聚丙烯酸/萘酰亞胺納米粒熒光增強法測定蛋白質

李杰鵬， 梁淑彩， 余 慧， 劉衍斌， 鄢國平

(1.武漢工程大學材料科學與工程學院，湖北武漢 430074;2.武漢大學藥學院，湖北武漢 430072)

蛋白質定量檢測在生命科學、臨床、醫療及衛生等領域具有重要意義。采用熒光探針的熒光分析法因操作簡單、靈敏度高、選擇性好等特點在蛋白質定量分析中有著舉足輕重的地位[1]。傳統的蛋白質熒光探針有稀土離子[2]、金屬配合物[3]，及有機小分子化合物如熒光素類、花菁類和芳酸類染料[4-6]等。近年來，隨著納米技術的發展，熒光納米粒作為新興熒光探針引起了科研工作者的關注，基于無機材料的半導體納米晶[7,8]、金納米粒[9]和復合SiO2納米粒[10]等已用于蛋白質的熒光分析測定。相比于無機納米熒光材料，聚合物熒光納米粒具有結構可控，功能可設計及良好的生物相容性等顯著優勢，在生物分析方面具有廣闊的應用前景，但目前用于蛋白質測定的報道[11,12]不多。

聚丙烯酸(PAA)水溶性好且無毒性，在水處理、生物醫藥及石油化工等方面有較多應用[13]。1,8-萘酰亞胺熒光團光穩定性好，Stokes位移大，對其進行結構修飾可獲得具有高靈敏度和選擇性的熒光探針，在熒光分析測定方面的潛力已得到普遍認可[14,15]。本文以萘酰亞胺熒光化合物為交聯劑對PAA進行交聯，得到了水溶性的聚合物熒光納米粒。以444 nm為激發波長，該納米粒在544 nm處發射熒光，而牛血清白蛋白(BSA)能使其發射波長藍移至535 nm，且熒光顯著增強。據此，建立了一種快速、簡便和靈敏地測定蛋白質的新方法。……