乙肝病毒外膜大蛋白與HBV—DNA檢測相關性分析

郭艷華 王新建 白全召

[摘要]目的探究乙型病毒性肝炎（乙肝）患者血清乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）與乙肝病毒的脫氧核糖核酸（HBV-DNA）相關性及HBV-LP檢測對乙肝患者臨床診斷意義。方法通過酶聯免疫法、實時熒光定量PCR法檢測HBV感染者血清內HBV-LP、HBV-DNA含量。結果相同模式乙肝病毒血清標志物（HBV-M）患者血清內HBV-LP與HBV-DNA檢測情況對比無明顯差異（P<0.05）。HBV-DNA陽性血清中HBV-LP陽性檢出率明顯優于HBeAg陽性率，HBV-LP OD值與HBV-DNA拷貝數呈正相關聯（P<0.05）。結論乙肝病毒外膜大蛋白與HBV-DNA存在較好的相關性，可以通過檢測HBV-LP水平判斷乙肝病毒復制情況，對臨床診斷和療效評價有重要意義。

[關鍵詞]乙肝病毒外膜大蛋白;HBV-DNA;相關性

目前乙型病毒性肝炎作為臨床常見疾病，由于傳染性強、病死率高，已經危害人類健康。現在臨床診斷此類疾病，主要是依靠檢測乙肝病毒血清標志物，但其僅能判斷病毒入侵，無法準確反映病毒復制情況及是否有傳染性。目前只有通過檢測HBV-DNA才可以精確判斷乙肝病毒是否有傳染性，而HBV-LP作為乙肝病毒的包膜蛋白，可以用來監測乙肝病毒感染、復制及預后。這里我們通過測定乙肝患者血清HBV-LP、HBV-DNA含量，探究它們之間的相關性及HBV-LP檢測對乙肝患者臨床診斷意義。

1 材料與方法

1.1 材料 在2013年3月至2014年3月之間隨機選取150例門診及住院乙肝患者，男性102例，女性48例，年齡在18～66歲，平均45.7歲，均符合2000年國家制定病毒性肝炎診斷標準。空腹取血樣，離心取上層血清置-80℃冰箱保存。

1.2 方法 HBV-M及HBV-LP檢測均用酶聯免疫法，試劑盒購于（上海復興長征醫學科學有限公司）;HBV-DNA檢測采用實時熒光定量PCR法，試劑盒購于（珠海賽樂奇生物技術有限公司）;操作步驟按試劑說明書。

1.3 統計學處理 用SPSS13.0軟件行統計分析，計數材料用卡方檢驗，組間比較用t檢驗，P<0.05有差異具統計學意義。

2 結果

2.1 不同HBV-M 模式下HBV-LP、HBV-DNA檢出情況 結果說明在相同HBV-M模式下HBV-LP與HBV-DNA的檢測結果沒有統計學意義。

表1 不同HBV-M 模式下HBV-LP、HBV-DNA檢出情況

HBV-M

例數

HBV-DNA/陽性率

HBV-LP/陽性率

1、4、5

89

42（47.2%）

40（44.9%）

1、3、5

37

32（86.5%）

31（83.8%）

1、5

4

0

0

1、2、4、5

6

0

0

2、4、5

9

0

0

2、5

5

0

0

合計

150

74（49.3%）

71（47.3%）

注：模式中1是HBsAg，2是HBsAb，3是HBeAg，4是HBeAb，5是HBcAb

2.2 血清HBV-DNA和HBV-LP吸光度值（OD）檢測結果 74例乙肝患者血清內HBV-DNA拷貝數增多，同時HBV-LP OD值也增大，兩者表現正相關聯， 其相關系數r=0.921。

表2 血清HBV-DNA和HBV-LP吸光度值（OD）檢測結果

HBV-DVA（例數）

HBV-DNA（ copies/ml）

HBV-LP（OD值）

HBV-LP（例數/陽性率）

22

10³

0.65±0.31

16（72.7%）

14

10⁴

0.88±0.20

11（78.6%）

15

10⁵

1.18±0.30

13（86.7%）

12

10⁶

1.40±0.25

11（91.7%）

11

10⁷

1.98±0.33

11（100%）

2.3 HBV-DNA陽性血清HBV-LP與HBeAg陽性率比較 根據結果發現在74例HBV-DNA陽性血清中HBV-LP的陽性率是83.8%（62/74），

HBeAg的陽性率是43.2%（32/74）， HBV-LP陽性率明顯優于HBeAg，兩者差異顯著，有統計學意義（P<0.01）。

3 討論

目前臨床檢測乙肝患者病情情況及預后主要是通過定量檢測乙肝病毒標志物，但是對病毒早期復制情況不能準確判斷，這樣對臨床早期診治的造成了較大難度。目前只有HBV-DNA能準確反映乙肝病毒復制及傳染性情況，是臨床判定乙肝病毒復制的血清學指標，特別是對HBeAg陰性乙肝患者有重要的臨床應用價值^[1]，但是目前在基層醫療機構尚不能獨立開展核酸檢測，針對乙肝患者只能靠HBeAg轉換以及肝功能判斷病毒復制情況，況且還有部分HBeAg陰性乙肝患者由于病毒基因出現變異，甚至無法合成HBeAg，出現HBeAg 陰性但病毒仍在復制現象^[2]。HBV-LP是HBV Dane氏顆粒及亞病毒顆粒的主要組成部分，它在HBV病毒感染早期與細胞受體結合并誘導攝入病毒，直到感染晚期它還參與病毒組裝及分泌，因此檢測HBV-LP能夠反映病毒復制情況和預后^[3-5]。有研究發現在治療乙肝中病毒DNA水平可以呈現快速降低，速度明顯快于HBV-LP，導致血清內HBV-LP水平減少速度慢，最終晚于HBV-DNA消失，因此檢測血清內HBV-LP水平能反映出臨床治療效果^[6]。

我們研究發現相同HBV-M模式中HBV-DNA與HBV-LP陽性率沒有差異;72例HBV-DNA陽性血清中，HBV-LP的陽性率是83.8%（62/72），HBeAg的陽性率是43.2%（32/72）。這些結果表明HBV-LP對判斷乙肝患者病毒復制情況明顯優于HBeAg，并且它與HBV-DNA在陽性檢出率效果類似，因此HBV-LP能準確反映乙肝病毒復制水平，可以作為臨床判斷乙肝病毒復制情況的血清學指標。

總之，HBV-LP作為判斷乙肝病毒復制的血清學指標，特別是在HBeAg檢測表現陰性情況下，它能準確反映出乙肝患者體內病毒復制情況，在臨床應用中有非常重要的應用價值，同時由于它的檢測費用經濟、步驟簡便、操作容易可行，也不需要建立專用實驗室及購買昂貴的檢測儀器，特別適合在基層醫院推廣使用，這對臨床診斷和治療效果評價有重要作用。

參考文獻

[1]譚旭明.乙型肝炎病毒大蛋白的臨床檢測意義[J].廣州醫藥， 2008，6：43-45.

[2]耿坤靜，杜博勛，耿慧娟.漢族、哈薩克族乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒大蛋白檢測的臨床意義[J].中國基層醫藥，2012，1：19-20.

[3]高娟娟.乙型肝炎病毒大蛋白含量與乙型肝炎病毒療效的相關性研究[D].青島大學，2013.

[4]丁小紅，謝勁松.乙型肝炎病毒復制水平與大蛋白檢測的臨床意義[J].齊齊哈爾醫學院學報，2011，6：896-897.

[5]毛遠麗，李伯安，馬洪濱等.乙肝患者外膜蛋白血清學檢測及對于判定HBV-DNA復制的意義[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2006， 20（3）：276-278.

[6]張春福.乙肝病毒外膜大蛋白檢測及在病毒復制診斷中的臨床應用[J].臨床和實驗醫學雜志，2011，10（23）：1826-1827.