腦出血患者血腫周圍組織IL－17與NF－κBp65的表達及意義

畢 勝，楊 麗，劉 群，范 佳，李 冬，王李鳴，趙巖巖，關雪蓮，侯麗淳，田嘉瑩，王增冕，李曉濤，李培育＊

（1.佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯154002；2.大慶龍南醫(yī)院，黑龍江 大慶163000；3.吉林大學白求恩第一醫(yī)院，吉林 長春130021；4.吉林大學白求恩第二醫(yī)院，吉林 長春130041）

腦出血是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，嚴重影響人類健康。多種機制參與腦出血后的炎癥反應及組織損傷。IL－17是一種重要的細胞因子，在自身免疫病等多種疾病中發(fā)揮重要作用。已有研究證實，IL－17A/NF－κB通路存在于多種細胞中，IL－17A 通過激活下游 NF－κB發(fā)揮生物學效應［1，2］。本研究擬通過檢測腦出血血腫周圍組織IL－17及NF－κBp65的表達，探討IL－17/NF－κBp65通路在腦出血血腫周圍組織炎性反應中的作用。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

RT－PCR試劑盒，上海普邁生物科技有限公司；PCR引物，上海生工生物工程有限公司；核蛋白提取試劑盒，大連寶生物工程有限公司；

1.2 實驗分組

選取2013年1月至2014年12月期間我院神經(jīng)外科收治的腦出血患者，共48例。按發(fā)病距手術(shù)取材時間分為4組，分別為≤6h組、6－24h組、24－72h組和＞72h組，每組12例標本。血腫旁1cm左右腦組織作為實驗組，另選取手術(shù)入路中遠離血腫的腦組織6例作為對照組。所有病例均符合腦出血的診斷標準［3］。

1.3 取材及實驗方法

全部標本均以液氮凍存。RT－PCR法檢測IL－17mRNA的表達；Western blot法檢測 NF－κBp65核蛋白的表達；

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS13.0軟件，所有數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較用單因素方差分析（ANOVA），P＜0.05為具有統(tǒng)計學差異。

2 結(jié)果

2.1 實驗組及對照組IL－17mRNA的表達

≤6h組IL－17mRNA的表達與對照組相比無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），其他各實驗組IL－17mRNA的表達與對照組相比有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。24－72h組血腫周圍組織IL－17mRNA 的表達顯著高于其他各實驗組（P＜0.05），見表1。

表1 各組IL－17mRNA的表達

2.2 實驗組及對照組腦組織NF－κBp65核蛋白的表達

各實驗組血腫周圍組織NF－κBp65核蛋白的水平與對照組相比均具有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。24－72h組血腫周圍組織 NF－κBp65核蛋白的水平顯著高于其他各實驗組（P＜0.05），見表2。

表2 各組腦組織NF－κBp65核蛋白的表達

3 討論

已有研究證實，腦出血后多種機制參與其發(fā)病過程，炎癥反應參與腦出血后的病理過程。在腦出血發(fā)病早期，中性粒細胞、單核細胞等多種細胞遷徙、滲出到血腫周圍組織，分泌多種細胞因子等炎癥介質(zhì)，參與炎癥反應及神經(jīng)細胞凋亡。小膠質(zhì)細胞等多種細胞能分泌多種細胞因子及補體參與血腫周圍的炎癥反應。粘附分子亦參與腦出血后的細胞聚集及炎癥反應。

IL－17是一種重要的細胞因子，廣泛參與多種炎癥性疾病的發(fā)病過程。已有研究證實，IL－17與其受體結(jié)合后，通過 NF－κB、MAPK、JAKs/STATs這三種信號途徑傳導信號［4］。

NF－κB是一種多向性的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，能夠影響多種細胞的轉(zhuǎn)錄，誘導細胞因子、趨化因子、粘附分子、補體等多種因子的轉(zhuǎn)錄。當細胞受到細菌、病毒等病原微生物、活性氧族、細胞因子等多種刺激時，NF－κB能夠被活化，多種刺激因素與 NF－κB之間能夠形成復雜的正反饋環(huán)路，與多種疾病的發(fā)病有關。

本研究發(fā)現(xiàn)腦出血血腫周圍組織IL－17、NF－κBp65的表達逐漸增加，提示腦出血血腫周圍組織炎癥反應的存在與IL－17、NF－κBp65密切相關。血腫周圍組織NF－κBp65表達的動態(tài)變化與IL－17的表達具有時間上的高度一致性。提示腦出血后IL－17/NF－κB 通路被激活，IL－17A/NF－κB 通路還通過促進金屬基質(zhì)蛋白酶及水通道蛋白的表達，促進腦出血后腦水腫的發(fā)生［5－9］。NF－κB還可能誘導神經(jīng)細胞的凋亡，促進組織損傷。本實驗提示可以通過調(diào)控IL－17/NF－κB通路，減輕腦出血后的炎癥反應，控制腦水腫，減輕細胞損傷，為腦出血治療開辟了新的途徑。

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