高效液相色譜法測(cè)定琥珀酸亞鐵片的含量均勻度及溶出度*

竇金鳳，邵吉，劉源，胡安青

（江蘇省鎮(zhèn)江市藥品檢驗(yàn)所，江蘇鎮(zhèn)江212003）

高效液相色譜法測(cè)定琥珀酸亞鐵片的含量均勻度及溶出度*

竇金鳳，邵吉，劉源，胡安青

（江蘇省鎮(zhèn)江市藥品檢驗(yàn)所，江蘇鎮(zhèn)江212003）

目的建立測(cè)定琥珀酸亞鐵片中Fe2+含量均勻度及溶出度的高效液相色譜（HPLC）法。方法色譜柱為Agilent TC-C18柱（250mm× 4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40），檢測(cè)波長為215 nm。結(jié)果Fe2+物質(zhì)的量濃度在1.62～16.16 mmol/L范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，平均回收率為98.94%，RSD=1.08%（n=6）。結(jié)論該方法操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于琥珀酸亞鐵片的質(zhì)量控制。

琥珀酸亞鐵片；高效液相色譜法；含量均勻度；溶出度

琥珀酸亞鐵片是補(bǔ)鐵的常用制劑，具有補(bǔ)充鐵元素和糾正缺鐵性貧血的作用，用于缺鐵性貧血的預(yù)防和治療。該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是用氧化還原滴定法測(cè)定其Fe2+的含量，對(duì)其含量均勻度未測(cè)定。本研究中參考文獻(xiàn)［1-5］采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定琥珀酸亞鐵片含量均勻度及溶出度，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695型高效液相色譜儀；3-Star型精密pH計(jì)；AG245型天平。琥珀酸亞鐵片（金陵藥業(yè)股份有限公司南京金陵制藥廠，批號(hào)分別為110904，110801，111105）；琥珀酸對(duì)照品（國產(chǎn)分析純，含量不低于99.8%）；試驗(yàn)用水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40）；檢測(cè)波長：215 nm；流速：1.0mL/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL。理論板數(shù)按琥珀酸計(jì)不低于5 000，琥珀酸與相鄰雜質(zhì)峰之間的分離度大于1.5，色譜圖見圖1。

2.2 溶液制備

精密稱定琥珀酸對(duì)照品0.381 5 g，置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，制成質(zhì)量濃度為32.31mmol/L的琥珀酸對(duì)照品貯備液；精密量取貯備液3mL，置10mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，即得對(duì)照品溶液。

取琥珀酸亞鐵20片，除去薄膜衣后精密稱定，研細(xì)，精密稱取約2片量的樣品粉末置100 mL容量瓶中，加適量流動(dòng)相，超聲處理20 min，用流動(dòng)相稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

干擾試驗(yàn)：按處方取其他原輔料，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液，照擬訂色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果其他輔料對(duì)測(cè)定無干擾（見圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密取琥珀酸對(duì)照品貯備液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分別置10mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，得質(zhì)量濃度不等的系列對(duì)照溶液，分別取系列對(duì)照溶液各20μL進(jìn)樣測(cè)定。以質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=138 608X-3 369.9，r=0.999 9（n=6）。結(jié)果表明，琥珀酸質(zhì)量濃度在1.62～16.16mmol/L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：精密吸取同一對(duì)照品溶液（9.69 mmol/L）20μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，依法測(cè)定。結(jié)果琥珀酸亞鐵峰面積的RSD=0.40%（n=5），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批（批號(hào)為110904）樣品，依法制備5份供試品溶液并依法進(jìn)樣測(cè)定含量。結(jié)果的RSD=0.90%（n=5），表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于配制后0，2，4，6，8，12 h時(shí)依法進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果的RSD=0.40%（n=6），表明供試品溶液在12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn)：稱取已知含量的同批樣品（批號(hào)為110904）6份，每份約0.2 g，精密稱定，分別加入琥珀酸對(duì)照品，依法測(cè)定，并計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 琥珀酸加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.4 含量均勻度測(cè)定

取本品1片，置乳缽中，研細(xì)，加流動(dòng)相適量，并分次轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，超聲20min，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果見表2。

表2 樣品含量均勻度測(cè)定結(jié)果（%）

2.5 溶出度測(cè)定

采用2010年版《中國藥典（二部）》附錄溶出度測(cè)定法（第三法），以稀鹽酸24mL加水至1 000mL為溶劑，取200mL，轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為37.0℃，分別于5，10，20，30，45，60min時(shí)取溶液適量，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定，繪制溶出曲線。見圖2。攪拌槳轉(zhuǎn)速對(duì)照品溶出量測(cè)定結(jié)果見表3。

3 討論

圖2 溶出度測(cè)定結(jié)果圖

表3 攪拌漿轉(zhuǎn)速對(duì)樣品溶出量的影響（%）

該方法只能測(cè)定與琥珀酸根結(jié)合的亞鐵，不能用于測(cè)定總的亞鐵含量。由于琥珀酸亞鐵片中Fe2+的含量較少，故建議進(jìn)行含量均勻度檢查，不同批次間的結(jié)果存在差異。本研究結(jié)果顯示，流動(dòng)相的pH對(duì)峰形影響較大。琥珀酸亞鐵在各種亞鐵鹽中吸收率較好，是琥珀酸亞鐵片的主要有效成分。琥珀酸亞鐵中琥珀酸根離子與Fe2+的摩爾比為1∶1，本研究中采用HPLC法測(cè)定琥珀酸根離子的量即可計(jì)算與琥珀酸結(jié)合的Fe2+含量，對(duì)控制琥珀酸亞鐵片的生產(chǎn)工藝，確保其主要成分的含量，有一定應(yīng)用價(jià)值。

由于琥珀酸亞鐵片中Fe2+的含量較少，故采用《中國藥典（二部）》中第三法（小杯法）測(cè)定其溶出度，以提高其準(zhǔn)確度。根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，溶出的轉(zhuǎn)速以100 r/min為宜，取樣時(shí)間為60min。

［1］郭小潔.HPLC法測(cè)定鹽酸特拉唑嗪膠囊溶出度［J］.中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2005，6（2）：8-11.

［2］李曉燕，冉曉靜.HPLC法測(cè)定復(fù)方對(duì)乙酰氨基酚片中對(duì)乙酰氨基酚、乙酰水楊酸及咖啡因的含量［J］.藥物分析雜志，2008，28（5）：801-803.

［3］鄭艷彬，印杰，陸威.同廠家那格列奈片的溶出度比較［J］.中國藥師，2009，12（11）：1 678-1 679.

［4］闞淑玲，屠錫德，劉建平.琥珀酸亞鐵胃內(nèi)滯留漂浮型緩釋片的制備及體外釋放度研究［J］.藥學(xué)與臨床研究，2009，17（2）：89-92.

［5］李鶯，吳燕，劉麗平，等.自制與進(jìn)口鹽酸左西替利嗪片溶出度比較［J］.中國藥業(yè)，2012，21（21）：8-9.

Determination of Content Uniform ity and Dissolution in Ferrous Succinate Tablets by HPLC

Dou Jinfeng，Shao Ji，Liu Yuan，Hu Anqing
（Zhenjiang Institute for Drug Control，Zhenjiang，Jiangsu，China 212003）

Objective To establish an HPLC method for the determination of content uniformity and dissolution of Fe2+in Ferrous Succinate Tablets.Methods An Agilent TC-C18column（250 mm×4.6 mm，5μm）was used.The mobile phase consisted of 0.05mol/L KH2PO4（pH=2.40），and the detective wavelength was at 215 nm.Results The linear concentration ranges of Fe2+was 1.62～16.16 mmol/L.The average recoveries were 98.94%and RSD=1.08%（n=6）Conclusion The method is simple and accurate and can be used to control the quality of Ferrous Succinate Tablets.

Ferrous Succinate Tablets；HPLC；content uniformity；dissolution

R927.2；R973+.3

A

1006-4931（2015）22-0116-02

2014-09-30；

2015-03-20）

*江蘇省鎮(zhèn)江市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：FZ20130332。