外周血T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白檢測對肺癌病情監測及預后評價意義

譚江峽

[摘 要] 目的：探討外周血T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白檢測在肺癌病情監測、預后評估中作用。方法：選擇87例肺癌患者、70例肺部良性腫瘤患者和50例健康人群分別作為研究組、良性組和對照組；比較各組外周血T淋巴細胞亞群變化水平和免疫球蛋白含量。結果：研究組CD4+ CD25+、IgG、IgA水平顯著高于良性組和對照組（P<0.05），CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對照組（P<0.05）；研究組和良性組IgM顯著高于對照組（P<0.05）。T淋巴細胞亞群水平與病理類型無關（P>0.05），與TMN分期、淋巴轉移有關（P<0.05）；相關性分析顯示肺癌患者外周血CD4+ CD25+細胞與IgG、IgA呈正相關關系（P<0.05），與CD8+ CD28+呈負相關關系（P<0.05）。結論：肺癌患者外周血T淋巴細胞亞群水平和免疫球蛋白含量檢測，能夠作為評估肺癌病情、預后的指標之一。

[關鍵詞] T淋巴細胞亞群；免疫球蛋白；肺癌；預后

中圖分類號：R713 文獻標識碼：B 文章編號：2095-5200（2015）03-090-03

現代研究已證實，免疫功能在腫瘤的發生、發展中起著重要作用[1-2]。T淋巴細胞是體內重要的免疫系統。研究顯示[3]T淋巴細胞的活化需要CD4、CD25、CD8、CD28的調節，這些調節性T淋巴細胞具有低反應性和免疫抑制性等特點，在腫瘤細胞的發生、發展及預后中發揮著重要作用。免疫球蛋白與T淋巴細胞一樣，也是機體的重要防疫系統，相較于細胞免疫，體液免疫作用機制更為復雜。本研究通過分析肺癌患者外周血T淋巴細胞和免疫球蛋白的變化水平，探討其在肺癌病情、預后評估中價值，現將研究成果總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年7月至2013年12月我院收治的肺癌患者，納入標準：⑴經病理學、影像學檢測確診的初次原發性肺癌患者；⑵就診前未進行相關抗腫瘤治療；⑶近3個月內未使用免疫抑制劑；⑷取得患者知情。排除標準：⑴原發病灶為肺部以外的器官；⑵有嚴重并發癥者；⑶心、腎、肝等器官功能異常者。經過篩選，87例患者符合標準，其中男51例，女36例；年齡28～69歲，平均（48.5±7.4）歲。病理分型腺癌47例，鱗癌29例，小細胞癌11例；按照腫瘤TMN分期：Ⅱ期27例，Ⅲ期43例，Ⅳ期17例；其中伴有淋巴轉移者47例。選取同期在我院治療的肺部良性腫瘤患者70例作為良性組，男43例，女27例；年齡31～74歲，平均（50.1±8.3）歲；其中肺血管瘤38例，炎性假瘤26例，肺錯構瘤6例。另調取同期在我院體檢的健康人群50例為對照組，男31例，女19例；年齡18～79歲，平均（49.7±9.1）歲。三組患者在性別、年齡等一般資料具有可比性（P>0.05）。

1.2 儀器與試劑

FITC標記的鼠抗人CD4單克隆抗體、PE標記的鼠抗人CD25單克隆抗體、PE標記的鼠抗人CD8、CD28單克隆抗體均購自美國Becton Dickinson公司；儀器為BD FACSCalibur流式細胞儀；溶血劑購自杭州康樹生物技術有限公司；貝克曼庫爾特IMMAGE 800特定蛋白分析儀。

1.3 檢測方法

清晨空腹抽取各組研究對象外周靜脈血3mL，放入抗凝管中，混勻后置于冰箱中保存待檢。檢測時取100μL全血，加入10μL CD4抗體、10μL CD25抗體、2μLCD8抗體，2μLCD28抗體，室溫避光混勻15min，再加入2mL溶血劑，37℃溶解10min后立即上機檢測；圈定淋巴細胞為門內細胞，要求每次獲取10000以上門內細胞，計算CD4+ CD25+、CD8+ CD28+比值。另抽取患者全血3mL，高速離心分離血清，標記后放入冰箱保存待檢。采用免疫散射比濁法測定血清免疫球蛋白含量，包括IgG、IgA和IgM。

1.4 統計學方法

所有研究數據采用SPSS 17.0統計學軟件包進行統計分析，計量資料以x±s表示，獨立樣本采用t檢驗分析樣本間差異，相關性采用Pearson檢驗，以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組T淋巴細胞亞群與免疫球蛋白水平比較

研究組CD4+ CD25+、IgG、IgA水平顯著高于良性組和對照組（P<0.05），CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對照組（P<0.05）；研究組和良性組IgM顯著高于對照組，而研究組和良性組組間IgM水平相比差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 肺癌患者外周血T淋巴細胞亞群水平與臨床病理參數關系

T淋巴細胞亞群水平與病理類型無關（P>0.05），與TMN分期、淋巴轉移有關（P<0.05）；其中隨著肺癌浸潤程度加深，CD4+ CD25+水平逐漸升高，CD8+ CD28+水平逐漸降低；有淋巴轉移者CD4+ CD25+水平較高、CD8+ CD28+水平較低，見表2。

2.3 CD4+ CD25+與CD8+ CD28+、免疫球蛋白相關性分析

肺癌患者外周血CD4+ CD25+細胞與IgG、IgA呈正相關關系（P<0.05），與CD8+ CD28+呈負相關關系（P<0.05），與IgM無明顯相關性（P>0.05），見表3。

3 討論

腫瘤患者機體多伴有免疫功能異常，在腫瘤免疫中，細胞免疫和體液免疫均發揮著重要作用[4]。其中細胞免疫主要通過各T淋巴細胞亞群調節機體的各項免疫功能。根據表面抗原，可以將T淋巴細胞分為CD4亞群和CD8亞群[5-7]；薛旦旦[8]報道證實，CD8+ CD28+在病毒感染和腫瘤抵抗中起著重要作用，并承擔著機體免疫監控和免疫防御作用。李敏[9]在研究中稱CD4+ CD25+能夠促進細胞凋亡、抑制細胞增殖，在腫瘤免疫監視、維持細胞穩定性方面有著重要作用。

本研究中，研究組CD4+ CD25+水平顯著高于良性組和對照組，CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對照組，說明在肺癌的發生、發展中，機體的免疫系統發生了變化，整體處于免疫抑制作用，這與Critchley[10]報道結論相同。免疫球蛋白作為機體防御系統重要部分，在腫瘤監視中，免疫球蛋白主要起到溶解、吞噬靶細胞作用[11-12]。本研究對腫瘤患者血清免疫球蛋白進行檢測后發現，研究組IgG、IgA水平顯著高于良性組和對照組。免疫球蛋白屬于體液免疫，該免疫系統作用機制較為復雜，目前對其機制尚不完全清楚。本研究免疫球蛋白水平升高可能與機體產生腫瘤抗原有關，也可能是體液免疫作為腫瘤細胞免疫功能低下的代償作用[13]；我們對肺癌患者外周血T淋巴細胞亞群水平與臨床病理參數的關系進行探討后發現，T淋巴細胞亞群水平與TMN分期、淋巴轉移有關，而與病理類型無關。隨著肺癌分期增加，CD4+ CD25+水平逐漸升高，CD8+ CD28+水平逐漸降低；且有淋巴轉移者CD4+ CD25+水平較高、CD8+ CD28+水平較低。這說明T淋巴細胞狀態與肺癌病情的進展及預后密切相關。我們推測可能是肺癌病情加重，腫瘤細胞增多，機體細胞因子的調節作用會使免疫抑制狀態越來越明顯[14]。相關性分析也顯示肺癌患者外周血CD4+ CD25+細胞與IgG、IgA呈正相關，與CD8+ CD28+呈正相關，這也提示我們，可以通過檢測患者外周血T淋巴細胞作為評估肺癌病情的指標之一。

綜上所述，肺癌患者外周血T淋巴細胞亞群水平和免疫球蛋白含量檢測，能夠作為評估肺癌病情、預后的指標；根據患者免疫狀態，制定相應治療方案，對評估療效和預后具有重要作用。

參 考 文 獻

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