VEGF/Flk-1與新生兒窒息的相關性研究

張 美　姜 紅*

（1 山東省菏澤牡丹人民醫院，山東 菏澤 274000；2 山東省青島大學附屬醫院，山東 青島 266003）

VEGF/Flk-1與新生兒窒息的相關性研究

張 美1姜 紅2*

（1 山東省菏澤牡丹人民醫院，山東 菏澤 274000；2 山東省青島大學附屬醫院，山東 青島 266003）

目的 探討VEGF及其受體Flk-1與新生兒窒息的相關性，以為其臨床診治提供新靶點。方法 選取2012年6月至2013年6月于本院生產的窒息新生兒60例，根據Apgar評分分為輕度窒息（Apgar=4～7）31例和重度窒息（Apgar=0～3）29例；同時，選取同期接生的30例健康新生兒為對照組。于生產過程中取新生兒臍動脈血，采用酶聯免疫（ELISA）試劑盒測定血清VEGF水平，并采用免疫蛋白印跡實驗（WB）測定其主要受體Flk-1的蛋白表達水平。結果 各組新生兒的臍動脈血VEGF水平和Flk-1蛋白表達量存在差異，表現為重度窒息組、輕度窒息組、對照組依次降低，且各組之間的差異均有統計學意義。經進一步的線性分析，VEGF水平和Flk-1蛋白表達量與新生兒Apgar評分呈直線負相關（R2=0.606、0.677）。結論 VEGF的含量與功能變更與新生兒窒息的發生和發展具有密切聯系，其臍動脈血的含量測定可為新生兒窒息的臨床診斷和預防提供新指標。

VEGF；Flk-1；新生兒窒息；Apgar評分

新生兒窒息是臨床常見新生兒缺氧性疾病，也是世界新生兒死亡的主要因素之一［1］。不僅僅可啟動腦細胞缺氧性凋亡，還能造成繼發性神經損傷，產生腦癱、智力低等嚴重并發癥，影響患兒的長期生存質量。近年，與血管生成密切相關的血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在新生兒缺血缺氧性疾病的研究中日益受到重視［2］。VEGF主要通過受體作用于靶組織，目前已知的VEGF受體包括VEGFR-1和VEGF-2（Flt-1）兩種。其中Flt-1主要表達于胎盤、胚胎血管、機體主要器官及外周血，對中樞神經病變和胚胎病變的影響最大，可能是新生兒缺血缺氧性病變的重要影響因子。本研究對不同發病程度的新生兒窒息患者臍動脈血VEGF含量變化及其主要受體Flk-1蛋白表達進行對比性分析。

1　資料與方法

1.1一般資料：選取2012年6月至2013年6月于本院生產的窒息新生兒60例。其中男31例，女29例；自然分娩43例，剖宮產17例；孕周38～44周，平均（39.8±2.1）周；出生體質量1900～4800 g，平均（3621±432）g。選取同期接生的30例健康新生兒為對照組；其中男16例，女14例；自然分娩21例，剖宮產9例。孕周39～43周，平均（40.2±2.4）周；出生體質量2200～4800 g，平均（3644±421）g；兩組患者的年齡、性別、孕周及出生體質量無統計學差異（P＞0.05）。

1.2診斷和分組：參照3版《實用新生兒學》［3］判斷有無新生兒窒息。根據生后1分鐘Apgar評分情況分為輕度窒息（Apgar=4～7）31例和重度窒息（Apgar=0～3）29例。

1.3研究方法：所有研究對象均于生產過程中取新生兒臍動脈血，分裝于兩管。管A常溫靜置40 min，4000 r/min離心取血清，采用全自動生化儀和ELISA試劑盒測定血清VEGF的水平。管B以總蛋白抽提試劑盒提取蛋白質，并以10 μg為單孔上樣量進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，分離蛋白條帶，以常規WB實驗測定Flt-1的蛋白表達水平。

1.4統計學方法：選用統計學軟件SPSS16.0分析數據，VEGF水平及Flt-1蛋白表達量均以均數±標準差（）表示，行t檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義，P＜0.01為差異有顯著統計學意義。

2　結　果

2.1各觀察指標的組間對比：各組新生兒的Apgar評分存在顯著差異，重度窒息組、輕度窒息組、對照組依次升高（P＜0.05）。各組新生兒的臍動脈血VEGF水平和Flk-1蛋白表達量存在差異，表現為重度窒息組、輕度窒息組、對照組依次降低，且各組之間的差異均有統計學意義（P＜0.05）；見表1。

表1　各組患者Apgar評分、VEGF水平和Flk-1蛋白表達量的組間對比

2.2相關性分析：經進一步的線性分析，VEGF水平和Flk-1蛋白表達量與新生兒Apgar評分呈直線負相關（R2=0.606、0.677）；見圖1。

圖1　新生兒臍動脈血的VEGF血清含量和Flk-1表達水平與新生兒Apgar評分的相關直線（A1 新生兒臍動脈血VEGF含量與新生兒Apgar評分.y=-0.273x+0.968，R2=0.606；A2新生兒臍動脈血Flk-1蛋白表達水平與新生兒Apgar評分.Y=-0.278+0.97，R2=0.677）

3　討　論

新生兒窒息是指新生兒出生后無自主呼吸或呼吸抑制而導致的低氧血癥、高碳酸血癥和代謝性酸中毒。據不完全統計［4］，發展中國家的兒童病死率占世界平均水平的90%以上，其中30%以上為新生兒。從發病機制來看，導致新生兒窒息的本質因素為缺氧，因此產前任何阻礙母體與胎兒血液循環和氣體交換的因素均可能導致新生兒窒息。窒息缺氧時為了保證心腦等重要器管的血供，非重要器官可發生血管收縮性反射，這是導致多器官功能損傷的病理基礎。此外，在缺氧條件下，糖類營養物質可發生無氧酵解，以供給能量需要；在這個過程中，乳酸大量堆積，可誘發酸中毒，加重器官損傷。因此，新生兒窒息存在原發性損傷和繼發性損傷兩種情況，且多項研究結果顯示其繼發性損傷是患兒致殘或致死的主要因素。

VEGF是胱氨酸結生長因子超家族一員，因其能引起小靜脈對血液中大分子物質通透性的增高，最初命名于血管通透素。現代病理研究發現［5］，多種應激性反應可誘導VEGF的表達變遷，包括胚胎發育異常、腫瘤、心血管疾病及機體外創等生理性因素，亦包括失眠、抑郁癥、抑躁癥等心理因素。VEGF在新生兒窒息中的研究始于近幾十年，其具體的生理病理機制尚未完全明確。本研究選取不同發病程度的窒息新生兒臍動脈血為樣本，對VEGF及Flk-1進行分析。結果顯示，各組新生兒的臍動脈血VEGF血清含量和Flk-l蛋白水平存在差異，均表現為重度窒息組＞輕度窒息組＞對照組，窘迫組＞非窘迫組＞對照組。且線性分析結果顯示，VEGF的血清含量及其主要受體Flk-1的表達水平均與Apgar評分呈負相關。說明VEGF的含量與活性與新生兒窒息的發病過程密切相關，且其含量及受體表達均隨著窒息程度的加重而升高，可為新生兒窒息的臨床診斷和預防提供依據。

綜上所述，VEGF的含量與功能變更與新生兒窒息的發生和發展具有密切聯系，其臍動脈血的含量測定可為新生兒窒息的臨床診斷和預防提供新指標。

［1］孔雙，馬生秀.新生兒窒息的原因及治療［J］.醫學綜述，2009， 15（6）: 870-872.

［2］劉紅梅，李芳君.新生兒窒息與血管內皮生長因子和胰島素樣生長因子-1的關系［J］.現代生物醫學進展，2010，10（7）:1334-1335.

［3］金漢珍.實用兒科學［M］.北京:人民衛生出版社，2003.

［4］吳春華.新生兒窒息的搶救與護理分析［J］.中國實用醫藥，2013，11（28）:219-220.

［5］張瑞鵬，郭平凡.血管內皮生長因子最新研究進展［J］.醫學綜述，2008，14（15）:2258-2260.

R722.12

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1671-8194（2015）17-0083-02

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