骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植治療骨不連的實驗研究

劉勝平 (廣東省韶關市粵北人民醫院骨三科，廣東 韶關 512026)

骨折不愈合稱之為骨不連。一般來說，骨組織有良好的愈合能力，大多數骨折患者的骨折部位在進行治療后都會愈合。但人與人之間體質、營養等因素的不同會影響骨折的愈合速度。在所有骨折患者中有約6%的患者愈合及其困難，骨折不愈合使患者活動時有劇烈疼痛感，嚴重影響生活質量。傳統的治療骨不連的方法是骨皮質剝離術。為臨床探尋治療疾病的新技術，本文在實驗兔進行骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植試驗，特選取25 只實驗兔作為研究對象，對其分析后，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:隨機選取25 只實驗兔子作為研究對象，其中雌性兔子13 只，雄性兔子12 只，年齡2 ～4 個月，平均3 個月。兔子體重2.5 ～3.5 kg，平均3 kg。試驗組13 只兔子，其中雌性兔子7 只，雄性兔子6 只，年齡2 ～4 個月，平均(3.27±0.82)個月;體重2.5 ～3.4 kg，平均(3.11±0.97)kg。對照組12 只兔子，其中雌性兔子6 只，雄性兔子6 只，年齡2 ～4 個月，平均(3.26±0.84)個月;體重2.5 ～3.5 kg，平均(3.09±0.96)kg。這些兔子均有我院動物實驗室提供，采用相同飼料喂養，所以兔子活動正常，無感染疾病，適合實驗，差異無統計學意義(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法:將25 只實驗兔子作為研究對象，并建立骨不連模型，經X 線確定為骨不連。對照組兔子采用傳統的骨皮質剝離術的治療方法。試驗組兔子采用骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植的治療方法，在傳統的骨皮質剝離術的基礎上，將兔子麻醉后置于兔子手術臺上固定，制作骨不連模型。在無菌條件下應用18 號骨穿針從股骨遠端內側穿刺抽取骨髓間充質干細胞進行培養，然后進行自體骨髓間充質干細胞移植治療骨不連。治療后2、6、10 周反復進行X 線檢查(儀器為FCR5000 計算機X 線攝影系統，由日本生產)，掃描后在計算機上精密計算治療前后骨折間隙的平均寬度及骨缺損區骨痂的生成量。然后將兔子處死，并在兔子死前2 周和死后1 周連續3 d 注射四環素(生產廠家武漢博士德生物工程有限公司)，取骨折間隙組織染色觀察患者成骨細胞、骨小梁的數量和排列的形成情況。觀察并比較兩組兔子的臨床療效。

1.3 療效評定標準:經過治療10 周，比較兩組兔子骨不連間隙寬度變化和骨不連的愈合情況。骨不連愈合標準:固定物取除后，活動骨折部位無任何疼痛感，無任何并發癥。

1.4 統計學處理:統計分析時采用SPSS17.0 軟件分析，計量資料以均數±標準差表示，用χ2檢驗計數資料，用t 檢驗比較組間，以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組兔子骨不連間隙寬度治療前后變化情況的比較:經對比觀察，試驗組采用骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植的治療方法兔子骨不連間隙寬度變化情況明顯優于對照組，差異有統計學意義(P ＜0.05)。此外，骨缺損區骨痂形成量與骨不連間隙寬度相符合。見表1。

表1 兩組兔子骨不連間隙寬度治療前后變化情況的比較，mm)

表1 兩組兔子骨不連間隙寬度治療前后變化情況的比較，mm)

注:與對照組比較，①P ＜0.05

組別 例數 治療前 治療后試驗組 13 5.79±1.96① 9.89±2.74①對照組12 5.84±1.97 7.78±2.12

2.2 兩組兔子經治療后的骨不連愈合情況:經對比觀察，試驗組患者經過治療后骨不連的愈合率(100%)明顯高于對照組骨不連的愈合率(75.00%)，差異有統計學意義(P ＜0.05)。此外，試驗組兔子骨細胞和間充質細胞增生良好，骨小梁數目明顯增多。見表2。

表2 兩組兔子經治療后的骨不連愈合情況

3 討論

經對比觀察，試驗組采用骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植的治療方法兔子骨不連間隙寬度變化情況明顯優于對照組，差異有統計學意義(P ＜0.05)。此外，骨缺損區骨痂形成量與骨不連間隙寬度相符合。骨不連即骨折不愈合，一般情況下，在經過適當治療后骨折均能痊愈，而對于一少部分患者在骨折后骨折難以愈合，每每活動骨折部位都會有疼痛感，這給患者的日常生活帶來很大不便，嚴重影響生活質量。傳統的骨皮質剝離術能夠治療患者骨不連的情況，然而在經骨皮質剝離術后患者的恢復時間長達3 ～12 個月之久。本研究對兔子自體進行自體骨髓間充質干細胞移植術實驗，實驗證明兔子骨缺損區骨痂形成量與骨不連間隙寬度相對于，應用骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植的兔子，骨痂形成更多，促進兔子骨不連愈合［1-3］。隨著自體骨髓間充質干細胞移植的日臻完善，給骨不連患者帶來了福音。

經骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植治療骨不連后，試驗組兔子經過治療后骨不連的愈合率(100%)明顯高于對照組骨不連的愈合率(75.00%)，統計學上有意義(P ＜0.05)。本研究顯示，對于實驗兔子骨折后骨不連情況的治療上，傳統的骨皮質剝離術在治愈兔子的骨不連方面存在一定的缺陷，治愈率較低，在采用骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植來治療骨不連進行治療后，彌補了傳統方法在治療上的諸多不足［4-6］。臨床有資料顯示，伴有較大骨缺損的骨不連患者僅采用骨皮質剝離術是難以痊愈的，這時進行骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植是及其必要的。

綜上所述，骨皮質剝離術聯合自體骨髓間充質干細胞移植治療骨不連，促進骨缺損區骨痂的形成，提高骨不連愈合率，患者骨不連恢復情況明顯優于傳統方法，應該在臨床上大量應用。

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