4-二甲胺偶氮苯磺酰氯柱前衍生高效液相色譜法測定人體尿液中肌氨酸

黃冰蘭， 李喜載， 黃麗英*， 林守二

(1.福建醫科大學藥學院，福建福州 350004；2.福建農林大學食品科學學院，福建福州 350002)

目前，前列腺癌(Prostate Cancer,PCa)的診斷是基于血液中前列腺癌特異抗原(Prostate-specific Antigen,PSA)的水平，但其靈敏度、特異性低，易出現假陽性或假陰性的結果。因此，越來越多的學者開始質疑PSA能否作為前列腺癌的標志物[1,2]。肌氨酸是甘氨酸的甲基化衍生物，亦稱N-甲基甘氨酸，是肌肉和其他組織自然產生的氨基酸，很少出現在尿液中[3]。2009年，Sreekumar等報道肌氨酸可以作為前列腺癌的標志物，它參與了前列腺癌的進展過程，是細胞惡變和轉移過程中含量顯著升高的一種代謝物，并且能在尿液中檢測出來。肌氨酸還可能作為前列腺癌治療中的特異性指標，能幫助識別侵襲性的腫瘤[4,5]。因此，檢測人體尿液中肌氨酸的含量具有重要的臨床診斷意義和研究價值。

本研究以4-二甲胺偶氮苯磺酰氯(4-Dimethylaminoazobenzene-4′-sulfonyl Chloride,Dabsyl-Cl)作為肌氨酸柱前衍生試劑，并對衍生條件進行了優化，利用高效液相色譜(HPLC)法測定尿液中肌氨酸的含量。該方法樣品處理簡單、分析時間短、靈敏度和準確度高，為臨床診斷前列腺癌提供了一個安全、高效的分析方法。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent1260型自動進樣高效液相色譜儀(美國，安捷倫公司)，附二極管陣列檢測器(DAD)；HH-2型數顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司)；SZ-97型自動純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)；BS 124S型分析天平(上海奕宇電子科技有限公司)；H1650-W型臺式高速離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司)；UltraBasic-7型精密pH計(美國，丹佛儀器有限公司)；……