乳腺癌中MTDH的表達與淋巴結轉移的關系

吳穎虹，王仁杰，朱少波，劉小景，張玨，江金梅

(景德鎮市第二人民醫院，江西 景德鎮333000)

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發病率與病死率均較高[1]。而異黏蛋白(metadherin，MTDH)基因可激活多條刺激細胞增殖，侵襲，細胞生存和耐藥的信號轉導通路，可直接影響c-myc、Ha-ras等相應基因的表達水平[2]。本文重點研究了乳腺癌中MTDH的表達及與淋巴結轉移二者關系，現報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 從江西景德鎮市第二人民醫院2008年1月-2013年1月收治的乳腺癌患者中抽取樣本30例，其中24例伴有淋巴結轉移，6例無淋巴結轉移，本次所取的30例患者均分別取腫瘤處組織與癌旁的正常組織(大于5cm)，患者均為女性，年齡37~58歲，平均(30.21±1.8)歲，所選組織標本均經病理確認。

1.2 材料 試劑需用型兔抗人MTDH單克隆抗體，兔抗人雌激素受體蛋白(ER)、HER-2單克隆抗體、兔抗人孕激素受體(PR)以及相應的PV6000SP試劑盒，DAB顯色試劑盒等，所有試劑與材料均來自于北京中山金橋生物技術公司。

1.3 方法 所有免疫組化組織切片均進行水化、脫蠟、加熱修復抗原處理，并使用3%的過氧化氫甲醇溶液來削弱內源性氧化物酶活性，并在山羊血清封閉抗原內，依次滴加抗ER、MTDH、HER-2、PR等抗體過夜，生物素化二抗，DAB顯色，蘇木素復染后封片，結束后將其置于光鏡下觀察，用PBS緩沖液作陰性對照，用乳腺癌陽性標準作陽性對照，所有標本均經DAB染色后，可見細胞核、細胞膜、細胞質中有棕黃色顆粒沉著，從每例患者所選的標準的中選取5個高倍鏡視野，在依照細胞染色程度與陽性染色細胞本身所占比例來作評分[3]。可將染色程度評分情況如下：0分：不著色；1分：淡黃色；2分：黃色；3分：棕褐色；陽性染色細胞百分比評分情況如下：0分：陽性細胞低于25%；1分：陽性細胞在25%~50%之間；2分：陽性細胞在50%~75%之間；3分：陽性細胞超過75%。將染色程度與陽性染色細胞百分比評分相加后的最終結果相加，低于2分為陰性，高于2分為陽性。

2 結果

2.1乳腺癌及癌旁乳腺組織中MTDH蛋白的表達30例乳腺癌患者中23例的組織內有檢測到MTDH蛋白的表達，表達率為76.67%，另有9例患者的癌旁乳腺組織中有檢測到MTDH蛋白的表達，表達率為30%。

2.2 陽性檢出率情況 MTDH基因在淋巴結轉移乳腺癌患者中的陽性檢出率高達87.50%，而無淋巴結轉移的乳腺癌患者中，MTDH陽性率為33.33%(P<0.05)。 見表 1。

表1 乳腺癌患者臨床資料與MTDH基因表達關系

2.3 MTDH、ER、PR及HER-2之間的關系 MTDH、ER、PR及HER-2在乳腺癌組織內的表達為：在乳腺癌組織免疫組化檢測內MTDH均表達在腫瘤細胞膜與細胞漿中(圖1)。僅有極少部分表達在細胞核中，陽性檢出率為76.67%；ER表達于癌細胞的細胞核與細胞漿，陽性率為91.67%(圖2)；PR表達于癌細胞核與細胞漿，陽性率為63.64%(圖3)；HER-2表達于細胞膜上，陽性率為83.33%(圖4)。

圖1 MTDH的表達

圖2 ER的表達

圖3 PR的表達

圖4 Her-2的表達

3 討論

最早發現MTDH是在人原始胚胎星形細胞中[4]，在人體的其它正常組織內完全無表達，但在腫瘤病變區內卻呈高表達，與腫瘤的生長關系緊密[5]。此外，通過對小鼠體內噬菌體進行篩查，得知乳腺癌與MTDH之間關系緊密[6]。因MTDH重點定位在染色體8q22，齊全的MTDH基因有3611bp[7]，其中包括12個外顯子與11個內含子，而第22與1968才是最主要的表達序列，最終編碼產物為異黏蛋白[8]，屬于高堿性Ib性跨膜蛋白，大部分均定位在51與72之間的氨基酸殘基上[9]。

而MTDH大多表達在腫瘤細胞內胞膜與胞漿中，并與人體NF-κB內的p56產生作用，將NF-kB信號通路完全激活，賦予了NF-κB調節人體免疫、炎癥反應、凋亡等多種功能[10]。此外，MTDH表達位置多是由細胞漿向細胞核發生轉移，受TNF-α、HIF-1α等基因的影響較明顯，此種轉移與乳腺癌患者復發轉移有緊密關聯[11]。同時細胞漿向細胞核轉移后，還會與病變腫瘤細胞內的P53基因產生作用，促使人體腫瘤細胞快速增殖[12]，使得乳腺癌疾病不斷惡化，降低了患者生存時間[13]。本文中重點對乳腺癌中MTDH的表達與淋巴結轉移之間的關系展開分析，結果表明，30例乳腺癌患者中23例的組織內有檢測到MTDH蛋白的表達，表達率為76.67%，另有9例患者的癌旁乳腺組織中有檢測到MTDH蛋白的表達，表達率為30%，乳腺癌患者淋巴結快速轉移與體內的MTDH關系緊密(P<0.05)，若患者體內的MTDH基因檢出率越高，說明發生淋巴結轉移的概率越高，其可作為判斷乳腺癌患者有無發生復發轉移的重要指標。此外，MTDH不受ER、PR、HER-2等參數值的影響，ER在癌細胞中的陽性率為91.67%；PR在癌細胞中的陽性率為63.64%；HER-2在癌細胞中的陽性檢出率為83.33%。可見，MTDH不受乳腺癌患者的年齡、ER、PR、HER-2等影響，而乳腺癌)MTDH高表達者發生復發轉移的幾率較大。這為臨床中乳腺癌疾病的治療和研究提供了更多的理論依據。

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