基質金屬蛋白酶在涎腺良、惡性多形腺瘤中的表達

唐瑞平，伍愛民，鄭本強，李 敬，鄧 凌，何 紅 (.荊楚理工學院醫學院，湖北 荊門 448000;.湖北省荊門市第二人民醫院口腔醫院，湖北 荊門 448000;.湖北省荊門市第二人民醫院口腔科，湖北 荊門 448000)

在涎腺上皮性腫瘤中多形腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)是一種非常常見的腫瘤疾病，患者占比可以超過50%，在醫學界將該類疾病歸入良、惡性之間的腫瘤當中，一旦病患患上此類疾病非常容易出現反復發作等情況。在治療效果不理想的情況下，超過90%的良性多形性腺瘤癌會惡化為惡性多形性腺瘤，此類疾病病患在涎腺惡性腫瘤中的人數占比超過15%。基質金屬蛋白酶－2(matrix metalloproteinases－2，MMP－2)是通過腫瘤細胞中的無活性的酶原進行分泌產生的一種明膠酶，可以對病患機體中的彈性蛋白、纖連蛋白等進行分解，使其在明膠中進行充分溶解。組織抑制劑(tissue inhibitors of metalloproteinase，TIMPs)聯合基質金屬蛋白酶可以實現對病患體內的細胞外基質進行合成、降解的平衡效果。細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN) 通 過 刺 激MMPs 的生成而促進腫瘤的侵襲，是免疫球蛋白的一種。本次實驗將選取2012 年1 月～2013 年12 月期間來我院接受治療的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例惡性多形性腺瘤病患，并對人體在正常情況下的涎腺組織，惡性的多形性腺瘤以及涎腺多形性腺瘤的相關EMMPRIN、TIMP－2 以及MMP－2 進行比較分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取2012 年1 月～2013 年12 月期間來我院接受治療的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例惡性多形性腺瘤病患，同時選取同一時期在我院接受治療的66 例正常涎腺切除術的病患進行比較。參與本次實驗的所有病患其在治療前均未進行過化療和放療等相關的腫瘤治療。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學SP 法:EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2 以及MT1－MMP 制劑均選取有美國Santa Cruz 企業生產的制劑進行，SP 試劑選取有博士德生物公司生產的制劑進行。對病患的免疫組織進行染色處理，將標本進行封片處理。

1.2.2 結果判定:一般在細胞質上可檢測到TIMP－2 和MMP－2，在細胞膜上可以檢測到EMMPRIN 和MT1－MMP。通過對免疫組織細胞進行染色，若其出現均勻的棕黃色顆粒，且被上色的顆粒強度要高于非特異性的染色體，則可認定為陽性。在進行陽性的著色的染色體選擇時，需要注意選擇定位好、染色效果好且結構鮮明的顆粒進行對比分析。在每一張切片中選取5 個隨機的區域進行觀察，之后對其中的陽性細胞個數進行記錄，計算出其陽性率。具體計算標準:0 分:陽性細胞數無，著色強度無色;1 分:陽性細胞數≤10%，著色強度淡黃色;2 分:陽性細胞數11%～50%，著色強度棕黃色;3 分:陽性細胞數51%～75%，著色強度棕褐色;4 分:陽性細胞數＞75%。當數量積分×著色強度積分＞3 分即為免疫反應陽性。

1.3 統計學方法:采用SPSS13.0 軟件對本次使用的統計學數據進行分析，所有數據均以均數±標準差表示，計量資料采用t 檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P ＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

一般MMP－2 主要存在于多形性腺瘤腫瘤細胞質當中，在正常的細胞中含量較少，TIMP－2 則主要存在于正常的涎腺上皮細胞和多形性腺瘤細胞當中，MT1－MMP 主要存在于腫瘤細胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于腫瘤細胞膜中。通過對比惡性多形性腺瘤患者、良性多形性性腺瘤患者以及正常的涎腺組織者進行TIMP－2、MMP－2 和EMMPRIN 的相關比較，實驗結果顯示MMP－2 在三類患者中均有升高的跡象，比較差異具有統計學意義(P ＜0.05);TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患，比較差異具有統計學意義(P ＜0.05);EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患，比較差異具有統計學意義(P ＜0.05);MT1－MMP 在三類患者中均出現上升的趨勢，比較差異具有統計學意義(P ＜0.05)，具體情況見表2。

表2 MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP 及EMMPRIN 在人正常涎腺組織和涎腺良、惡性多形性腺瘤中的陽性表達情況(例)

3 討論

若病患的涎腺腫瘤細胞基質和基底膜需要得到有效的降解，起到關鍵作用的為MMP－2，而TIMPs 可以與MMPs 進行相互的促進，對基質的降低起到控制其速度的作用，使腫瘤細胞出現轉移或侵潤等。但在此過程當中，MMPs 在發揮作用時還會受到其他因素的影響，如EMMPRIN 等，這些因子相互作用，共同控制著整個過程。MT1－MMP 可以對大分子的物質進行直接的降解，同時還對纖維蛋白等均可達到降解的作用。通常情況下MMP－2 主要存在于多形性腺瘤腫瘤細胞質當中，在正常的細胞中含量較少，TIMP－2 則主要存在于正常的涎腺上皮細胞和多形性腺瘤細胞當中，MT1－MMP 主要存在于腫瘤細胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于腫瘤細胞膜中，在分析該類疾病的侵襲性時主要通過研究分析EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的數值進行判斷。在本次實驗中，通過對比45 例患有多形性腺瘤的病患、42 例惡性多形性腺瘤病患和66 例正常涎腺切除術的病患，發現MMP－2 在三類患者中均有升高的跡象;TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患;EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患;MT1－MMP 在三類患者中均出現上升的趨勢。該結果表明，目前多形性腺瘤仍然是一種較難治療的疾病，其臨界在良性和惡性腫瘤當中，通過觀察病患的EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的數值可以對病患的涎腺良、惡性多形性腺瘤的相關情況進行判斷，具有良好的表達效果，值得在實際臨床中進行推廣。

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