老年慢性阻塞性肺疾病患者血清炎性因子與BODE指數的相關性

胡來明,吳永紅

(湖北醫藥學院附屬襄陽醫院老年病科, 襄陽 441000)

·論著·

老年慢性阻塞性肺疾病患者血清炎性因子與BODE指數的相關性

胡來明,吳永紅

(湖北醫藥學院附屬襄陽醫院老年病科, 襄陽 441000)

目的 通過對慢性阻塞性肺疾病(COPD)穩定期患者外周血炎性因子包括IL-17、IL-8以及C反應蛋白(CRP)水平的檢測和BODE指數與上述炎癥細胞因子間關系的相關性分析，探討上述炎癥細胞因子評估COPD患者病情以及預后的價值意義。方法 分析60例COPD穩定期患者的臨床資料，選取60例健康體檢者作為對照組。比較兩組受試者血清白細胞介素-8(IL-8)、白細胞介素-17(IL-17)、C反應蛋白(CRP)水平，對COPD患者血清IL-8、IL-17、CRP水平與BODE指數間關系進行相關性的分析。結果 COPD組患者血清炎性因子包括IL-8、IL-17和CRP水平均比健康對照組受試者高，且差異有統計學意義(P<0.01)。COPD穩定期患者血清IL-8、IL-17、CRP水平與BODE指數間均存在顯著的正相關關系。結論 COPD穩定期患者血清IL-8、IL-17、CRP水平仍維持較高的表達水平，檢測血清IL-8、IL-17、CRP水平有利于對COPD患者病情嚴重程度及預后的評估。

肺疾病，慢性阻塞性;白細胞介素17;白細胞介素8;C反應蛋白質

慢性阻塞性肺疾病(COPD)患病的人數多，其致死率較高，對患者的生活質量及其勞動能力均構成了嚴重的影響，給社會也造成了嚴重的經濟負擔[1-2]。本研究旨在通過對COPD穩定期患者外周血中白細胞介素-8(IL-8)、白細胞介素-17(IL-17)以及C反應蛋白(CRP)水平的檢測和BODE指數與上述炎癥細胞因子間關系的相關性分析，探討在對COPD患者病情以及預后的評估方面，上述炎癥細胞因子的價值意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 分析2011年10月至2013年11月在我院接受治療的60例COPD穩定期患者的臨床資料。其中男性39例，女性21例，年齡60～89歲，平均(65.2±5.1)歲。入選標準：患者均需符合中華醫學會呼吸病學分會于2007年制定的關于COPD診治指南的相關診斷標準[3]，判定氣流受限為不完全性可逆為吸入支氣管的舒張藥后第一秒用力呼氣容積占用力肺活量的百分比(FEV1/ FVC%)小于70%；在測定肺功能前24 h停用茶堿控釋片，在測定前12h停止長效β2-受體激動劑的吸入，在測定前4 h停止短效β2-受體激動劑以及抗膽堿能藥物的吸入。排除標準：完全無法交流以及不愿意配合的患者；急性加重期的患者；惡性腫瘤者；合并嚴重心、腎、肝等慢性疾病患者；肺癌、支氣管擴張以及活動性肺結核、其他限制性的肺通氣功能受障患者。另外選取60例我院體檢中心的同期健康體檢者作為健康對照組，其中女性24例，男性36例，年齡60～89歲，平均(64.8±4.5)歲，與COPD組相比差異無統計學意義(P>0.05)。經肺功能檢查排除氣流受限者，以及COPD、原發性腎病綜合征、風濕免疫類疾病、各種原因所致的肝硬化、過敏體質、各種間質性肺炎、支氣管哮喘以及急慢性肺部感染性疾病和嚴重的急慢性心血管系統疾病患者。兩組受試者性別和年齡的組間比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 研究方法 主要試劑：人血清IL-17試劑盒和人血清IL-8試劑盒(上海圓創生物有限公司)，人血清CRP試劑盒(上海德賽診斷系統有限公司)，沙丁胺醇氣霧劑(葛蘭素史克公司)。主要儀器：M550多功能酶標儀(日本BIO-RAD)，HI-801肺功能儀(日本CHEST)，-40℃低溫冰箱(中國海爾)，RGZ-120-RT型體質量秤(中國無錫衡器廠)，以及卷尺、血壓計、周期計數器、普通秒表和脈搏氧飽和度儀。清晨抽取兩組患者的空腹靜脈血，離心后將血清保存在-40℃低溫冰箱中，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)同步檢測兩組受試者血清IL-8、IL-17、CRP水平。檢測血清IL-8和IL-17的水平：將人血清IL-8、IL-17試劑盒從冰箱內取出，將血清標本也從冰箱內取出，在室溫下靜止30 min；將洗滌液用蒸餾水以1∶20的比例稀釋；設定空白對照孔、待測樣本孔、標準孔，將標準品50 μL加入標準孔內，在待測樣本孔內加入待測樣本10 μL，接著把樣本稀釋5倍，而不添加任何液體至空白對照孔中；恒溫箱內以37 ℃溫育30 min；將液體棄去、干燥，將洗滌液加滿每孔，靜置1 min，將洗滌液甩去，再用吸水紙將其拍干，反復洗板共4次；將50 μL的酶標試劑加至除空白對照孔外的每孔中；恒溫箱內以37 ℃溫育30 min；將液體棄去、干燥，將洗滌液加滿每孔，靜置1 min，將洗滌液甩去，再用吸水紙將其拍干，反復洗板共4次；將顯色劑A液和顯色劑B液各50 μL加入每孔內，輕輕混勻，溫育15 min；將酶標板取出，將50 μL的終止液加入每孔內，當藍色立馬轉成黃色則終止反應；將空白孔調0，在終止反應后15 min內，采用450 nm波長將吸光度(OD)值測量出；依據標準品濃度所對應的OD值，計算標準曲線直線回歸方程，在參照樣本OD值，用回歸方程計算對應樣品濃度值，與總稀釋倍數相乘即為實際的IL-8、IL-17的濃度。檢測血清CRP的水平：從冰箱內分別將待測血樣和CRP試劑盒取出，于室溫下靜置30 min；稀釋樣品至100倍；在96孔反應板內分別加入10 μL已稀釋血清和標準品；將100 μL的酶聯試劑加入每孔內，混勻30 s，室溫下溫育45 min；反復洗板5次；將100 μL的TMB顯色劑加入每孔，混勻10s，室溫下溫育20 min；將100 μL的終止液加入每孔內，混勻30 s；終止反應后15 min內于450 nm處讀OD值，依據標準品濃度所對應的OD值，計算標準曲線直線回歸方程，在參照樣本OD值，用回歸方程計算對應樣品濃度值，與總稀釋倍數相乘即為實際的CRP的濃度。

測定體質量指數(BMI)=體質量/身高2(kg/m2)計算BMI值。檢查肺功能：用肺功能儀常規檢測所有受試者的肺功能狀況，即將400 μg短效β2-受體激動劑和沙丁胺醇氣霧劑吸入，15 min后測試。將第1秒用力呼氣容積/預計值(FEV1%pred)和FEV1/FVC記錄下。測定呼吸困難程度：依據改良后的英國醫學研究委員會呼吸困難量表(MMRC)評估COPD患者平時呼吸困難程度[4]。測定運動能力：采用6 min步行距離(6MWD)對COPD患者運動能力進行評估，具體參照美國胸科學會(AST)2002年推出的6 min步行指南[5]。評定COPD患者的BODE指數：0分：BMI>21 kg/m2，MMRC為0～1分，6MWD至少為350 m，FEV1%pred至少為65%；1分：BMI≤21 kg/m2，MMRC為2分，6MWD為250～349 m，FEV1%pred為50%～64%；2分：MMRC為3分，6MWD為150～249 m，FEV1%pred為36%～49%；3分：MMRC為4分，6MWD ≤149 m，FEV1%pred≤35%。各組分值和為BODE指數評分值。分為四級：1級為0～2分；2級為3～4分；3級為5～6分；4級為7～10分，總分為10分。

1.3 統計學處理 采用SPSS19.0軟件分析數據，計量資料比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 COPD組患者BODE指數評分 FEV1%pred為38.9±14.7，6MWD為(340.1±107.8)m，MMRC為(2.3±1.2)分，BMI為(22.3±3.7)kg/m2，BODE指數為4.6±1.4，COPD穩定期患者的BODE指數為2～3級間。

2.2 兩組受試者血清炎性因子的水平比較 見表1。

表1 兩組受試者血清炎性因子的水平比較

2.3 COPD組患者血清IL-17與血清CRP、IL-8水平的相關性分析 COPD組患者血清IL-17與IL-8存在顯著的正相關性(r=0.838，P<0.01)，與CRP無明顯的相關性(r=0.291，P=0.073)。

2.4 COPD組患者血清IL-17與BODE指數以及其構成變量的相關性 COPD組患者血清IL-17與BODE指數存在顯著的正相關性(r=0.785，P<0.01)，與6MWD、FEV1%pred呈顯著的負相關性，與MMRC呈顯著的正相關性，而與BMI則無明顯的相關性。COPD組患者血清IL-17與BODE、MMRC、6MWD以及FEV1%pred均存在明顯的相關性,見表2。

2.5 COPD組患者血清IL-8與BODE指數以及其構成變量的相關性 COPD組患者血清IL-8與BODE指數存在顯著的正相關性(r=0.918，P<0.01)，與6MWD、FEV1%pred、BMI呈顯著的負相關性，與MMRC呈顯著的正相關性。COPD組患者血清IL-8與BODE及其構成變量均存在明顯的相關性，見表3。

表2 COPD組患者血清IL-17與BODE指數以及其構成變量的相關性

表3 COPD組患者血清IL-8與BODE指數以及其構成變量的相關性

表4 COPD組患者血清CRP與BODE指數以及其構成變量的相關性

2.6 COPD組患者血清CRP與BODE指數以及其構成變量的相關性 表4結果提示COPD組患者血清CRP與BODE指數存在顯著的正相關性，與6MWD、FEV1%pred呈顯著的負相關性，與MMRC呈顯著的正相關性，而與BMI則無明顯的相關性。

3 討論

炎性反應存在于COPD急性加重期和穩定期的發病過程中，且肺泡和支氣管的炎癥與其伴發的全身炎癥的程度也均相關[6-7]。全身炎性反應特點是被激活的炎癥細胞釋放各種急性時相反應炎癥細胞因子和蛋白進入循環[8]。有資料顯示，在COPD患者血液內如IL-6、TNF-α與急性時相反應蛋白如CRP等濃度異常上升，說明COPD肺部炎癥能致使全身炎性反應的發生，從而發生諸如抑郁癥、缺血性心臟病等的全身炎性反應[9-10]。

BODE指數包含4個變量，即體質量指數(B)，氣流阻塞程度(O)，呼吸困難(D)和運動能力(E)，屬于多維分級系統，可以對COPD患者的系統性特征以及呼吸特點進行全面地反映，有效預測此類患者的預后及病情。有研究顯示[11]BODE指數越高，患者的死亡風險則越大，與COPD患者的預后具有較強的相關性。本研究通過對COPD穩定期患者血清IL-8、IL-17、CRP水平與BODE指數間關系的研究，結果發現上述三種炎性因子與BODE指數都存在顯著的正相關關系，與6MWD、FEV1%pred呈顯著的負相關性，與MMRC呈顯著的正相關性。FEV1%pred下降的程度與COPD患者預后、病情均密切相關，而6MWD體現了患者運動耐力，對COPD患者死亡風險可進行精確預測。MMRC體現了患者的呼吸困難程度，與COPD患者生活質量存在良好的相關性。

綜上所述，COPD患者的發病機制主要是炎性反應，本研究的結果顯示COPD穩定期患者的血清IL-8、IL-17、CRP仍維持高表達狀態，說明三種均參與了COPD的整個進程，且三者表達水平的高低與BODE指數以及其主要的構成變量都呈顯著的相關性。故對COPD穩定期患者體內血清IL-8、IL-17、CRP水平的檢查能體現患者病情的嚴重程度，對患者生活質量和運動耐力進行評價，可以作為其病情嚴重程度以及預后評估的有效生物學指標。

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The correlation between serum inflammatory cytokines and BODE index in elderly patients with COPD

Hu Laiming，Wu Yonghong

(Department of Geriatrics,Xiangyang Hospital,Hubei University of Medicine,Xiangyang 441000,China)

Objective To detect the levels of serum IL-8,IL-17 and CRP in peripheral blood in elderly patients with stable COPD and perform the correlation analysis between the inflammatory cytokines and BODE index,then to explore the prognosis value of inflammatory cytokines in the evaluation of patients with COPD Methods Clinical data of patients with COPD at our hospital from 2011 to 2013 was retrospectively analyzed.60 healthy check-up subjects were chosen as control group.The levels of serum IL-8,IL-17 and CRP of subjects in the two groups were compared respectively and the relationship between each inflammatory cytokines and BODE index was analyzed.Results The levels of inflammatory cytokines including IL-8,IL-17 and CRP in COPD group were significancantly higher than those in control group.The levels of serum IL-8,IL-7,CRP in stable COPD patients were significant positive correlated with BODE index.Conclusion The levels of serum IL-8,IL-17,CRP in stable COPD patients was keep high.The detection of serum IL-8,IL-7,CRP can be used for the evaluation of severity and prognosis of COPD.

Pulmonary disease,chronic obstructive;Interleukin-17;Interleukin-8;C-reactive protein

胡來明，副主任醫師，Email：hulaiming_hb@163.com

R563.5

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2015.02.011

2014-12-31)