%(32/239)。從這些病例中檢出α-珠蛋白生成障礙性貧血13例(10例雜合子和3例雙重雜合子)、β-珠蛋白生成障礙性貧血 5例均為雜合子及αβ-復合型珠蛋白生成障礙性貧血病例3例。單純性小細胞低色素癥珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率和攜帶率分別為65.6%(21/32)和75.0%(24/32)，α-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率和攜帶率分別為50.0%(16/32)和59.38%(19/32)，β-珠蛋白生成障礙性貧血的檢出率和攜帶率則均為25.0%(8/32)。

2.5 α-和β-珠蛋白生成障礙性貧血基因型突變率 239例患兒中共檢出6種不同的α-珠蛋白生成障礙性貧血突變，包括3種缺失型(--SEA，-α4.2，-α3.7) 和3種非缺失型(QSM，CSM和WSM)，共13種基因型總計113例，α-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率為47.28%(113/239)；檢出9種不同的β-珠蛋白生成障礙性貧血突變共12種基因型總計70例，β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率為29.3%(70/239)，結果見表2，3。

表2 113例α-珠蛋白生成障礙性貧血患兒檢出常見基因型及基因突變頻率(%)

表3 70例β-珠蛋白生成障礙性貧血患兒檢出常見基因型及基因突變頻率(%)

3 討論

小細胞低色素性貧血是一大類貧血的總稱，主要見于珠蛋白生成障礙性貧血和缺鐵性貧血(iron deficiency anemia，IDA)。珠蛋白生成障礙性貧血多數患者存在體內鐵負荷過重，是世界上最為常見的遺傳性溶血性疾病，重型珠蛋白生成障礙性貧血，目前尚無有效的根治措施，常需終生定期輸血和規范的去鐵治療；鐵缺乏嚴重危害兒童身體健康，對人體內多個系統功能產生深遠影響，對嬰兒認知功能和行為發育有較長期且不可逆的損害，可延續影響到兒童期，且鐵劑治療也不能完全恢復損害的認知行為，長時間或嚴重的貧血可對兒童腦發育產生不可逆的損害[4，5]，對患兒和家屬均有極大的負擔，影響生活質量。因此，加強各地兒童小細胞低色素性貧血現狀調查，并闡明小細胞低色素性貧血發生的原因則是一項十分有意義的基礎工作，對優生優育有重要意義。

兒童小細胞低色素性貧血發病率與不同地區地質環境、人員結構及生活習慣等因素有著密切關系，深圳大鵬新區是一個多移民區，外來人員占本地人口90%以上，人員結構復雜。本文研究結果顯示，本區兒童小細胞低色素性貧血發病率高達10.6%，說明了該區兒童小細胞低色素性貧血發病率有較高的水平，應引起當地政府和衛生行政部門注意和重視，其中以4～7歲兒童最為明顯(4.43%)，這可能與這個年齡段的兒童在飲食方面比較偏食有關。

小細胞低色素性貧血會導致患兒不同程度貧血，從而影響兒童生長發育。本研究結果顯示，大鵬新區小細胞低色素性貧血患兒以輕度貧血為主，占74.06%，重度貧血均見于4歲以上兒童，未見極重度貧血患兒，這可能與小細胞低色素性貧血的發生和逐步進展過程有關。因此，要加強早發現、早干預和及時治療，阻止病情的進一步發展。

IDA是小兒的常見病，也是小細胞低色素性貧血最常見的病因[5]，而本研究結果顯示，深圳大鵬新區小細胞低色素性貧血患兒中珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率達64.9%，雖低于有關文獻[6，7]報道海南地區的73.4%和76.75%，而小細胞低色素性貧血患兒中ID檢出率為58.2%(139/239)，略高于夏威夷等[2]報道的54.21%，明顯高于文獻[8～9]報道的31.7%～43.66%，并且本研究中檢出α-復合β-珠蛋白生成障礙性貧血28例，檢出率為11.7%，遠高于國內其他省份，另外單純性小細胞低色素癥患兒中珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率為65.6%和總攜帶率為75.0%。由此可見，珠蛋白生成障礙性貧血是引起該區兒童小細胞低色素性貧血最主要的原因。

珠蛋白生成障礙性貧血患兒體內鐵負荷情況會嚴重影響其生存質量，鐵負荷過重會導致肺含鐵血黃素沉著癥、血色病及心功能異常，而鐵不足又會加重IDA的癥狀。若將珠蛋白生成障礙性貧血誤診為IDA，一方面降低了珠蛋白生成障礙性貧血的檢出率，另一方面，若補充鐵劑，還會加重鐵對機體的損害，同時也帶來不必要的經濟負擔。若將IDA誤診為珠蛋白生成障礙性貧血，無相應的鐵補充，長期的鐵缺乏會對患者的認知行為和行為發育造成不可逆的損害。本研究結果顯示，本區珠蛋白生成障礙性貧血并發ID患兒有較高的發病率，占34.8%(54/155)，略低于夏威夷等[2]報道的37.61%，但明顯高于李哲等[9]報導的24.53%。因此，對于確診珠蛋白生成障礙性貧血患兒，應該進一步檢查鐵代謝指標，必要時做骨髓鐵染色以排除IDA，而在珠蛋白生成障礙性貧血高發區，對診斷為IDA的患兒，要進一步檢查珠蛋白生成障礙性貧血，以確定是否并發珠蛋白生成障礙性貧血。

通過分析深圳大鵬新區兒童小細胞低色素性貧血基因突變類型與頻率發現，α-珠蛋白生成障礙性貧血基因缺陷類型主要為--SEA/αα，-α3.7/αα及-α4.2/αα，占93.8%；β-珠蛋白生成障礙性貧血基因缺陷類型主要為CD41/42，CD17，IVS-II-654及-28，占84.2%，與有關文獻報道[10～12]相一致，但基因缺陷率及常見類型與相關文獻報道均不一致，這可能與不同地區和民族的珠蛋白生成障礙性貧血基因遺傳背景有關。因此，建議不同地區要對兒童小細胞低色素性貧血人群進行貧血基因普查，了解當地的基因缺陷率及類型，對預防和干預性治療提供依據。

綜以上述，深圳大鵬新區兒童小細胞低色素性貧血有較高的發病率，珠蛋白生成障礙性貧血是引起該區兒童小細胞低色素性貧血最主要的原因，其次為ID。由于珠蛋白生成障礙性貧血和ID的病因、治療和愈后以及遺傳與否完全不同，因此，我們所得出的研究結論對于臨床優生優育工作和指導臨床用藥等均具有重要的優生學意義和臨床實用價值。

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