靜脈竇血栓患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與預(yù)后的關(guān)系

溫 清 劉人愷 楊春水

廣東醫(yī)學(xué)院附屬南山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 深圳 518052

靜脈竇血栓患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與預(yù)后的關(guān)系

溫 清 劉人愷△楊春水

廣東醫(yī)學(xué)院附屬南山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 深圳 518052

目的 探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在靜脈竇血栓患者中的表達(dá)水平及其與近期預(yù)后的關(guān)系。方法 采用ELISA法檢測(cè)靜脈竇血栓患者（84例）和健康對(duì)照人群（70例）血漿VEGF水平，隨訪12個(gè)月評(píng)估靜脈竇血栓患者不良終點(diǎn)事件發(fā)生情況。結(jié)果 靜脈竇血栓患者血漿VEGF水平較正常對(duì)照組明顯升高［（195.15±24.62）μg/mL vs.（165.66±20.60）μg/mL（P＜0.01）］。隨訪結(jié)束后，高VEGF組（31例，VEGF≥200μg/mL）發(fā)生不良事件12例，低VEGF組（53例，VEGF＜200μg/mL）發(fā)生不良事件11例，Kaplan-Meier生存曲線顯示2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＝0.03）。另外，不良終點(diǎn)事件發(fā)生者（23例）血漿VEGF水平較無不良終點(diǎn)事件發(fā)生者（51例）明顯增高（P＜0.01）。結(jié)論靜脈竇血栓形成可誘導(dǎo)VEGF表達(dá)增強(qiáng)，VEGF水平升高越明顯近期預(yù)后越差，可能與血管源性腦水腫有關(guān)。

靜脈竇血栓；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；預(yù)后

顱內(nèi)靜脈竇血栓形成（cerebral venous sinus thrombosis，CVST）是一種特殊類型的腦靜脈系統(tǒng)缺血性腦血管病，發(fā)病率占所有卒中的0.5％～1.0％［1-2］，多見于兒童及青壯年［3］。由于其病因多樣性、發(fā)病機(jī)制復(fù)雜性及臨床癥狀各異，易與其他顱內(nèi)疾病混淆而被漏診和誤診［4］。靜脈竇血栓如不能及時(shí)治療，病死率可高達(dá)5％～10％，因此，早期診斷和規(guī)范化治療可顯著降低并發(fā)癥和后遺癥的發(fā)生，改善患者預(yù)后。近年來，多項(xiàng)研究提示血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）可導(dǎo)致血管源性腦水腫［5］，而靜脈竇血栓形成又與靜脈性缺血、腦水腫及靜脈高壓相關(guān)，故本實(shí)驗(yàn)的研究目的是觀察靜脈竇血栓患者血漿VEGF水平變化，并探討其與近期預(yù)后的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2010-01—2013-01深圳南山醫(yī)院和中南大學(xué)湘雅醫(yī)院就診并確診為CVST患者84例，男48例，女36例；年齡22～55歲，平均（34.6±11.9）歲；病程2～24 d，平均8.5d。另選取我院體檢健康人群70例作為正常對(duì)照組，男40例，女30例；年齡20～60歲，平均（35.3±12.3）歲。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)起病形式、誘因、既往病史、臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)檢查結(jié)果，確診需具備磁共振（MRI）及磁共振靜脈成像（MRV）、CT靜脈成像（CTV）、數(shù)字減影血管造影（DSA）3項(xiàng)檢查中至少1項(xiàng)支持診斷。

1.3 血漿標(biāo)本采集 CVST組及正常對(duì)照組分別于清晨空腹抽取靜脈血4～5mL（EDTA抗凝），以3 000r/min離心15min，微量移液器取上清，-80℃保存待測(cè)。實(shí)驗(yàn)過程中血標(biāo)本采集經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，所有入選研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.4 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子檢測(cè)方法 血漿VEGF測(cè)定使用人ELISA試劑盒（購自北京晶美試劑公司），實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，每份標(biāo)本檢測(cè)2孔，取平均值。吸光度采用雙波長(zhǎng)450/570nm進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出血漿VEGF水平，敏感度為15pg/mL，批內(nèi)及批間變異均＜9.5％。

1.5 預(yù)后隨訪 通過門診或電話隨訪靜脈竇血栓患者不良終點(diǎn)事件發(fā)生情況，包括靜脈竇血栓再發(fā)、腦血管疾病、不同程度偏癱或智力語言障礙、重殘或死亡等，死亡患者記錄死亡時(shí)間及原因。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 所有數(shù)據(jù)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，2組間比較采用t檢驗(yàn)；血漿VEGF水平與生存率關(guān)系采用Kaplan-Meier法，應(yīng)用Log-Rank檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組血漿VEGF水平比較 CVST組血漿VEGF水平為（195.15±24.62）μg/mL，較正常對(duì)照組（165.66±20.60）μg/mL明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見圖1。

圖1 2組血漿VEGF水平比較

2.2 靜脈竇血栓患者VEGF水平與近期預(yù)后關(guān)系 根據(jù)VEGF水平將所有患者分為高VEGF組（VEGF≥200μg/mL）31例和低VEGF組（VEGF＜200μg/mL）53例，隨訪12個(gè)月，平均（11.9±0.16）個(gè)月，記錄患者不良事件。結(jié)果顯示，高VEGF組不良事件發(fā)生12例（38.71％），低VEGF組不良事件發(fā)生11例（20.75％），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.03）。見圖2。84例CVST患者共發(fā)生不良事件23例，與無不良事件發(fā)生患者（51例）相比，血漿PEDF水平明顯增高［（213.45±31.31）μg/mL vs.（188.22±17.38）μg/mL，P＜0.01］。

圖2 高VEGF組與低VEGF組靜脈竇血拴生成曲線

3 討論

靜脈竇血栓的發(fā)病機(jī)制與靜脈血流高凝狀態(tài)、淤滯、血管壁損傷及血管內(nèi)血栓物質(zhì)沉積有關(guān)［6］。靜脈竇血栓形成后，靜脈阻塞導(dǎo)致局部腦組織水腫及靜脈性梗死，缺血、缺氧導(dǎo)致細(xì)胞膜能量依賴性離子泵損害，出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)水腫，靜脈擴(kuò)張、膨脹，通透性增高及缺血性神經(jīng)損害等病理生理改變；腦灌注壓和腦血流下降，又進(jìn)一步導(dǎo)致顱內(nèi)壓增高、缺血、缺氧等改變，形成惡性循環(huán)。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的分泌性細(xì)胞因子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和抑制細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)血管形成，改善血管滲透性等生物學(xué)特性［7-8］。Kimura等［9］大鼠靜脈缺血模型觀察顯示，靜脈血栓形成急性期VEGF表達(dá)增高主要與血管源性水腫有關(guān)。國內(nèi)亦有研究顯示CVST急性期VEGF無論在蛋白水平還是mRNA水平均有顯著表達(dá)［10］，其病理機(jī)制可能是由于腦缺血缺氧時(shí)，刺激局部組織釋放VEGF，VEGF作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，破壞內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)，增加血管通透性，導(dǎo)致病變組織微血管結(jié)構(gòu)破壞至血漿外滲，加重腦水腫形成。

本實(shí)驗(yàn)首次在人群中研究VEGF水平與CVST的相關(guān)性，結(jié)果顯示，CVST患者血漿VEGF水平較正常對(duì)照人群明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與上述實(shí)驗(yàn)報(bào)道及病理機(jī)制一致。此外，我們進(jìn)一步對(duì)所有入選CVST患者進(jìn)行隨訪觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)急性期VEGF水平越高，近期預(yù)后越差（P＝0.03），表明VEGF有可能成為預(yù)測(cè)CVST患者腦缺血程度和判斷預(yù)后的一個(gè)外周血指標(biāo)。

綜上所述，CVST急性期血漿VEGF水平升高可能與腦細(xì)胞缺血、缺氧所致腦水腫有關(guān)，VEGF水平變化對(duì)判斷病情輕重及預(yù)后有一定指導(dǎo)意義。然而，由于本研究樣本量較小，血樣本收集及隨訪時(shí)間有限，可能影響結(jié)果的論證能力，故有待于進(jìn)行大樣本隨機(jī)對(duì)照的多中心研究。

［1］Bousser MG，F(xiàn)erro JM.Cerebral venous thrombosis：an update［J］.Lancet Neurol，2007，6（2）：162-170.

［2］Saposnik G，Barinagarrementeria F，Brown RJ，et al.Diagnosis and management of cerebral venous thrombosis：a statement for healthcare professional from the American Heart Association/American Stroke Association［J］.Stroke，2011，42（4）：1 158-1 192.

［3］Piazza G.Cerebral venous thrombosis［J］.Circulation，2012，125（13）：1 704-1 709.

［4］Tanislav C，Siekmann R，Sieweke N，et al.Cerebral vein thrombosis：clinical manifestation and diagnosis［J］.BMC Neurol，2011，11：69.

［5］Cobbs CS，Chen J，Greenberg DA，et al.Vascular endothelial growth factor expression in transient cerebral ischemia in the rat［J］.Neurosci Lett，1998，249（2/3）：79-82.

［6］Jonas Kimchi T，Lee SK，Agid R，et al.Sinovenous thrombosis in children［J］.Neuriomaging Clinic N Am，2007，17（2）：239-244.

［7］Campanella C，Mottolese M，Cianciulli A，et al.Epidermal growth factor receptor gene copy number in 101advanced colorectal cancer patients treated with chemotherapy plus cetuximab［J］.J Transl Med，2010，16（8）：36-43.

［8］Vargo JA，Snelling BM，Ghareeb ER，et al.Dural venous sinus thrombosis in anaplastic astrocytoma following concurrent temozolomide and focal brain radiotherapy plus bevacizumab［J］.J Neurooncol，2011，104（2）：595-598.

［9］Kimura R，Nakase H，Sakaki T，et al.Vasogenic edema and VEGF expression in a rat two-vein occlusion model［J］.Acta Neurochir Suppl，2003，86：213-217.

［10］閆文浩，吳軍.大鼠靜脈竇血栓形成后VEGF和VEGF mRNA的表達(dá)及意義［J］.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2012，29（3）：248-251 .

（收稿2014-05-24）

The relationship between plasma levels of vascular endothelial growth factor and prognosis in patients with cerebral venous sinus thrombosis

Wen Qing，Liu Renkai，Yang Chunshui
Department of Neurology，the Affiliated Nanshan Hospital of Guangdong Medical College，Shenzhen518052，China

Objective To investigate the relationship between plasma levels of vascular endothelial growth factor（VEGF）and prognosis in patients with cerebral venous sinus thrombosis（CVST）.Methods The plasma VEGF levels of 84patients with CVST and 70healthy people were detected with ELISA，and then the short-term major adverse events（MAE）of patients were observed after followed up for 12months.Results The plasma VEFG level of patients with CVST was higher than that of control group［（195.15±24.62）μg/mL vs.（165.66±20.60）μg/mL］.The occurrence rate of high VEGF group was higher than that of lower VEGF group.Conclusion Cerebral venous sinus thrombosis can induce the enhanced expression of VEGF，and the more the VEGF expression is，the worse the prognosis is.

Venous sinus thrombosis；Vascular endothelial growth factor；Prognosis

R743.32

A

1673-5110（2015）04-0041-02

△通訊作者：劉人愷，E-mail：kay678＠139.com