兩種定量D-二聚體檢測方法的比較分析

王小杰 于宏亮

兩種定量D-二聚體檢測方法的比較分析

王小杰 于宏亮

目的對本院實驗室采用的兩種定量D-二聚體測定方法進行比較分析。方法隨機抽取100例患者標本， 分別采用干式免疫散射色譜法和免疫比濁法對其D-二聚體含量時行測定， 即每天抽取20例， 連續測定5 d， 然后對兩種方法的測定結果進行比較分析。結果兩種檢測方法測定的結果經比較分析， 差異無統計學意義（P＞0.05）。結論兩種檢測方法相關性良好， 但兩種方法各有優缺， 應根據實驗室實際情況選擇合適的方法。

D-二聚體；檢測；比較分析

D-二聚體是膠聯纖維蛋白降解產物中的一個特征性產物， 是繼發性纖溶的有效指標。它能有效地確定有無穩定的纖維蛋白存在， 其生成或升高反映了凝血和纖溶系統的激活， 因此， D-二聚體血漿水平含量的檢測對各種深靜脈血栓、彌散性血管內凝血（DIC）、心肌梗死、術后肝、腎疾病及女性妊娠等疾病狀態下體內纖溶功能的評價具有重要的臨床意義［1］。本院實驗室采用兩種檢測方法對D-二聚體進行測定，一種是干式免疫散射色譜法， 另一種是免疫比濁法。本文現對兩種方法檢測同一標本的D-二聚體含量是否具有可比性進行對比探討， 結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 標本來源 隨機抽取的100例標本均來自本院就診的門診及住院患者， 其中男50例， 女50例， 年齡18～90歲。

1.1.2 標本處理 抽取待檢者靜脈血1.8 ml于含有109 mmol/L枸櫞酸鈉0.2 ml（抗凝比例為1:9）的真空采血管內， 充分顛倒混勻后用離心機3500 r/min離心15 min， 分離血漿進行測定，2 h內檢測完畢。

1.2 試劑與儀器 干式免疫散射色譜法采用Axis-shield pol AS公司提供的金標定量檢測試劑盒及配套的測讀儀挪威Nycocard Reader；免疫比濁法采用Sysmex CA7000全自動血凝儀及配套試劑。兩種檢測方法的質控品均由以上公司提供。

1.3 原理與方法

1.3.1 原理 干式免疫散射色譜法原理：將血漿加入反應板孔內， 樣品中的D-二聚體分子被包被的D-二聚體單克隆抗體膜捕獲， 然后加入D-二聚體單克隆抗體與膠體金的綴合物溶液， 膜中的D-二聚體與金標抗體發生結合反應， 并產生紅色顏色反應， 顏色深淺與D-二聚體含量呈正比。免疫比濁法原理：樣品中的D-二聚體與包被有高特異性的D-二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結合后， 乳膠顆粒發生凝聚，在405 nm檢測透光強度的變化， 凝聚程度與樣本中的D-二聚體含量呈正比。

1.3.2 方法 每天隨機抽取20例標本（門診、住院患者均有）， 同時用兩種方法進行檢測， 連續測定5 d。每次測試前都嚴格檢查機器是否在正常工作狀態下；每種檢測方法都嚴格按照試劑說明書操作。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件對研究數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

兩種檢測方法測定的結果經比較分析， 差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩種檢測方法測定D-二聚體結果比較（ x-±s， mg/L）

3 討論

D-二聚體檢測最早用于臨床排除各種深靜脈栓塞、肺栓塞風險的評估中， 并且被證實有臨床價值。近年來， 臨床和實驗室嘗試通過動態觀察D-二聚體水平含量來進行手術后血栓風險的評估。月前， D-二聚體檢測在術后心血管疾病、妊娠、惡性腫瘤、肝腎疾病等領域中得到了廣泛應用。正因如此， D-二聚體的檢測在臨床上廣受重視， 它在疾病的診斷、發生發展、監測臨床患者用藥、術前術后凝血機制評估及疾病預后觀察等方面具有越來越重要的臨床價值。但是其檢測也受到很多因素影響， 即只要機體血管內有血栓形成及纖維溶解活動發生， D-二聚體含量就會升高。

D-二聚體檢測方法很多， 但近年來， 隨著技術的日新月異， D-二聚體的檢測方法被不斷地更新改進， 原來的乳膠凝集玻片法和酶聯免疫法已很少用， 主要原因：乳膠凝集玻片法是一種半定量、靠肉眼觀察凝集顆粒的測定方法， 它敏感性差， 準確度低， 只能作篩查用。酶聯免疫法雖然敏感度高，但其操作過程繁雜費時， 且每次實驗都必須做定標， 不利于單個急診標本檢測。

根據上述實驗結果， 本文研究的這兩種檢測方法均具有快速、操作簡便、準確的特點， 尤其干式免疫散射色譜法具有更高的檢測靈敏度和精密度， 且不受高膽紅素及血紅蛋白的干擾， 特異性強［2］， 但是干式免疫散射色譜法測定一個批次的標本量少， 每個標本測定都需要一個單獨的反應板， 且實驗過程中容易受外界因素干擾， 如加樣量或反應時間掌握不準、外界光線的影響等［3］， 雖然如此， 但其配套的測讀儀具有易于攜帶、操作簡便、檢測準確等特點， 特別適合急診檢測， 更適合在基層醫院使用。

免疫比濁法不僅快速準確， 受干擾因素少， 而且一個批次檢測樣本量比較大， 更適合在樣本量大的醫院使用。兩種方法各有優缺， 但實驗結果對比表明， 兩種方法差異無統計學意義（P＞0.05）， 因此選擇哪一種試驗方法都應根據實驗室實際情況而確定。

［1］ 丁振若， 于文彬.現代檢驗醫學.北京：人民軍醫出版社，2007:163.

［2］ 彭黎明， 鄧承祺.現代血栓與止血的實驗室檢測及應用.北京:人民衛生出版社， 2004:637.

［3］ 王金良.實用檢驗醫學實驗技巧.天津:天津技術出版社，2006:150.

Comparative analysis of two quantitative D-dimer detection methods

WANG Xiao-jie, YU Hong-liang.
Department of Inspection, Henan Zhumadian City Central Hospital, Zhumadian 463000, China

ObjectiveTo compare the two quantitative D-dimer detection methods in laboratory of our hospital.MethodsRandom selection was made on 100 patient samples， and dry scattering immune chromatography and immunoturbidimetry were applied for detection of D-dimer， by process of 20 samples per day for 5 d.The results of the two methods were compared and analyzed.ResultsThere was no statistically significant difference of detection results between the two methods （P＞0.05）.ConclusionTwo methods have good correlation， while they have their own advantages and disadvantages.Suitable method should be determined by practical condition of laboratory.

D-dimer; Detectoin; Comparative analysis

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.018

2014-11-12］

463000 河南省駐馬店市中醫院檢驗科