豬圓環病毒2型感染對豬瘟疫苗免疫效果的影響

張敬峰　趙永前　孫華偉等

摘要：為探索在豬圓環病毒2型（PCV-2）陽性豬場免疫豬圓環病毒疫苗對豬場實際臨床生產中豬瘟疫苗免疫效果的影響，遂將某規模化豬場的一棟存在PCV-2感染的150頭產房仔豬隨機分為試驗組和對照組，每組75頭，試驗組在14日齡免疫某進口PCV-2桿狀病毒載體滅活疫苗，對照組不免疫，并分別在PCV-2疫苗免疫前和豬瘟疫苗二免后30天每組隨機采血18頭仔豬檢測豬瘟抗體。結果顯示：PCV-2疫苗免疫前兩組仔豬的豬瘟抗體水平無明顯差異，豬瘟疫苗二免后30天，試驗組的豬瘟抗體平均值和豬瘟抗體離散度均顯著好于對照組。表明，PCV-2的感染會對豬的免疫系統造成損害從而抑制豬瘟疫苗的免疫應答，在PCV-2陽性豬場免疫豬圓環病毒疫苗能夠顯著增強豬瘟疫苗的免疫效果。

關鍵詞：豬圓環病毒2型；豬瘟抗體；跟蹤監測；強化免疫；應用

中圖分類號：S852.65+1 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2015）08-0086-03

Abstract In order to explore the influence of Porcine Circovirus Type 2 （PCV-2 ） vaccination on the immune effect of Classical Swine Fever （CSF） vaccine in the PCV-2 positive pig farms during practical clinical production， 150 piglets in a farrowing house of a large pig farm which had been confirmed to be PCV-2 positive were randomly divided into two groups， namely， test group and contrast group， and each 75 piglets. The piglets in the test group were immunized with the imported PCV-2 baculovirus vector inactivated vaccine when they were 14 days old. Then， 18 piglets were randomly selected from each group before PCV-2 vaccination and 30 days after CSF revaccination respectively. The detection results showed that： there was no difference between the two groups in CSF antibody level before PCV-2 vaccination； 30 days after CSF revaccination， the average value and dispersion of CSF antibody in the test group were significantly higher than those of the contrast group. It indicated that the immune system of pigs could be damaged by PCV-2 infection and the immune response of CSF vaccine was suppressed. In addition， the immune effect of CSF vaccine could be enhanced by immunizing with PCV-2 vaccine in the PCV-2 positive pig farms.

Key words Porcine Circovirus Types 2（PCV-2）；CSF antibody； Tracking monitoring； Supplementary immunization； Application

豬圓環病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV-2）引起的豬圓環病毒相關疾病（Porcine circovirus type 2 associated diseases，PCVAD）是危害當今全球養豬生產最主要的免疫抑制性疾病。目前PCV-2在各地豬場內感染十分普遍，其感染率可高達96%以上[1]。研究表明，PCV-2感染可導致豬的免疫器官損傷、淋巴細胞增殖活性降低及淋巴細胞缺失，IgM+ B細胞總數顯著下降，巨噬細胞吞噬功能降低[2～4]。PCV-2引起的上述免疫病理損傷與當前許多豬群生產性能低下、疫苗免疫失敗以及多種病原混合或繼發感染的頻繁發生有密切關系。司興奎等[5]通過建立PCV-2人工感染模型證實了PCV-2的感染會對豬瘟疫苗體液免疫應答有一定程度的抑制作用。本研究旨在探索在豬場實際臨床生產中，PCV-2感染對豬瘟疫苗免疫應答的影響，這對進一步闡明豬瘟疫苗免疫失敗的原因、改善免疫效果具有重要的理論意義，為豬瘟的有效防控提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（CSFV Ab），購自美國IDEXX公司；酶標儀型號為寶特ExL 800，美國寶特公司生產；冷凍離心機型號為Centrifuge 5424R，產自德國；各種規格的移液器，購自德國Eppendorf公司；恒溫箱、水浴鍋等。

1.2 接種免疫

將江蘇省宿遷某規模化豬場一棟存在PCV-2感染的150頭產房仔豬隨機分為試驗組和對照組，每組75頭，單獨飼養。試驗組豬只在14日齡免疫某進口PCV-2桿狀病毒載體滅活疫苗，對照組不免疫。仔豬豬瘟免疫某生物制品廠的豬瘟ST傳代細胞苗， 30日齡首免，60日齡二免，按1頭份/頭肌注免疫。endprint

1.3 檢測方法

分別在PCV-2疫苗免疫前和豬瘟疫苗二免后30天每組隨機采血18頭仔豬檢測豬瘟抗體。血清按常規方法進行凝血處理。抗體檢測于2014年9月在江蘇省農業科學院獸醫所動物疫病診斷與檢測中心實驗室進行。嚴格按照IDEXX公司的試劑盒說明書要求進行相關操作。結果判定：樣品阻斷率≥40%，判為豬瘟抗體陽性，阻斷率≤30%判為豬瘟抗體陰性，介于兩者之間為可疑。

2 結果與分析

2.1 PCV-2疫苗免疫前血清樣品檢測結果

由圖1可知，檢測仔豬血清樣品在PCV-2疫苗免疫（14日齡）前的豬瘟抗體陽性率、阻斷率平均值和離散度，試驗組和對照組分別為：88.9%和88.9%，64.6%和63.3%，27.4%和28.0%。說明試驗組和對照組在PCV-2疫苗免疫前豬瘟抗體水平非常接近，二者差異不顯著（P>0.05），試驗組和對照組的分組是科學的。同時，由于此階段仔豬的豬瘟抗體來自于母源抗體，說明母豬群的豬瘟抗體水平和抗體整齊度均較好。

2.2 豬瘟疫苗二免后30天血清樣品檢測結果

由圖2可知，檢測仔豬血清樣品在豬瘟疫苗二免后30天（90日齡）的豬瘟抗體陽性率、阻斷率和離散度，試驗組和對照組分別為：83.3%和72.2%，58.8%和47.8%，30.2%和39.2%。試驗組豬瘟抗體陽性率比對照組高11.1個百分點，二者差異顯著（P<0.05），說明PCV-2感染能顯著影響CSFV特異性抗體的產生，導致血清抗體轉陽率下降。在仔豬豬瘟疫苗二免后試驗組豬瘟抗體平均值比對照組高11.0個百分點，抗體離散度比對照組低9.0個百分點，與對照組差異顯著（P<0.05），表明PCV-2感染確實可以在一定程度上抑制仔豬對豬瘟疫苗的體液免疫應答，導致豬群豬瘟抗體水平和抗體整齊度的下降。

3 討論與結論

豬圓環病毒2型陽性豬場在不免疫豬圓環病毒疫苗的情況下，會造成豬免疫系統損害，抑制豬免疫應答產生，導致在進行豬瘟疫苗免疫時，無CSFV抗體產生或只產生低水平抗體，增加臨床上發生非典型豬瘟及豬瘟免疫失敗的風險。在養豬業蓬勃發展的中國，PCV-2感染情況相當普遍，尤其是養豬比較密集的地區。但目前不少豬場在是否進行豬圓環病毒疫苗免疫接種上存在一個誤區，即認為圓環病毒發病只是造成豬只免疫力下降，不會造成豬只死亡，卻忽視了PCV-2感染可以增加機體發生繼發感染幾率，降低豬群整齊度和改善飼料報酬等。因此，對于PCV-2陽性豬場及時進行豬圓環病毒疫苗的免疫是必要的。部分豬場反映其免疫效果不盡人意的原因主要有以下幾種：

（1）只免疫一次滅活疫苗。從免疫學理論而言，滅活疫苗必須經過基礎免疫和加強免疫才可以產生良好的免疫反應和免疫保護，因此豬圓環病毒疫苗也需要間隔兩周的兩次免疫。

（2）免疫日齡不合理。仔豬吮初乳后10日齡時抗體水平高于其他檢測日齡，至30日齡時迅速下降，之后隨著日齡增長母源抗體逐漸下降，仔豬14～20日齡時首免PCV-2疫苗最佳[6]。因此豬圓環病毒疫苗首免日齡太早和太晚都會影響免疫的效果。

（3）只免疫仔豬或只免疫母豬。母豬接種PCV-2疫苗能提高母豬的繁殖性能，并能降低所產仔豬的PCV-2感染，但母源抗體持續的時間有限，因此對母豬和仔豬都應該進行免疫接種。

（4）免疫接種的操作不規范。免疫接種是豬場一項重要工作，接種時用擋板將豬擋在一個相對固定的地方，禁忌打飛針，且應該由熟練的技術人員來完成。

參 考 文 獻：

[1] 徐麗華，王一成，袁秀芳，等.規模豬場4大疫病的血清學檢測及免疫抑制病因分析[J].畜牧與獸醫，2009，41（10）：77-80.

[2] Straw B E， Zimmerman J J，DAllanre S. Diseases of Swine [M].9th Edition.BlackWell Publishing Professional，2008，313-314.

[3] Nielsen J，Vincent I E，Beeotr A，et al. Association of lymphopenia with porcine circovirus type 2 induced postweaning multisystemic wasting syndrome（PMWS） [J].Vet. Immunol. Immunopathol.，2003，92（314）：97-111.

[4] 劉祥義，陳立功，宋勤葉，等.豬圓環病毒2型與豬細小病毒共感染對豬肺泡巨噬細胞吞噬功能及其干擾素表達水平的影響[J].微生物學報，2011，51（1）：105-114.

[5] 司興奎，郭鑫，楊漢春.豬圓環病毒2型感染對豬瘟疫苗體液免疫應答的影響[J].中國獸醫學報，2009，29（7）：826-829.

[6] 張毅，李郁，劉文，等.豬圓環病毒2型疫苗免疫對母豬繁殖性能及仔豬母源抗體水平的影響[J]. 動物醫學進展，2012，33（11）：27-30.endprint