細胞周期蛋白依賴性激酶調節亞基1和p27 kip1在老年乳腺浸潤性導管癌中的表達及臨床意義

劉廣寅 劉 琳 張志勇 王 平 吳晨鵬 (唐山工人醫院，河北 唐山 063000)

乳腺癌是女性發病率最高的惡性腫瘤〔1〕，歐美國家中的老年患者(60歲以上)約占49%〔2〕。細胞在基因水平上失去對本身生長的正常調控，生長周期失調紊亂，可發生腫瘤，p27 kip1作為抑癌基因，負性調控細胞周期，表達水平與細胞增殖程度緊密關聯。CKS1正性調節細胞周期，是一種癌基因，能夠促進腫瘤發生，在肝癌、乳腺癌、胃癌等癌組織中表達增高〔3，4〕。本研究采用免疫組織化學方法對老年浸潤性導管癌患者癌組織中p27 kip1和細胞周期蛋白依賴性激酶調節亞基(CKS)1的蛋白表達進行檢測，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2013年12月外科手術切除的老年女性(≥60歲)乳腺浸潤性導管癌的標本120例，對照組為乳腺良性病變標本120例。兩組年齡差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.2 方法 組織標本均經10%甲醛溶液固定后經石蠟包埋處理。采用免疫組織化學法檢測p27 kip1和CKS1水平。

1.3 結果分析 所有切片均由病理科大夫閱片，每張片子高倍鏡下計數5個視野的細胞，根據陽性細胞所占的百分比分為4級:陽性細胞＜5%為陰性(－)，5%～30%為陽性(+)，30%～75%為，＞75%為。將－與+合并為陰性組(－)、與合并為陽性組(+)。

1.4 統計學方法 應用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 p27 kip1蛋白的陽性表達 p27 kip1在乳腺浸潤性導管癌中表達的陽性率〔30%(36/120)〕顯著低于良性病變〔92.50%(111/120)〕(χ2=98.75，P ＜0.01)。

2.2 CKS1陽性表達 CKS1在乳腺浸潤性導管癌中表達陽性率〔66.67%(80/120)〕顯著高于良性病變〔18.33%(22/120)〕(χ2=57.36，P ＜0.01)。

2.3 p27 kip1與乳腺浸潤性導管癌臨床病理特征的關系 p27 kip1蛋白在腫瘤直徑＞2 cm組表達陽性率顯著低于≤2 cm組(χ2=23.99，P＜0.01);p27 kip1蛋白在有淋巴結轉移組表達陽性率顯著低于無淋巴結轉移組(χ2=17.62，P＜0.01);p27 kip1蛋白在淋巴結轉移個數＞3個組表達陽性率顯著低于淋巴結轉移數量≤3組(χ2=12.75，P ＜0.01)。見表1。

2.4 CKS1與乳腺浸潤性導管癌臨床病理特征的關系 CKS1蛋白在腫瘤直徑＞2 cm組表達陽性率明顯高于≤2 cm組(χ2=19.62，P＜0.01);CKS1蛋白在有淋巴結轉移組表達陽性率明顯高于無淋巴結轉移組(χ2=16.13，P＜0.01);CKS1蛋白在淋巴結轉移個數＞3個組表達陽性率明顯高于淋巴結轉移數量≤3個組(χ2=14.21，P＜0.01)。見表1。

表1 p27 kip1和CKS1與乳腺浸潤性導管癌臨床病理特征的關系〔n(%)〕

3 討論

細胞生命活動的基本過程就是細胞周期，而當細胞增殖失控，分化異常，周期發生紊亂時，有導致細胞過度增殖的可能性，并會因此誘發癌變。機體內調控細胞周期的因子有細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)、細胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)。CKS1在一些腫瘤組織中高表達，如乳腺癌、肝癌、胃癌等，并與腫瘤分化程度有相關性〔5，6〕。p27 kip1是一種抑癌基因，可抑制細胞分裂。通過泛素依賴性蛋白水解途徑，CKS1與Cullin-1的結合可以促進p27 kip1的泛素化降解，削弱p27 kip1對細胞周期的抑制作用，助長腫瘤的發生發展〔4〕。Uehara等〔7〕報道 CKS1與泛素蛋白酶 S細胞周期激酶蛋白(SKP)2結合之后，識別p27進而泛素化降解p27蛋白。

有報道p27蛋白陽性表達率在前列腺癌組織〔38.2%(26/68)〕低于前列腺增生組織〔80.9%(38/47)〕(P ＜0.01)〔8〕。另有文獻報道，檢測p27在浸潤性乳腺癌和正常乳腺組織中分別為30.6%和88.9%陽性率〔9〕，其結果與本文結果p27 kip1在乳腺浸潤性導管癌中的表達陽性率比良性病變陽性率降低的結論一致，p27 kip1在乳腺癌組織中表達下調，而在非癌性組織中水平較高，負性調控細胞周期，是抑癌基因。

本文結果說明CKS1表達增多，可能通過泛素依賴性蛋白水解途徑，進而促進了p27kip1的泛素化降解，p27kip1對細胞周期的抑制作用被減弱，從而導致了乳腺癌細胞正常生長周期調控失效，為乳腺癌細胞呈無節制生長提供環境，為預后不良的參考指標。TNM分期對p27 kip1和CKS1陽性表達有明顯影響，這與相關文獻報道結果相符〔10〕。所以，通過檢測CKS1和p27 kip1的陽性表達也可推斷乳腺浸潤性導管癌的惡性程度。本研究提示，CKS1和p27kip1與老年女性乳腺浸潤性導管癌有密切關系。如果將二者的表達與乳腺浸潤性導管癌患者的TNM分期及其他臨床病理指標結合，可以作為臨床治療的指導和評價預后的相關參數。

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5 Lee EK，Kim DG，Kim JS，et al.Cell-cycle regulator Cks1 promotes hepatocellular carcinoma by supporting NF-κB-dependent expression of interleukin-8〔J〕.Cancer Res，2011;7l(21):6827-35.

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7 Uehara N，Yoshizawa K，Tsubura A.Vorinostat enllances protein stability of p27 and p2l through negative regulation of Skp2 and Cksl in human breast cancer cells〔J〕.Oncol Rep，2012;28(1):105-10.

8 王超奇，余大海，王金花，等.前列腺癌組織p27及Survivin表達的臨床意義〔J〕.現代腫瘤醫學，2014;22(1):123-5.

9 郭 靜，唐仁泉，張 宇，等.CyclinE和p27在乳腺癌中的表達及臨床意義〔J〕.當代醫學，2009;15(7):130-1.

10 Ishimura R，Osako T，Okumura Y，et al.Clinical significance of Ki-67 in neoadjuvant chemotherapy for primary breast cancer as a predictor for chemosensitivity and for prognosis〔J〕.Breast Cancer，2010;17(4):269-75.