高效液相色譜法測定水產品中的甲醛

劉成文

摘要 通過在提取甲醛的同時進行衍生反應，采用液相色譜法測定水產品中的甲醛含量，確定了有關測定的參數。結果表明：該方法具有前處理操作簡便、結果準確、精密度高等優點，能有效提高檢測效率，適合于批量測定水產品中的甲醛。

關鍵詞 甲醛；水產品；液相色譜；測定

中圖分類號 TS254.7 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2015）12-0274-02

Determination of Formaldehyde in Aquatic Products by HPLC

LIU Cheng-wen

（Longgang District Quality Supervision and Inspection Center of Aquatic Products of Shenzhen City，Shenzhen Guangdong 518172）

Abstract A high performance liquid chromatographic（HPLC）method for determination of formaldehyde in aquatic products by extract and derivatization at the same time was developed.Results showed that this method was simple and had good linear relationship and good repetition.This method was available to determine the formaldehyde in aquatic products with satisfactory results.

Key words formaldehyde；aquatic products；HPLC；determination

甲醛，又名蟻醛、福爾馬林，是一種具有強還原性的原生質毒素，有較高的毒性，可破壞生物細胞的原生質，進入人體器官后，對人的神經系統、肺、肝臟均有損害[1]，可致癌、致畸[2]，是食品中的禁用物質[3-4]。因甲醛具有定型、防腐作用，一些不法商販為了使水產品和水發食品保持較好的感官和延長保質期，獲得較高的利潤，在水產品中人為添加甲醛，而水產品中的甲醛很難通過清洗、烹調消除，嚴重危害消費者的身心健康。

目前，常用的水產品中甲醛檢測方法主要有分光光度法[5-7]、氣相色譜法[8]、高效液相色譜法等[9-11]。分光光度法由于前處理采用蒸餾法，操作不易控制，回收率較低，且不適合批量檢測；與之相比，色譜法具有準確度高、抗干擾能力強等特點。已有文獻中，液相色譜法前處理較復雜，需先提取再衍生化、凈化，本文通過對提取條件和衍生條件等進行研究，在提取甲醛的同時進行衍生反應，有效地提高了檢測效率，建立了適合用于水產品中甲醛測定的高效液相色譜法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試劑。甲醛標準物質100 mg/L；乙腈；乙酸銨；冰乙酸；2，4-二硝基苯肼（純度≥99%）。

1.1.2 儀器與設備。高效液相色譜儀（配有紫外檢測器）；水浴搖床；高速冷凍離心機；電子天平。

1.2 試驗方法

1.2.1 色譜條件。色譜柱：waters Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（70∶30，V/V）；流速、檢測波長、柱溫、進樣量分別為1.0 mL/min、365 nm、40 ℃、20 μL。

1.2.2 樣品處理。①溶液配制。2，4-二硝基苯肼乙腈溶液（0.6 g/L）：稱取2，4-二硝基苯肼300 mg，用乙腈溶解定容至500 mL。緩沖溶液：稱取4.82 g乙酸銨，以適量水溶解，冰乙酸調pH值至5左右，定容至500 mL。衍生液：將2，4-二硝基苯肼乙腈溶液與緩沖液按1∶1（V/V）混合均勻。②樣品提取。準確稱取經勻漿的樣品2.0 g，置于50 mL具塞塑料離心管中，準確加入20.0 mL衍生液，漩渦混合均勻后置于50 ℃恒溫水浴搖床中，200 r/min振搖，每隔10 min取出混勻1次，振搖1 h后取出冷卻至室溫。③樣品凈化。將提取液以10 000 r/min離心5 min，取適量上清液過0.45 μm微孔濾膜。④標準曲線溶液的配制。取不同體積的100 mg/L甲醛標準溶液，置于10 mL容量瓶中，加衍生液定容，混勻，置于50 ℃恒溫水浴搖床中，200 r/min振搖1 h，取出冷卻至室溫，得濃度分別為0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L標準曲線溶液。過0.45 μm微孔濾膜，經高效液相色譜測定，繪制標準工作曲線。用保留時間定性，外標法定量。

2 結果與分析

2.1 反應條件的選擇

為了解衍生溫度對結果的影響，本試驗對同一樣品在不同的衍生溫度（分別為30、40、50、60 ℃）下甲醛的含量進行了測定，結果表明：在50 ℃衍生能獲得最大的峰面積，即衍生效果最好。

為了解水浴時間對結果的影響，本試驗分別試驗了40、50、60、70、80、90 min的衍生化時間對結果的影響。結果表明，在衍生化60 min時，衍生基本完成，因此本試驗將衍生化時間定為60 min。

2.2 標準曲線及線性方程

將配制好的標準曲線工作液，按照1.2.1中的色譜條件進行上機測定，以峰面積為縱坐標，以甲醛濃度為橫坐標，得到線性方程Y=1.02×104+6.12×105X，線性相關系數為0.999 9。

2.3 準確度和精密度

分別取秋刀魚和大黃魚樣品2.0 g，加入相當于樣品含量5、10、20 mg/kg的甲醛，每個水平設7個平行，按1.2.2方法對樣品進行處理后，上機測定，計算回收率及方法的精密度，結果見表1。可以看出，當添加水平>5 mg/kg時，甲醛回收率為84.6%～87.2%，相對標準偏差均小于5%，符合分析要求。endprint

2.4 檢出限

按照方法所規定的稱樣量和定容體積，根據3倍信噪比（S/N），計算出本方法的檢出限為0.2 mg/kg。

2.5 樣品測定

利用本方法分別對5個未知樣進行檢測，其中未知樣1和未知樣2為經快速檢測方法確定為陽性的樣品，檢測結果見表2。可以看出，未知樣1、2測得的甲醛含量較高，其余未知樣測得甲醛含量較低或未檢出，可推斷未知樣1、2可能人為添加了防腐劑甲醛。

3 結論

采用2，4-二硝基苯肼乙腈溶液及緩沖液在提取水產品中甲醛的同時進行衍生反應，經液相色譜上機測定甲醛含量的方法，具有前處理操作簡便、結果準確、精密度高等優點，有效地提高了檢測效率，適合于批量測定水產品中的甲醛。

4 參考文獻

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